氯化镉致心肌细胞线粒体的损伤.pdf
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1、作者单位: !“#$% 长春市, 吉林省疾病预防控制中心毒理所 (吴 晓刚) ; 吉林大学医学部公共卫生学院 (孙志伟) 实验研究 氯化镉致心肌细胞线粒体的损伤 吴晓刚3, 美国 5?* 公 司) ,:0( 美 国 1A2B9 公 司 ) ,罗 丹 明 !%“ (CD609BAEF!%“, 美国 1A2B9 公司) , 碘化丙啶 ()=, 美 国 1A2B9 公司) , () 酶和乳酸脱氢酶 (*+,) 生化试 剂盒 (南京建成生物工程公司) 。 %-原 代 心 肌 细 胞 培 养:参 照 1ABG76E 和 19HA6E !的经典心肌细胞培养方法。断头处死出生 ! ./ 0后的 1+ 大鼠,
2、 取心脏放于冷 +I,9EJ 液中, 剪取心尖部组织, 放于另外的 +I,9EJ7 液中清洗, 将 心肌组织剪碎至 ! . % BB“体积, 除去血迹、 清洗, 后加入 #- KL的胰蛋白酶, 体积大概为心肌组织的 !# 倍左右, 摇匀, “M N 水浴中消化至酶液浑浊, 取 出, 吸弃上清液, 填加酶溶液, 继续水浴消化, 待第二 次消化后, 将上清液保留, 加含有血清的 +3;3 培 养液终止消化, 混匀, 以 !# :O BAE 离心 / .M BAE, 弃上清, 保留沉淀, 加含血清的 +3;3 培养液, 混 匀, 放置。如此消化数次, 将各次保留的沉淀悬液收 集到一起, 混匀, 再次
3、离心 (!# :O BAE) , 弃上清, 沉 淀依然用 +3;3 培养液混匀制成细胞悬液, 过 %# 目尼龙网, 成单细胞悬液, 细胞记数, 加培养液调细 胞数至 P Q !#PO BR, “M N、 PL 5?%培养 S# . !%# BAE, 进行差速离心 %。后将各瓶细胞集中, 混匀, 记数细胞密度, 调至 (%- P . /)Q !#PO BR 加 #- #! BB6RO * 的 :0, 接种至培养瓶中继续培养。 “T 实验分组与处理: 细胞培养 M% .!%# D 后, 对 各组分别加入不同浓度的 505R%溶液 (以 +3;3 培 养液配制, 对照组加去离子水) , 至各组终浓度
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- 关 键 词:
- 氯化 心肌 细胞 线粒体 损伤
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