碱性成纤维细胞生长因子对非贴壁骨髓基质前体细胞增殖及分化作用的研究.pdf
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1、碱性成纤维细胞生长因子对非贴壁 骨髓基质前体细胞增殖及分化作用的研究 邵君飞“茅彩萍#“王旻晨“董宁征 ! 苏州大学医学院基础医学系“苏州“% # , “ “ 1# % “ “ %“ ( ( = ( 4= 9 中国 图 书 分 类 号“? + ! ! %?! % / G + / 9 P : P G ( 4 5 0V G / ; 9 ( 0 ( R Z A : : ( 6 5 P / :!L 9 !c 6 G 4 6 9 R ; 5 9!A 0 I K A % 小鼠抗C E A单抗后! 用吸管轻轻吹吸非贴壁骨髓基质前体细 胞 P ; ( 0A K + Mb显色! 室温孵育# “ # ,4 6 9
2、出现红色! 双蒸水洗涤后! 用苏木精复染! 甘油凝胶封片! 摄像并随机记录2个高倍视野阳性 细胞数# 即转至另一平皿 中进行培养! 同时对平皿中的贴壁细胞加新鲜培养 液继续培养#对照组 倾注培养的第%,代cMK E 形成的E f I + 数相对恒定! 而第#代cMK E形成的 E f I + 有所减少#Y f f处理后! 与对照组相比! 形 成的E f I + 数目都增加$ $%“ “ ,“ ! 见. 5 Y# ( (“- R Y R对O K # “骨髓细胞形成% R N P 的影响 “在高细胞密度培养条件下! 容易产生过多克隆及 克隆相互重叠的现象! 从而导致计数不准确#为避 免这一问题!
3、本实验研究了Y f f对A K C细胞在 S N C B条件下E f I + 形成的影响#如同HN C B条 件下一样! 对照组从第#代到第$代E f I + 数目都 保持相对恒定# “)R 5 9 / 4 / 9 P( Y f f( 9E f I + $e“=!$%“ “ ,3 “ ( 9 P G ( 0! ($%“ “ #3 “HN C B ( )“- R Y R对! G L #细胞增殖和分化的作用“为 更好地说明Y f f对A K C细胞增殖分化的刺激 作用! 用免疫组化法检测C E A来研究Y f f对 A K C细胞增殖的作用! 用测定/型胶原来研究 Y f f对A K C细胞向成骨
4、细胞分化的影响( 对照 组C E A阳性细胞数为% “e% 2e! 细胞经Y f f 诱导后! 阳性细胞数达$ “e1 “e( 对照组L型胶原 检测阳性细胞数为2e# !e! 细胞经Y f f诱导 后! 阳性细胞数达- ( 9 G ( Z P / :( % 前成骨细胞# 而对成熟的分化好的成骨细胞作用较弱# 甚至有研 究认为它对分化好的成骨% 软骨细胞有抑制作用# 并 抑制骨基质如L型胶原的合成! -“$但体内研究认为 Y f f能促进骨折愈合# 防止骨不连 !%“$某些骨% 关 节形成异常的遗传性疾病# 如软骨发育不全% 致命的 L L型发育不良P ; 5 9 5 P ( V ; ( G 6
5、 Z : V 0 5 : 6 5 P Z V /-( # 也 是由于Y f f基因及其受体的突变所致$可见Y f + f在骨与关节形成中起重要作用$ 有研究表明! !#2“# 骨髓基质前体细胞在体外培 养过程中# 有的贴壁# 有的非贴壁# 非贴壁细胞形成 的E f I + 数目较贴壁细胞多# 并且分化程度高$本 研究以骨髓基质前体细胞中非贴壁生长的基质前体 细胞A K C( 为对象# 研究了Y f f对其增殖及分 化的影响$研究结果提示) 骨髓细胞中的许多基质 前体细胞以非贴壁形式存在 5 P ( G 6 9P ; /V G / : + / 9 /( / 7 5 4 / P ; 5 : ( 9
6、 /: P 6 4 ( 0 ( 9 Z ( G 4 5 P 6 ( 9#/ 7 V 5 9 : 6 ( 9 5 9 ( : P / ( Y 0 5 : P 6 6 / G / 9 P 6 ( 9Y ZG 5 PY ( 9 /4 5 G G ( 8: P G ( 4 5 0 / 0 0 : % * / - ; “ “ 2 )E ( # #( )$ 6H#D ( _ (#* 5 : / 0 / G 5 P 6 ( 9( G 5 P P ( G : + % 7 %=#% “ “ # / 9 ( P Z V /Y Z / 7 5 4 / P ; 5 : ( 9 / I ( . - + ( . / .
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