心导管留置术后盲肠结扎穿孔术(CLP)脓毒症动物模型的建立.pdf
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1、2 0 0 8 年1 0 月 第1 8 卷第l o 期 中国比较医学杂志 C H I N E S EJ O U R N A LO FC O M P A R A T I V EM E D I C I N E O c t o b e r 。2 0 0 8 V 0 1 1 8N o 1 0 心导管留置术后盲肠结扎穿孔术( C L P ) 脓毒症动物模型的建立 王宁1 ,周 红2 ,郭毅斌1 ,刘鑫1 ,曹红卫1 ,郑 江1 ( 1 第三军医大学西南医院综合实验研究中心;2 药学院药理学教研室,重庆4 0 0 0 3 8 ) 席、口- 口、! ,、- 、 g 研究报告$ 【翰口e 删 【摘要】目的采用
2、留置心导管采血法检测盲肠穿孔术( c L P ) 后脓毒症模型大鼠血清学指标并观察肝肺组织 病理学形态的变化。为用于治疗脓毒症药物的活性评价的动物模型的建立奠定了实验基础。方法采用改良的心 导管留置术结合盲肠结扎穿孔术( C L P ) 建立脓毒症大鼠模型,术前和术后2 、6 、1 2 、2 4 、4 8h 共6 个时相点采血,动态 浊度法鲎试验检测血浆内毒素( L P S ) 水平,E L I S A 法检测血浆T N F - a 和1 1 - 6 值,全自动血细胞分析仪检测全血白细 胞( W B C ) 及m 小板( P L T ) 值。术后4 8h 观察大鼠肝、肠、肺的病理学形态改变。结
3、果术后大鼠的血浆L P s 、T N F - a 、 I L - 6 及全血W B C 水平均于术后6h 后逐渐升高,1 2h 达到高峰,之后逐渐下降,于4 8h 达到正常水平;P L T 水平6h 闪无明显蛮化,随后逐渐下降,2 4h 达最低值,之后逐渐升高,于4 8h 接近正常水平;肝、肠、肺组织则呈现以肿胀、 炎性细胞浸润为主的病理学改变。结论通过心导管留置术采血观察C I P 模型大鼠血细胞和细胞因子、L P S 的动 态变化是一稳定可靠的实验方法。 【关键词】心导管留置术;脓毒症;盲肠结扎穿孔术 【中图分类号】R - 3 3【文献标识码】A【文章编号】1 6 7 1 7 8 5 6
4、( 2 0 0 8 ) 1 0 0 0 1 2 0 3 C o m b i n a t i o no fH e a r tC a t h e t e r i z a t i o nw i t hC e c a lL i g a t i o na n d P u n c t u r ei nS e t t i n gu paS e p t i cM o d e li nA n i m a l s W A N GN i n g ,Z H O UH o n 9 2 ,G U OY i - b i n l ,L I UX i n 。C A OH o n g - w e i ,Z H E N GJ i
5、a n g ( 1 R e s e a r c hC e n t e ro fE x p e r i m e n t a lM e d i c i n e ,S o u t h w e s tH o s p i t a l ;2 D e p a r t m e n to fP h a r m a c o l o g y 。 S c h o o lo fP h a r m a c y ,T h eT h i r dM i l i t a r yM e d i c a lU n i v e r s i t y ,C h o n g q i n g4 0 0 0 3 8 ,C h i n a ) 【
6、A b s t r a c t 】 O b j e c t i v e T od e t e c tc h a n g e so fp l a s m al e v e l so fs e r o l o g i c a li n d e x e sa n do b s e r v ep a t h o l o g i cd i f f e r e n c e si n t i s s u e so fr a t sb e f o r ea n da f t e rc e c a ll i g a t i o na n dp u n c t u r e ( C L P ) S O 船t op
7、r o v i d er e f f e r e n c es t a t i s t i c sf o rb i o a c t i v i t ya s s e s s m e n to f t h e r a p e u t i ca g e n t sf o rs e p s i s M e t h o d1 h em tm o d e lW a Se s t a b l i s h e db yc o m b i n i n gh e a r tc a t h e t e r i z a t i o nw i t hC L P B l o o ds a m p l e s m 坤o
8、b t a i n e db e f o r ea n da t2h ,6h 。1 2h ,2 4ha n d4 8ha f t e rC L P P l a s m al e v e l so fl i p o p o l y s a e c h r i d e ( L o s ) w e r ed e t e c t e db y t h el i m u l u st e s t ( d y n a m i cn e p h e l o m e t r y ) 1 1 l ep I a 咖aT N F 口a n dI L 6w 啪m 鲫u 蒯b ye r a m e - l i n k
9、e di m m u n o s o r b e n ta s s a y ( E L I S A ) a n dM o o dW B Ca n dP I J Tc o u n 协w e r ee x a m i n e db ya u t o m a t i cb l o o da n a l y z e r P a t h o l o g i c a lc h a n g e so fo r g a n ss u c ha s l i v e r i n t e s t i n ea n d1 u n gw e r ea l s oo b s e r v e da t4 8ha f t e
10、 rC L P R e s u l tL e v e l so fp l a s m am 且f I 【e u sU 塔T N F - aa n dI L - 6a n dW B C c o u n t si n c r e a s e da t6ha f t e rC L P r e a c h e dp e a ka t1 2h ,t h e nd e c r e a s e da n dr e t u r n e dt on o r m a la t4 8h P L Tc o u n t ss h o w e dt i t t l e d i f f e r e n c e sw i t
11、 h i n6 ha f t e rC L P ,t h e nd e c l i n e d ,r e a c h e dt h el o w e s tl e v e la t2 4ha n dr e s t o r e dt on o r m a la t4 8h T i s s u ee d e m aa n d i n f l a m r r m t o r yc e l li n f d t r a t i o nW O r et y p i c a lp a t h o l o g i c a lc l l a I l | 酗i nt h et i s s u e so fl i
12、 v e r ,i n t e s t i n ea n dl u n gi nC L Pr a t s C o n e l u s l o a 【基金项目】国家重点基础研究发展规划资助项且资助( 项目编号:G i 9 9 9 0 5 4 2 0 3 ) 。 作者简介】王宁( 1 9 8 2 一) 女技师,主要从事感染性方面研究。电话:1 3 2 2 8 6 8 6 2 1 8 。E - m a i l :c q m n g w a n g 1 6 3 c n 。 【通讯作者】郏江,电话:0 2 3 6 8 7 5 4 4 3 5 ,E I i l :吐嚼 n h l i l 砸c o l a
13、 c n 。 万方数据 中国比较医学杂志2 0 0 8 年1 0 月第1 8 卷第l O 期C h i nJC o m p M e d ,O c t o b e r2 0 0 8 ,V 0 1 1 8 N o I O 1 3 C o m b i n a t i o no fh e a r tc a t h e t e r i z a t i o nw i t hC L Pp r o v i d e s8n o v e lw a yt oi m p r o v ea n i m a lm o d e l so fs e p s i si nw h i c hs t a b l ea n dr e
14、 l i a b l e o b s e r v a t i o r i b 眦e n s u r e d 【K e yw o r d s 】H e a r tc a t h e t e r i z a t i o n ;S e p s i s ;C L P 寻找拮抗脓毒症的药物一直是国内外研究的重 点和难点。稳定可靠的动物模型是对治疗脓毒症新 药临床前评价的重要手段。盲肠结扎穿孔术( c e c a l l i g a t i o na n dp u n c t u r e ,C L P ) 模型是经典的脓毒症模 型,但通常采用定点活杀动物的方法进行血清学和 病理学的研究实验数据受动物个体差
15、异影响较大, 并且无法实现同一个体的各种血清学指标的动态观 察引。 本研究通过心导管留置收集C L P 大鼠模型的 血液标本,观察术后动物血清学指标及病理学形态 的变化,以期得到更能准确反映脓毒症病理生理学 动态变化的各种实验依据。 1 材料和方法 1 1 实验动物与材料 S D 大鼠5 只,均为雄性,体重2 0 0 2 5 0g ,由第 三军医大学动物中心提供 S C X K ( 渝) 2 0 0 7 0 0 3 。心 导管为美国D o wC o m i n g 公司产品,内径0 5 1m n l ,外 径0 9 4m m 。大鼠T N F - a 和I L 6 检测试剂盒购自深 圳晶美公司
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