纳米炭示踪胃癌前哨淋巴结的实验研究.pdf
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1、丧盅志篇篡孤恳怒;加。山n 渺c 3 ,:2 8 7 2 9 。J S o u t h e a s t U n i v ( M e d S c i E d i ) 一一。、7 一。 2 8 7 纳米炭示踪胃癌前哨淋巴结的实验研究 范新,陈卫东,汤文浩,柏志斌 ( 东南大学附属中大医院普外科,江苏南京2 1 0 0 0 9 ) 摘要 目的:通过纳米炭示踪兔胃癌前哨淋巴结的对照研究,为纳米炭应用于胃癌的临床研究打下基础。 方法:兔胃癌病灶周围浆膜下分别注射9 9 T c “一S C 和纳米炭混悬液( 卡纳琳) ,记录两种示踪法检测到前哨淋 巴结( S L N ) 的例数、S L N 数目及分布情况
2、,计算两种示踪法检测S L N 的敏感性、特异性、假阴性率和预测区域 淋巴结转移的准确性以及S L N 和非前哨淋巴结( N S L N ) 的转移率。结果:纳米炭与9 9 T c “一S CS L N 的检出率 及数目,显示S L N 分布情况、S L N 的转移率差异均无统计学意义( P 0 0 5 ) 。两种示踪法检测S L N 的敏感 性、特异性、假阴性率、准确性差异均无统计学意义( P 0 0 5 ) 。结论:纳米炭示踪胃癌前哨淋巴结效果与放 射性核素蚪T c “一s c 是一致的,但纳米碳示踪法具有显影快而持久、无放射性、使用方便等优点,可替代放射性 核素用于胃癌的临床研究。 关键
3、词 胃癌;前哨淋巴结;纳米炭 中图分类号 R - 3 3 ;R 7 3 5 2 文献标识码 A 文章编号 1 6 7 卜6 2 6 4 ( 2 0 1 0 ) 0 3 一0 2 8 7 一0 4 d o i :1 0 3 9 6 9 j i s s n 1 6 7 卜6 2 6 4 2 0 1 0 0 3 0 1 2 T h ee x p e r i m e n t a ls t u d yo nt h es e n t i n e l l y m p hn o d e0 fg a s t r i cc a n c e r b yc a r b o nn a n o p a r t i c l
4、 e ss u s p e I 塔i o ni n j e c t i o n F A NX j n ,C H E NW e j 。d o n g ,T A N GW e n 。h a o ,B OZ h i - b j n ( 珧P 州舰脚o ,鹏以s u 俘,z 胁n g 如日却洫z ,S D 眦I l e t 娩瑙妙,肫彬增2 1 0 0 0 9 ,吼i M ) A b s t r a c t o b j e c t i V e :T oe v a l u a t et I ec l i n i c a la p p l i c a t i o n “n a n o c a r b o
5、ni nv i s u a l i z a t i o no fs e n t i n e ll y m p hn o d e ( S L N ) i ng a s t r i cc a n c e rs u r g e r y M e t h o d s :R a b b i tg a s t r i cc a n c e rm o d e lw 鼬e s k 出l i s h e db yt m n s p l a n t a t i o no fV x 2 c e l l si n t ot l l eg a s t r i cs e m s a N a n o c a r b o na
6、 n d9 9 T c m S Cw e r e i n j e c t e dr e s p e c t i v e l yi n t ot h eg a s t r i cw a l li nr a b b i t m o d e lo fg a s t r i cc a I l c e r 1 1 1 ec a s e s ,t I en u l b e r sa n dt h ed i s t 曲u t i o no fS L Nw e r ed o c u m e n t e d n e n 山es e n s i b i l i t y , s p e c i f j c i t
7、) r ,f a l s en e g a t i v er a t ea n dt l l ea c c u r a t er a t eo fl o c a ll y m p hn o d em e t a s t a s i sw e r ec 出c u l a t e d ,t h em e l a s a s i s r a t i o0 fS L N ,N S L Nw e r ee v a l u a t e d R e s u l t s :A sf 缸硒t h ei s o l a t i n gr a t e ,m en u m b e r s ,t h ed i s t
8、r i b u t i o na n dt I e m e t 鹊t a s i sr a t eo fS L Nw 鹊c o n c e m e d ,n os i 印i f i c a md i H e r e n c ew 鹊s h o w nb e t w e e nt h et w og r o u p s ( P 0 0 5 ) M o r e o v e r ,m es e n s i b i l i t y ,s p e c i f i c i t y ,f 砒s en e g a t i V er a t ea I l dt l l ea c c u r a t er a t
9、 eo fl o c a ll y m p hn o d em e t a s t a s i sw e r e n o td i r e n c eb e t w e e nt w o 目r o u p s ( P 0 0 5 ) C 蚰c I I l s i o 璐:N a n o c a r b o nh 船as i m i l a re f f e c tw i t h9 9 T c m - S Ci nS L N “s u a l i z a t i o n F u l t h e n n o r e ,i tc anb eu s e di ng 嬲研cc 锄c e rg u r g
10、 e r yt or e p l a c em d i o n u c l i d e ,c o n s i d e d n gi t s q u j c k 。 d e t e c t i o n ,n o n r a d i o a c t i v i t ) ra n dc o n V e n i e n c e K e yw o r d s g a s t r i cc a n c e r ;s e n t i n e ll y m p hn o d e ;n a n o e a r b o n 收稿日期 2 0 0 9 一1 2 3 0 修回日期 2 0 1 0 卜2 0 基金项目
11、江苏省科技厅资助项目( 编号:B s 2 0 0 6 0 4 6 ) 作者简介 范新( 1 9 6 6 一) ,男,江苏海门人,主治医师,医学硕士。E 1 l I a i l :6 【3 0 8 4 1 2 6 咖 通迅作者 陈卫东E 。m i l :9 3 6 0 9 8 8 1 2 Q Q c 0 M 万方数据 2 8 8 东南大学学报( 医学版)2 0 l O 年6 月,2 9 ( 3 ) 前哨淋巴结( s e n t i n e ll y m p hn o d e s ,S I N ) 是指最先 接受肿瘤引流的第一组区域淋巴结。前哨淋巴结的概 念首先应用于阴茎癌患者区域淋巴结状况的评估
12、, 此后,前哨淋巴结活检( S L N B ) 在临床上相继应用于乳 腺癌、甲状腺癌、外阴癌、头颈部肿瘤等实体肿瘤,以指 导手术方案的制定。国内外的学者也基本达成共识: 如果S L N 无肿瘤细胞转移,那么其他区域性淋巴结发 生肿瘤转移的可能性极小,不必进一步扩大手术范围; 如果前哨淋巴结有转移,则其他淋巴结转移的危险性 很大,需要扩大手术范围旧引。然而,前哨淋巴结活检 技术应用于胃癌的临床还有争议HJ 。本研究通过纳 米炭示踪兔胃癌前哨淋巴结的对照研究,为纳米炭应 用于胃癌的临床研究打下基础。 1 材料与方法 1 1 材料、试剂及仪器 V x :细胞株( 东南大学放射与介入中心提供) ;日
13、本大耳兔3 6 只,雌雄各1 8 只( 东南大学医学院动物实 验中心提供,3 4 月龄,体重2 O 一2 5k g ) ;纳米炭混 悬液( 重庆莱美药业产品,平均粒径1 2 9n m ) ;放射性 核素9 9 T c “一S C ( 南京森科医药技术有限公司产品) ; y 计数器探测仪N A V I G A T O RG P s ( 美国外科公司产 品) ;显微摄像系统( 日本N i k o n 公司产品) ;普通显微 镜( O l y m p u s 公司产品) ;腹部手术器械( 东南大学医学 院动物外科提供) 。 1 2 实验方法 1 2 1 V X :传代兔的制备将一1 9 6 液氮保存
14、的 V x :肿瘤细胞株按一般细胞培养技术进行复苏后,将 肿瘤细胞悬液调整成1 0 6m m q 活细胞浓度。取该悬 液0 5m l 接种于4 只种兔后腿外侧的肌肉内,2 周后 可触及肿块即制成了荷瘤兔。取荷瘤兔后腿生长活跃 的肿瘤组织,剔除筋膜和坏死组织,取边缘生长旺盛的 鱼肉样组织,剪成1 2m m 3 大小组织块用于种植。 1 2 2 兔V X :胃癌模型的制作 剩余3 2 只大耳兔 称重,静脉麻醉后,取仰卧位固定,上腹部局部剃毛,碘 伏消毒。取上腹正中切口进腹( 切口长2 3c m ) ,找 到胃窦部,切开胃窦前壁浆肌层,将肿瘤组织块2 枚装 载于硬膜外穿刺针内,通过硬膜外穿刺针将肿瘤
15、组织 埋植于黏膜下,结扎预置的浆肌层缝线,关闭胃壁伤 口,关腹。麻醉清醒后送动物中心喂养。 1 2 3 胃癌前哨淋巴结两种示踪方法的对照研究 动物喂养3 周后再次剖腹,统计建模成功率。于荷瘤 兔胃肿瘤病灶周围1 0c m 处选择四点,每点浆膜下分 别注射”T c “一S CO 1I I l l ( 0 2 “C i ) 和纳米炭0 1I l l l ( 5m g ) 。纳米炭注射试剂后l 5m i n 就会显示出2 4 条染色的细小淋巴管,沿着显影的淋巴管就会发现 黑染的淋巴结,最早被染色的淋巴结判定为纳米炭组 前哨淋巴结( S L N ) ,观察并记录被纳米炭黑染的前哨 淋巴结数目和分布情况
16、。辨T c “S C 注射后每隔1 0m i n 分别用y 闪烁计数器( N A V I G A T O RG P s ) 检测9 9 T c ” 示踪的前哨淋巴结的数目和分布情况,直至1 2 0m i n 结束;y 闪烁计数器探测放射线水平高于背景1 0 倍以 上的淋巴结判定为核素组S L N ,记录其数目及分布情 况。分别切取纳米炭和孵T c “- S C 示踪的S L N 、胃肿瘤 病灶及胃区域非前哨淋巴结( N S L N ) 作病理分析。 1 2 4 病理学检查两种方法示踪的s L N 、胃肿瘤病 灶及N s L N ( 非前哨淋巴结) 等标本经1 0 甲醛溶液固 定后,制作石蜡切片
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- 纳米 炭示踪 胃癌 前哨 淋巴结 实验 研究
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