瑞芬太尼预处理对短暂脑缺血后大鼠学习记忆能力的影响.pdf
《瑞芬太尼预处理对短暂脑缺血后大鼠学习记忆能力的影响.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《瑞芬太尼预处理对短暂脑缺血后大鼠学习记忆能力的影响.pdf(4页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、瑞芬太尼预处理对短暂脑缺血后大鼠学习记忆能力的影响 孔令锁员, 胡宪文员, 左友梅员, 李光武圆, 梅摇 斌员, 张摇 野员 (员援 安徽医科大学第二附属医院麻醉科, 安徽 合肥摇 圆猿园远园员; 圆援 安徽医科大学神经生物研究所, 安徽 合肥摇 圆猿园园猿圆) 收稿日期: 圆园员园 原园圆 原圆缘, 修回日期: 圆园员园 原园猿 原圆怨 基金项目: 国家自然科学基金资助课题 (晕燥 猿园远苑圆园猿圆) ; 安徽省优秀 青年基金资助项目 (晕燥 园愿园源园员园远愿员源) 作者简介: 孔令锁 (员怨苑怨 原 ) , 男, 硕士, 研究方向: 麻醉药与脑保护, 耘鄄皂葬蚤造: 噪燥灶早造蚤灶早泽怎
2、燥猿圆园员岳员远猿援 糟燥皂; 张摇 野 (员怨远愿 原 ) , 男, 博士, 教授, 主任医师, 硕士生导师, 研究方向: 麻醉药与器官保护, 通讯作者, 耘鄄皂葬蚤造: 扎澡葬灶早赠藻 岳 皂葬蚤造援 澡枣援 葬澡援 糟灶 中国图书分类号: 砸鄄猿猿圆; 砸 猿圆圆援 愿员; 砸 猿猿愿援 远源; 砸 苑源猿援 猿员园援 圆圆; 砸 怨苑员援 员; 砸 怨苑员援 圆 文献标识码: 粤 文章编号: 员园园员 原员怨苑愿 (圆园员园) 园远 原园苑圆苑 原园源 摘要: 目的摇 观察瑞芬太尼预处理对短暂脑缺血后大鼠学习 与记忆能力的影响, 并进一步探讨其作用机制。方法摇 杂阅 大鼠 源园 只,
3、随机分为假手术 (杂澡葬皂) 组、 模型 (酝燥凿藻造) 组、 瑞芬太尼预处理低剂量 (砸孕悦员) 、 中剂量 (砸孕悦圆) 和高剂量 (砸孕悦猿) 组, 每组 愿 只。采用两侧颈总动脉夹闭 愿皂蚤灶 加放血 性低血压 (猿园 耀猿缘 皂皂匀早) 模型, 实现大鼠短暂性全脑缺血, 瑞芬太尼预处理分别以 园郾 圆、 园郾 远 和 圆 早噪早 原员皂蚤灶原员速率 尾静脉泵注缘 皂蚤灶, 停止缘 皂蚤灶, 重复进行猿 次。再灌注猿 凿 后 利用 酝燥则则蚤泽 水迷宫测量术后大鼠空间学习与记忆的能力, 用 免疫组织化学法测定大鼠海马 悦粤员 区胆碱乙酰转移酶 (糟澡燥鄄 造蚤灶藻 葬糟藻贼赠造贼则葬灶
4、泽枣藻则葬泽藻 , 悦澡粤栽) 的表达。结果摇瑞芬太尼中、 高 剂量组和假手术组大鼠的潜伏期明显短于模型组 (孕 约 园郾 园缘) , 在记忆保留实验, 瑞芬太尼中、 高剂量组和假手术组 大鼠的靶象限时间百分比明显高于模型组 (孕 约园郾 园缘) , 而海 马 悦粤员 区 悦澡粤栽 的表达中剂量、 高剂量组也明显高于模型组 (孕 约园郾 园缘) 。结论摇瑞芬太尼预处理对短暂脑缺血后大鼠 学习与记忆能力有明显改善作用, 其作用机制可能与 悦澡粤栽 表达上调有关。 关键词: 瑞芬太尼; 脑缺血; 胆碱乙酰转移酶; 学习记忆; 酝燥则鄄 则蚤泽 水迷宫 摇 摇 术后认知功能障碍 (责燥泽贼燥责藻则葬
5、贼蚤增藻 糟燥早灶蚤贼蚤增藻 凿赠泽鄄 枣怎灶糟贼蚤燥灶, 孕韵悦阅) 指患者在麻醉手术后出现的中枢神 经系统并发症, 其临床特点为学习记忆能力减退、 焦 虑、 人格改变、 语言理解能力和社会融合能力减 退 员。瑞芬太尼作为一种新型超短效纯 阿片受 体激动剂, 对脑的缺血辕 再灌注损伤具有保护作 用 圆, 但瑞芬太尼预处理对脑缺血损伤后认知功能 的影响尚未见报道。本研究在短暂性全脑缺血模型 上观察瑞芬太尼预处理对大鼠学习与记忆能力的影 响并初步探讨其作用机制。 员摇 材料与方法 员援 员摇 动物分组摇选择合格 杂阅 大鼠,(猿园园 依 圆园) 早 源园 只 (由安徽医科大学实验动物中心提供)
6、, 随机 分成 缘 组, 每组 愿 只: 假手术组 (杂澡葬皂 组) 、 模型组 (酝燥凿藻造 组, 输注生理盐水) 、 瑞芬太尼预处理低剂量 组 (砸孕悦员, 园郾 圆早噪早 原员皂蚤灶原员) 、 瑞芬太尼预处理 中剂量组 (砸孕悦圆, 园郾 远 早噪早 原员皂蚤灶原员) 、 瑞芬太尼 预处理高剂量组 (砸孕悦猿、 圆 早噪早 原员皂蚤灶原员) 。实 验前适应性驯养 员 憎噪, 维持环境温度 圆园益 左右、 湿 度 远园豫 耀 苑园豫。各组受试动物禁食 员圆 澡, 自由饮 水。 员援圆摇 模型制备摇根据两侧颈总动脉夹闭加低血压 法 ( 贼澡藻 圆鄄增藻泽泽藻造鄄燥糟糟造怎泽蚤燥灶 垣 澡赠责
7、燥贼藻灶泽蚤燥灶 , 圆灾韵 垣 匀) 猿, 建立大鼠短暂性全脑缺血模型, 以 猿缘 皂早 噪早 原员戊巴比妥钠腹腔注射麻醉, 于大鼠颈部及左、 右 侧腹股沟区常规备皮, 消毒。园郾 圆缘豫 布比卡因局麻 下行颈部正中切口, 暴露并分离双侧颈总动脉, 右侧 股动脉置管接 孕燥则憎藻则蕴葬遭 监护仪 (粤阅 公司, 澳大利 亚) 监测平均动脉压, 左侧股动脉置管接肝素化注 射器以备放血, 当平均动脉压降至 猿猿 皂皂匀早 左右 时, 用动脉夹夹闭双侧颈总动脉 愿 皂蚤灶, 之后松开恢 复血流, 并把注射器内的血液重新推注入股动脉, 尾 静脉置管接微量泵 (浙江史密斯医学仪器有限公 司) , 瑞芬
8、太尼预处理组于缺血前 猿园 皂蚤灶 泵入 缘皂蚤灶 猿 个循环不同剂量的瑞芬太尼 (宜昌人福有限责任 公司, 批号 园愿园愿园圆) , 缝合伤口, 肌注 愿 万单位青霉 素预防感染。假手术组不进行动脉穿刺及颈总动脉 夹闭。模型组以与瑞芬太尼预处理组相同的速率和 容积输注生理盐水。在模型制备和预处理期间, 通 过日光灯照射保持大鼠肛温在 猿苑益左右, 动物手术 结束苏醒后置室温 圆园益动物室分笼饲养, 予以普通 饮食。 员援 猿摇 大鼠空间学习与记忆能力测定摇各组于术后 凿 猿 行 酝燥则则蚤泽 水迷宫实验 源 (中国医学科学院药物 研究所研制) 。 员援猿援 员摇 逃避潜伏期实验摇 每次分别从
9、 源 个象限 员辕 圆 弧度处面朝壁入水, 在 怨园 泽 内找到平台的时间为 逃避潜伏期 (藻泽糟葬责藻 造葬贼藻灶糟赠 责藻则蚤燥凿) 。图像自动监视 苑圆苑中国药理学通报摇 悦澡蚤灶藻泽藻 孕澡葬则皂葬糟燥造燥早蚤糟葬造 月怎造造藻贼蚤灶摇 圆园员园 允怎灶; 圆远 (远) : 苑圆苑 耀猿园 系统追踪大鼠的游泳轨迹, 记录大鼠寻找固定平台 的时间 (潜伏期) 。如果大鼠找到平台, 记录实际找 到的时间并允许其在平台上停留 员缘 泽; 如果 怨园 泽 内 未找到平台, 则记录为 怨园 泽, 并将其引导至平台上停 留 员缘 泽。平台停留后放入笼中休息 员园 耀圆园 皂蚤灶, 之 后开始下一次
10、测试, 源 次成绩的平均值为当日成绩, 连续 缘 凿, 实验于每天 员愿 颐 园园 耀圆园颐 园园 进行。 员援 猿援 圆摇 空间探索实验摇 凿 远 (术后 凿 怨) 撤除平台, 大 鼠于原平台对侧象限入水, 观察其 员 皂蚤灶 内停留靶 象限游泳时间的比例。 员援 源摇 海马 悦澡粤栽 免疫组化染色摇 水迷宫测试结束 后, 大鼠经腹腔注射 猿豫 戊巴比妥钠 (远园 皂早 噪早 原员) , 经升主动脉灌注肝素化的生理盐水 员缘园 皂造 , 继 源 豫多聚甲醛源园园 皂造 灌注。取全脑置源豫多聚甲 醛溶液中后固定 圆源 澡 , 常规石蜡包埋。参照大鼠脑 立体定位图谱, 定视神经交叉后为海马部位,
11、 常规固 定和包埋脑标本, 用切片机连续 源 皂 厚的冠状切 片、 脱蜡, 悦澡粤栽 一抗按 员 颐 员缘园 稀释, 用 杂鄄孕 法进行 免疫组化染色(粤月悦酝 公司产品) , 同时设阴性对照 (孕月杂 代替第一抗体) , 在倒置相差显微镜 (韵造赠皂鄄 责怎泽, 允葬责葬灶, 伊源园园) 观察大鼠海马 悦粤员 区, 随机各取 远 个视野, 用 陨酝早藻鄄责则燥 责造怎泽 图像分析系统测算其平 均光密度 (葬增藻则葬早藻 燥责贼蚤糟葬造 凿藻灶泽蚤贼赠,粤韵阅) 值。 员援 缘摇 统计学处理摇 数据以 杂孕杂杂 员员郾 缘 处理, 计量资 料以珋曾 依 泽 表示, 采用单因素方差分析和 蕴杂阅
12、 法两两 比较。 圆摇 结果 圆援 员摇 各组大鼠潜伏期比较摇如 云蚤早 员 所示, 从 凿 猿 开始, 瑞芬太尼预处理中剂量组、 高剂量组和假手术 组大鼠的潜伏期明显短于模型组 (孕 约 园郾 园缘) , 模型 组和低剂量组大鼠潜伏期差异无统计学意义 (孕 跃 园郾 园缘) ; 而游泳速度各组间的差异无统计学意义 (孕 跃园郾 园缘, 如 云蚤早 圆) 。 圆援 圆摇各组大鼠靶象限时间百分比比较摇如 栽葬遭 员 所示, 瑞芬太尼预处理中剂量组、 高剂量组和假手术 栽葬遭 员摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 贼澡藻 灶怎皂遭藻则 燥枣 贼蚤皂藻泽 葬灶凿 贼蚤皂藻 责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 泽
13、贼则葬凿凿造蚤灶早 贼澡藻 燥则蚤早蚤灶 责造葬贼枣燥则皂 择怎葬凿则葬灶贼 蚤灶 枣蚤增藻 早则燥怎责泽 (珋曾 依 泽) 郧则燥怎责 栽蚤皂藻 责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 泽贼则葬凿凿造蚤灶早 贼澡藻 燥则蚤早蚤灶 责造葬贼枣燥则皂 择怎葬凿则葬灶贼 辕 豫 晕怎皂遭藻则 燥枣 贼蚤皂藻泽 泽贼则葬凿凿造蚤灶早 贼澡藻 燥则蚤早蚤灶 责造葬贼枣燥则皂 杂澡葬皂源园援 苑 依缘援 苑源援 愿 依员援 远 酝燥凿藻造圆怨援 源 依缘援 远裕裕圆援 猿 依园援 缘裕裕 砸孕悦员猿员援愿 依远援 怨猿援 圆 依员援 远 砸孕悦圆猿愿援 园 依缘援 员源援 园 依园援 怨 砸孕悦猿猿怨援怨 依源援
14、远源援 圆 依园援 愿 摇 摇 裕裕孕 约园郾 园员 增泽 泽澡葬皂;孕 约园郾 园缘 ,孕 约园郾 园员 增泽 皂燥凿藻造 云蚤早 员摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 贼澡藻 造葬贼藻灶糟赠 责藻则蚤燥凿 蚤灶 枣蚤增藻 早则燥怎责泽 摇 摇 裕裕孕 约园郾 园员 增泽 泽澡葬皂;孕 约园郾 园缘 增泽 皂燥凿藻造 云蚤早 圆摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 贼澡藻 泽憎蚤皂皂蚤灶早 则葬贼藻 燥枣 则葬贼泽 蚤灶 枣蚤增藻 早则燥怎责泽 组大鼠的穿越平台次数及靶象限时间百分比均明显 高于模型组 (孕 约 园郾 园缘) ; 模型组和低剂量组大鼠靶 象限时间百分比差异无统计学意义 (孕 跃园郾 园
15、缘) 。 圆援猿摇 各组大鼠海马免疫组化染色结果摇海马 悦粤员 区免疫组化结果显示 悦澡粤栽 阳性细胞质或突起被染 成棕黄色, 胞核不着色, 和文献报道一致。与 杂澡葬皂 组相比, 酝燥凿藻造 组 悦粤员 区有明显的损伤, 缺血区神经 纤维排列紊乱; 而 砸孕悦圆 组和 砸孕悦猿 组可以明显降低 这种损伤。与 杂澡葬皂 组相比, 酝燥凿藻造 组 悦粤员 区 悦澡粤栽 的表达水平明显降低 (孕 约 园郾 园员) ; 而 砸孕悦圆 组和 砸孕悦猿 组与 酝燥凿藻造 组比较, 则 悦粤员 区 悦澡粤栽 的表达水 平明显增加 (孕 约园郾 园员) , 而 砸孕悦员 组和 酝燥凿藻造 组比较 差异无统计
16、学意义 (孕 跃园郾 园缘) ; 以上表明脑缺血辕 再 灌注损伤可以使海马 悦粤员 区 悦澡粤栽 表达明显减少, 而给予瑞芬太尼预处理后其表达明显增加, 且存在 一定的剂量依赖趋势。见 云蚤早 猿粤、 月。 猿摇 讨论 摇 摇 随着麻醉、 手术方法和适应证的不断拓展, 术 愿圆苑中国药理学通报摇 悦澡蚤灶藻泽藻 孕澡葬则皂葬糟燥造燥早蚤糟葬造 月怎造造藻贼蚤灶摇 圆园员园 允怎灶; 圆远 (远) 云蚤早 猿摇 栽澡藻 悦澡粤栽 泽贼葬蚤灶蚤灶早 蚤灶 悦粤员 则藻早蚤燥灶 燥枣 澡蚤责责燥糟葬皂责怎泽 蚤灶 枣蚤增藻 早则燥怎责泽 摇 摇 粤:则藻责则藻泽藻灶贼葬贼蚤增藻 枣蚤早怎则藻 燥枣
17、悦澡粤栽 蚤皂皂怎灶燥澡蚤泽贼燥糟澡藻皂蚤泽贼赠 泽贼葬蚤灶蚤灶早 ( 伊 源园园) ;月:泽贼葬贼蚤泽贼蚤糟葬造 则藻泽怎造贼泽摇员: 泽澡葬皂 早则燥怎责; 圆: 皂燥凿藻造 早则燥怎责; 猿: 砸孕悦员 早则燥怎责; 源: 砸孕悦圆 早则燥怎责; 缘: 砸孕悦猿 早则燥怎责援 裕裕孕 约 园郾 园员 增泽 泽澡葬皂;孕 约 园郾 园员 增泽 皂燥凿藻造 中可能引起患者脑缺血、 缺氧的危险因素逐渐增多, 孕韵悦阅 的发生率也呈逐年上升的趋势, 少数患者甚 至发生永久性认知功能障碍, 严重影响其预后和生 活质量 缘。因此, 寻找有效的早期干预措施现已成 为医学界的研究热点。 摇 摇 本实验采
18、用的两血管结扎同时结合放血性低血 压 (圆灾韵 垣 匀) 方法, 此模型是 杂皂蚤贼澡 于 员怨愿源 年首创, 后经 酝葬贼糟澡藻贼贼 等 猿改良, 因其保存了脑血管的完整 性, 故可有效地模仿临床心脏骤停或缺血性卒中情 形, 此次研究中我们利用的 酝燥则则蚤泽 水迷宫被广泛认 为研究空间学习和记忆机制方面的可靠方法 源。 研究结果显示, 模型对照组大鼠较假手术组和中、 高 剂量组的逃避潜伏期明显延长, 穿越原平台次数和 靶象限时间百分比均明显减少, 说明短暂脑缺血大 鼠的记忆质量和记忆速度下降, 而中、 高剂量瑞芬太 尼预处理对脑缺血辕 再灌注大鼠的空间学习与记忆 有明显的改善作用, 且存在
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 芬太尼 预处理 短暂 缺血 大鼠 学习 记忆 能力 影响
链接地址:https://www.31doc.com/p-3716397.html