抗人间充质干细胞单克隆抗体的制备及生物学特性研究.pdf
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1、收稿日期: !“#$%“$%“+ 4:?8023+ A4?+ BC?+ 98D /BC 抗人间充质干细胞单克隆抗体的制备 及生物学特性研究 廖志雄%, 沈建根%, 来晓瑜!, 黄EF*3) 的单克隆抗体, 为鉴定、 分选 ;EF*3 奠定基础。 方法: 以多供体 ;EF*3 免疫 GHIGD * 小鼠, 采用杂交瘤技术制备单克隆抗体, 并以间接免疫荧光 法、 免疫组织化学法和流式细胞术等检测单克隆抗体在细胞及组织中的表达。结果: 建立了 # 个能 分泌抗人间充质干细胞的单克隆抗体杂交瘤细胞株, 该组单抗能与人间充质干细胞特异性结合, 而 对所检测的人间充质和非间充质来源的组织和细胞均未见交叉反
2、应, # 个单抗的相对亲和力分别 为: JKG% % L %“、 JKG6 % L %“#、 JK*) % L %“、JK.%! % L %“#、 JKM%“ % L %“#; 表位分析: JKG%、 JK.%!、 JKM%“ 针对相同的表位, JK*) 和 JKG6 则分别针对不同的表位。流式细胞分析显示分离 培养的 ;EF*3 阳性表达率为 JKG% N,+ )(O、 JKG6 NN+ “,O、 JK*) NN+ %!O、 JK.%! (P N(O 和 JKM%“ N)+ ,O。结论: # 株杂交瘤分泌的单克隆抗体均能与人间充质干细胞发生特异性结合, 为 深入研究 ;EF*3 的生物学功能
3、奠定了基础。 关键词 1$T1:85%, FU.VW X108$5B8%, IHR Y10:$Z?!, B*4) )%“), /4Z1C:/0 BB 0802ZABC Z 18C1B9 9ZBB 3?99B33?22Z B3;19; 3B9B(?A;) , ; (?4C) , ?D;E (; MO KMN(?D;E)$=) H !“#$%L5:EEH Q Q 人骨髓间充质干细胞 ((67$ VC。目前, 鉴定 (-5 34 的方法都是通过在培养过程中出现分化表 型, 然后逆推得知是否为 (-34, 尚无直接方法 可以鉴定到 (-34。制备特异性 (-34 表面 膜分子的单克隆抗体对于 (-34
4、 的分选及研 究具有重要意义。本研究应用杂交瘤技术制备 了 : 株抗 (-34 的单克隆抗体 (-./0) , 并对 其生物学特性进行了研究, 现报告如下。 /0 材料与方法 /H /0 细胞、 动物及组织标本来源Q (-34、 WX5 = 细胞、 Y$U“、 血管内皮细胞、 组织标本及大鼠 -34 由浙江大学血液学研究所提供, 3ZER=、 WX5= 由浙江大学免疫学研究所保存, A/XAR 4 小鼠购自上海必凯实验动物中心。 /H 10试剂Q次黄嘌呤 (W) 、 氨基喋呤 (/) 、 胸 腺嘧啶 (P) 为 3“#7$ 公司产品,YZ-I5;B= 为 日本制药株式会社产品, F“.%,5G
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- 关 键 词:
- 人间 干细胞 单克隆抗体 制备 生物学 特性 研究
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