河北汉族人群MINISTR D17S974 、D11S4463基因座复合扩增及遗传多态性研究.pdf
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1、第2 9 卷第2 期河北医科大学学报V o l . 2 9 N o . 2 2 0 0 8 年3 月J O UR N A L O F HE B E I ME D I C AL UN I V E R S I T Y Ma r . 2 0 0 8 2 7 1 研究快报 河北汉族人群m i n i S T R D 1 7 S 9 7 4 , D 1 1 S 4 4 6 3 基因座复合扩增及遗传多态性研究 白雪, 丛斌 , 李淑瑾, 谷建立, 侯志平, 刘宁 ( 河北医科大学基础医学院法医学系, 河北 石家庄 。 5 0 0 1 7 ) 【 关键词】 河北; 多态现象, 遗传; 聚合酶链反应 I 中图
2、分类号 R 3 9 4 . 5 1 文献标识码7 B 在法医 D N A检验中, 短串联重复序列( s h o r t t a n d e m r e p e a t , S T R ) 技术已 经广泛用于 个人识别和 亲子鉴定。但对于法医检验中一些微量以及降解的 检材, 因S T R技术扩增片段较长( 约 3 0 0 - 4 0 0 b p ) 不能成功得出结论, 会出现“ 优势扩增” 或者“ 无效扩 增” ; 而m i n i S T R分析技术是将引物设计得尽可能 靠近核心序列来缩短扩增片段长度( G1 2 5 b p ) , 因 此将其用于高度降解D N A样本检测可提高个人识 别和亲
3、子鉴定的检测成功率。我们利用荧光 P C R 和毛细管电泳分析技术, 对河北汉族 1 1 8例无关个 体进行了两个mi n i S T R基因座的调查, 首次获得了 D 1 7 S 9 7 4 和D l I S 4 4 6 3 两个基因座群体遗传学数 据, 结果报告如下。 文章编号1 1 0 0 7 - 3 2 0 5 ( 2 0 0 8 ) 0 2 - 0 2 7 1 - 0 2 数为 9 5 * C 3 0 s , 5 5 0C 3 0 s , 7 2 C 4 5 s . 3 0 个循环 后, 6 0 C 4 5 m i n a 1 . 2 . 3 P C R产 物的 检测: 将扩增产物1
4、 p L 、 甲 酞 胺 1 2 p L 和内 标L I Z 5 0 0 0 . 5 p L ( 美国P r o m e g a 公司) 混合变性后, 应用A B I 3 1 0 0 全自 动遗传分析仪( 美 国A B I 公司) 进行自动检测, 确定样本的长度及基 因型。 1 . 2 . 4统 计 学 方 法: 用丫检 验 检 测男 女人 群等 位 基因频率差异, 用G e n e A L E X 6 统计学软件计算检 测基因座的各种法医学参数并判断调查结果是否符 一 合H a r d y - We i n b e r g 平衡定律。 2结果 1 材 料 与 方 法 1 . 1 材料: 1
5、1 8 份河北汉族健康无关个体构椽酸钠 抗凝血液样本由河北省中心血站提供。 1 . 2 方法 1 . 2 . 1 D N A提取: 采用天根生化公司血液基因组 D N A提取试剂盒提取。 1 . 2 . 2 复合扩增: D 1 7 S 9 7 4 , D 1 1 S 4 4 6 3基因座特 异性寡核昔酸引物由上海生工合成, P C R复合扩增 体系( 总体 积 为1 0 p L ) 含D 1 7 S 9 7 4 和D 1 1 S 4 4 6 3 5 0 p m o l 扭L 引物各1 p .L , 模板1 n g , T a g D N A聚合酶 0 . 5 U, 1 0 X b u f f
6、e r 1 . 0 II L , 2 5 m m o l / L M g C 1 2 0 . 6 p .L , 1 0 m m o l / L d N T P 0 . 2 p L ; 在A B I 9 7 0 0 P C R 扩增仪中进行扩增, 9 5 0C 4 m i n预变性, 热循环参 对河北汉族人群 1 1 8份无关个体血样进行 D 1 7 S 9 7 4 和D 1 1 S 4 4 6 3 两个基因座的遗传多态性调 查, 均发现了 6 个等位基因, 两个基因座的杂合度 ( h e t e r o z y g o s i t y ) 分别为0 . 6 2 2 和 0 . 7 5 4 ;
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