秋茄提取物抗大鼠实验性胃溃疡作用研究.pdf
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1、中国药 理学 通报Chi 吟 尸 丙 口 用 “ 比 砧 乡 七 创B 以 阮玩 2 兀 刃 ,O cl ; 23( 1 0): 1 3 79一 83 1 3 7 9 , 秋茄提取物抗大鼠实验性胃溃疡作用研究 符 健1 2 , 韩 丽 2 , 邢佳 兰 2 , 姚 茂忠 气 鲍时 翔 ( 1 . 中国热带农业 科学院热带生物技术研究所; 2 . 海南医 学院药理学 教研室, 海南海口 5 7 11 o 1) 中国图书分类号: R 一 3 3 2 ; R2 84. 1 ; R3 29. 24; R3 6 3 一 3 2 ; R5 7 31 0 22 ; R5 7 3 . 1 仍 3 1 ; R9
2、756 文献标识码: A 文章编号: 1 田1 一 1 9 7 8 ( Z J 洲 ) 7 ) 1 0 一 1 3 7 9 一 0 5 摘要: 目的 探讨海洋红树林植物秋茄枝水提取物活性部分 B 部位幼粗 注 姗 Bof舀 翻 阴叨卿公. m d , of触 了 诚滚 必ca l砚 企 1 , S A E Kc ) 对实验性大鼠胃溃疡的 作用及其作用机制。方法 将大鼠随机分为正常对照组、 模型 对照组、 给药组( 铭。 、 2 叨、 印叱 9 一 , 3 个 剂 量 组) 和 西咪 替丁 组。 各 组每 天 灌胃 给 药( 赋形剂, SAE K CB和西咪替丁) , 连续3d 。除正常对照 组
3、外, 其余各组大鼠在最后一次给药后通过水应激18 建 立水浸束缚应激型胃溃疡大鼠模型, 测定溃疡指数( UI) , 计 算溃疡抑制率; 同时建立幽门结扎型胃溃疡大鼠模型, 造模 收稿日 期劣 2 创7 一 叱一 29, 修回日 期 2 . 幻 7 一 肠一 30 作者简介: 符 健(l959 一 ) , 男, 硕士1 教授, 硕士生导师, 研究方向: 药理毒理学, Tey F 路: 。 5 9 吕 扬日 9 3 1 5 2 , E 一 呻1 甸i an . h n 毗 1 的 。 。; 鲍时 翔(I %石 一 ) , 男, 博士, 教授, 通讯作者, Tel o 8 9 8 - 肠5 驯 拓
4、9 5 , E 一 卜 玩q h 卜 q 砂少 目 1 佣 cDm . o n 后17h 测定溃疡指数, 计算溃疡抑制率, 检测胃液量、 胃 蛋 白酶活性, 血清和胃组织一氧化氮( N O ) 含量。结果 sAE Kc B的高、 中、 低3 个剂量组能明显减轻应激型胃 溃疡 大鼠胃 猫膜损伤的程度( 尸( 。 Dl尹( 。 . 01, 。 。 . 05) , 溃疡 抑制率分别为模型对照组的0 . 4 工 1 、 0 . 4 以、 0 . 2 5 4 ; SAE K CB 能明显减轻幽门 结扎型胃 演疡大鼠胃 枯膜损伤的程度( p 均 0 . 01) , 溃疡抑制率分别为模型对照组的。 , 5
5、56瓜 3 61、 0 . 3 肠。 48 。 ,240 tng k g 一 , 剂量 组能明 显 降 低胃 蛋白 酶活 性 和胃液量 P 0 . 01 或尸 众0 5 ) 。给药3 个剂量组均能提 高胃 组织N O 含量, 其中2 叨、 印mg 吨一 剂量组能明显开 高血清N O 含量( p均 0 . 01) 。结论S A E K CB 有明显抗 应激型和幽门 结扎型大鼠胃溃疡的 作用, 其效应呈剂量依赖 性。对于幽门 结扎型大鼠 其机制可能在于减少胃 液分泌、 降 低胃蛋白 酶活性、 提高血清和胃 组织中N O水平。 关键词: 秋茄; 胃 溃疡模型; 抗溃 疡作用 红树为自 然分布于热带、
6、 亚热带海岸潮间带的 木本植物, 通常生长在港湾河口地区的淤泥质滩涂 T h e rol e o f tomo r n ecros i s fac t o rr e l a t e da P o P to s i s l n d u c i n gl i g a n da n d P o ly P e P t i d e fr o mChle 明 y s fa欣rii nU V A i u d l l ceda P o P t o si s i nH a C a Tc e l l s w A N Gz h en一 1 1 1 , 2 , llji n 一 l i a n , , W A N G
7、C h u n 一 b o l ( 1 . 酬 刀 夕 如 劲 “ 1吧 肖 好施dic以肠肠 移 心 , Qi 刀 夕 加 。 5 石 。 刀 公 朋 9 co, ndinQi 咭 由 幻必 刀 夕 如 A 喊r a c t : A j m TO 咖e s ti g a t e th e i m p 韶 t ofU V Ao n e x p 心s i o nofto mou r n 即 联1 5 阮to r re l at e d叩o p t 胎 1 5 1 】l d u c i 叱1 1 邵 nd ( T R A I L ) an d stu街th e ro l e o f T R A I
8、 L i nU V A 一 i n d u c e da lx lp l o si s ofH a C aT c e l l s 朋w el l as th ei nflu e n c eof POl y 伴 p t i d efrom Chla n 芍 ,faori ( PCF ) o n T R A I La p o p t o t i c p athw 即i n d u c e d 场U V A Me t h o d s C e l l s w e redi v i d e d i n tofi v e gr o l l p s : c o n t m l 叫 p , U V Am od
9、e l 脚u P , U v A+ 5 . 6 9m m o l L 一 1 PCF gro叩, U V A 十 2 84m m ol L 一 L PCF g r O u p , u v A + 1 . 4 2m m o l L 一 1 此r脚u p . E x p re s s io nle v e l of TRA I L o R N Aw asa ss a , 妇b y Real 一 Ti m e PCR . W e s t - e mb l o t 朋al y s i s w asu se d tod e I e nni neth e p ro te i n l e v - e l o
10、fTRA I Landc as p ase一ac ti v a t i o n .Thee B 七 c t o f T R A I Ln e u t rali z at i on anl i 肠d y o nU V A 一 i n d u c e da p p - 加 5 1 。 。 al 、i nve 丽 即 . e d . R es u l tsTRAILm R N 人 an d p role i n k ve l s in c re ased aft e r 8 ) c m 一 Z U V A ra d i- 2 仅 刃 71, ch班 na; 22 头 亡 声 飞 月 t s 口 刀
11、目 翻 ri 娜 ofJi娜 月 汤 勿 。 5 九 J 凡 凌 如堵 2 仅 刃 7 1 , ch姗 ) at i o nandt h ed i s c re P anc yw as s i 卯i fi c antc o m P ared w i thc o n l o l grou P ( P 0 . 0 1 ) . T R A I Ln e u t rali z at i o n anti b o 街b ad i n 卜 i b i 协 rye ffec t o n U V A 一 1 1 】d l l c e d 叩o PtO- s i s ofH a C aT c e l l s ,
12、 1 . 4 2一 5 . 6 9m m ol L 一 1 民Fi n - h i b i t e dU V A 一 耐u c e de x p 肥 s s i o nofTRA I Li nH aCaT c e l l s d o s e 一 dsp e n d e n t l y ( p 0 . 05, P 0 . 0 1 )PCFat - te n u ated U V A 一 i n d u c e dc a s p a s e 一ac ti v at i o n i n a d o s e - d e pen d e n t m a n n e r . Cou c l 此 i o n
13、s The e 盯 h a n c e m e n t of TRA I L ex卿5 盛 oni ndu c e d 协U V Ai n H aCaTc ell, 1 。 d i c at e d th e i n v o1 v e m e n t OfT R A I L i n U V A 一 i n d u e e d 伞 叩t o s i s . PCFc o u l dat le n u a teU V A 一 笙 n d u c 司 T R 内 I Le x - p re s s i o n a n db l o c kT R A I La p o p t o t i cp a t
14、 h w 即, w h i c h m 叮b e attri b u te d l o i tsan t i . O p o p t o t i e e ffec t . K ey wor ds: U V A ; Po师ePtide fromch坛 刀 忿 ”fa, ( 代F); H aCaT; tu m our nec 仍 石 、 factor re lateda 环 Pto- s i s i n d u c i n g l i g a n d ( T RAI L ) ; c a s p a s e 一 ; a p o p t o s i s 万方数据 1 3 8 0 中国药 理学通报ch呻
15、 e P 为 。 之0 乒1业B J汉 距 亡 认 2 佣7 既t; 23( 1 0) 上, 是 一 类 特 殊的 陆 海过渡 湿 地生 态系 统。 对 红 树组, 36毗 k g 一 4 d 一 , ) 。 灌胃 给 药, 给药 体 积10ml 林 植物活 性成分的结构研究结果表明, 红树林植物 k g 一 , 连续3 d 。 含有 裕类、 凿 体、 环硫醚、 糠质、 黄铜、 多糖、 生物碱、末次给 药l h 后 参照 李仪奎和陈奇等, , 的方 苯 醒、 丁 香 醛等 多 种 化学 成分L 。 根据 调查和 散在法, 大鼠 禁 食( 可 饮水) 24h 后( 半 空腹状态) , 用乙 的
16、研究发现红树林植物具有止血、 抗艾滋病、 抗肿醚将其轻度麻醉, 固 定四 肢捆绑于 铁丝网上, 使其不 瘤、 抗菌、 抗 氧化、 抗高血糖、 抗溃疡、 杀虫等多 种药能自 由 活动。 然后头部向上垂直浸人20的 恒温 理 学 及 生 物 学 活 性 一 , J 。 Pe o ra 、 Be re n gu e r 等 . 5 通水 浴 锅 中, 液 面 保 持 在 胸 骨 剑 突 水 平。 空白 组 不 给 过乙 醇盐酸所致的 小鼠胃淡疡和双氯芬酸所致的 大予束缚水浸处理。 水浸应激18ho 鼠胃 溃疡模型发现, 红树林植物Rh认 少 人 。 ra。刀 9 花水浸应激结束后 将大鼠 处死, 开
17、腹, 分别结扎责 ( R hiz叩 ho race , ) 的 树皮水提取物具有明 显的抗溃门 和幽门 后将胃 取出, 沿胃 大弯 剪开, 放人冰生 理盐 疡作用。日 前尚未见有关红树林植物秋茄( Kan 硬 云 2一水中冲 洗干净, 展平, 滤纸吸干。观察胃 部豁 膜面溃 如ca n 凌 1) 提取物抗溃疡的报道。本文初次探讨秋疡形成的情况, 用游标卡尺测量每一个溃疡的长 度 茄提取物对大鼠 实验性胃溃疡的治疗作用及相关机( 如为针尖大小的溃疡点, 10个相当于溃疡长 度 1 制。m m ) , 将每只大鼠 所有损伤长度的总和作为该鼠的 1 材料与方法溃疡指数。按照公式: 溃疡抑制率 / %
18、二 ( 对照组演 1 . 1 材料疡指数一给药组溃疡指数) / 对照组溃疡指数 x 1 . 11 受 试药 红树林植物采自 于海南省文昌 市1 00%, 计算溃疡抑制率。 的东寨港, 经中国 热带农业科学院鲍时翔教授鉴定1 . 2 . 2 大鼠幽门 结扎型胃溃疡试验取体重1 80 为 秋茄( Kande油ca 诚1)。 经粉碎后蒸馏水回流 提一 2 209拿乙 各半S D 大鼠60只, 称重后随机 分为6 取, 真空干燥。 经大孔树脂分离、 干燥后得到A 、 B 、组, 分组及给药情况同前。末次给药2卜 后开始造 c 3 部 分 颗 粒 。 取B 部分混 悬于 体积 分 数为。 . 005模,
19、 参照 李 仪 奎、 陈 奇和云 彩麟 等j 一 创 的方 法, 造 结 的竣甲 基纤维素钠作为受试药。扎型胃 溃疡模型。 造模后禁食禁水17 h , 眼眶后静 11 . 2 阳 性对照药 西咪替丁片: 规格: 0 . 2 酬 片,脉丛取血2 一 3 耐, 向不抗凝管中注人1 . 5 司, 静置 批号: 2 0 0 5 1 1 01, 广东台城制药有限公司生产( 国药2 一 3 h 后3 5 00r 。 i n 一 离心10m in , 取上层血清于 准字: H 440 2 0894) 。一 2 0 低温冰箱保存备测血清N O 值。 1 . 1 . 3 实 验动物 S P F 级SD 大鼠,
20、体重1 50一 240各组大鼠 采血后处死, 取出胃, 收集胃液, 3 叹X x 9 , 由湖北省实验动物中心提供, 许可证号: scx Kr 而 n 一 , 离心巧m in , 吸取上清液, 记录胃 液量后, ( 鄂) 2 侧 3 众洲 5 。大鼠 颗粒饲料购自 海南省实验动一 20低温冰箱保存待测胃 蛋白 酶活性; 然后沿胃 物中心。大弯将胃 剪开, 用冰生理盐水冲洗干净, 将胃自 然展 1 . 1 . 4 主 要试别 一氧化氮( N O)测定试 剂盒购自开, 滤纸吸 干, 观察前胃 部赫膜面溃疡形成的晴 况, 南京建成生物工程研究所。用游标卡尺量取通过溃疡中 心的溃疡最大纵径和最 1 .
21、 1 . 5 主 要仪器 游标卡尺: 广州工具厂; 恒温 水大横径, 计算溃 疡面积( 溃疡面 积二 节x 纵径 / Z x 横 浴锅: 上海医 用恒温 设备厂; 玻璃匀浆器: 上海实 生径 /2。 注: 面积 l m 衬 的溃疡点, 10个相当于溃 细 胞生物技术有限公司; 离心机: E p p en do rf5 8 1 氏疡面积l m 衬) 。留 取前胃 部距溃疡边缘3 m m以 722 型 光栅分 光光 度计: 上海第三分析仪器厂; 冷冻内的 组织0 . 3 9 , 用冰 生 理盐水制成体积分数为住1 高 速离心机: 日 本工械株式会社本社工场20P R 一的 匀 浆, 3 卫 : m
22、 in 一 冷 冻离 心巧而 n 后, 取 上清 52D 。放人E P管中, 一 20低温保存待测胃组织 N O含 12 方法量。 1 , 2 . 1 大鼠 水浸束缚应激型胃 贵疡试验 取体重溃 疡指数( Ul) 的 测定: 溃疡纵径和横径的 测量 16 。 一 2 009 , ?占 各 半S D 大鼠60只, 称重 后随机分及溃疡面 积的 计 算见上述。 按照oka 玩法, 将每只 为6 组: 空白 对照 组( 体积分 数为000 5 梭甲 基纤维大鼠 溃 疡面 积的 总和分为五个等级作为溃 疡指数, 素 钠) 、 模型 对照组( 体积分数为0 . 005 梭甲 基纤维即当 溃疡面积( m
23、m Z ) 为1 一 12、 13一 25、 26一 37、 38 素 钠) 、 受 试 药 高 剂 量 组( 4 80m g k g 一 d 一 ) 、 受一 50, 50或 穿 孔 时 , 溃 疡 指 数 分 别为1 、 2 、 3 、 4 、 5 。 试 药中 剂 量 组( 2 40m g k g 一 , d 一 【 ) 、 受试 药 低 剂 量计 算出 溃 疡 抑 制 百 分率 。 组( 60m g k g 一 , d 一 , ) 、 阳性对照药组( 西咪替丁演 疡 抑 制 卿%二 对 照 组 溃 疡 指 数一 给 药 组 溃 疡指 万方数据 中国药 理学通报chi 尸 尹 泊 r 砌
24、 习 查 呀 应 创刀 2 全 邢 2 侧 打oc七 23( 1 0) 1 3 8 1 数) / 对照组溃疡指数时00%。 胃 蛋白 酶活 性采用改良M e tt 氏法, 即毛细玻管 试验川测定。 血清和胃 组织一氧化氮( N O ) 含量采用硝酸还 原酶法按试剂盒说明书测定。 13 统计学处理 实验结果采用5 璐511 . 5 统计软 件进行分析, 以二 , , 表示, 各组间比 较采用方差分 析和q 检验。 2 结果 2 . 1 秋茄枝水提取物B部位抗大鼠水浸束缚应激 型胃溃疡作用 T ab l 表明, 秋茄枝水提取物B部 位各剂量组与模型对照组比 较, 大鼠溃疡指数均明 显下降( p 0
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- 关 键 词:
- 提取物 抗大 实验性 胃溃疡 作用 研究
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