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1、维生素C 一 钙配方制品的驱铅动物实验研究 王少华, 徐鹏 ( 兰州铁路局疾病预防控制所, 甘肃 兰州 7 3 0 0 0 0 ) 摘要: 通过动物实脸观察新型驱铅营养保健食品维生素c- 钙配方制品对实脸小戒驱铅作用的效果, 高剂1组小成的肝 铅含圣显著低于模型片照组, 高 剂全组小风的股骨铅含责显著低于 模型对照组。表明维生素C 一 钙配方制品对有高铅摄入 的小风有驱铅作用。因此. 维生素C 一 钙复合营养片是一种可以早期服用、 副作用小、 服用方便、 经济有效的防治铅中 毒药 物。 关健词: 维生紊C 一 钙配方制品; 胆铅实 脸; 生产; 加工 中图分类号: R一 3 3 2文献标识码;
2、 B文章编号: 1 6 7 1 一 1 2 4 6 ( 2 0 0 6 ) 2 0 一 (0 0 9 8 - 0 2 本实验旨在以血铅含量为指标观察维生素C一 钙复合营 养片对大鼠驱铅作用的效果, 为研制经济、 有效的防治铅中毒 药物提供科学依据。 1实验材料 1 . 1帷咬素C- 书氛 合苦养片伪坡产与A a X - 1 . 1 . 1维生紊C - 钙3 0 合营养片的配方 该产品主要营养成分 为: 钙、糖、维生素 C ,蛋白质等。具体成分如下:白砂糖粉 8 . O k g , 占5 7 . 1 %; 碳酸 钙4 . 5 k g ( 元素钙1 . 5 k g ) , 占3 2 . 1 %;
3、乳 粉0 . 7 k g , 占5 . 0 %; 柠橄酸0 . 2 k g , 占1 . 4 %; 维生素C 0 . 1 k g , 占0 . 7 %; 沙棘汁0 . 4 比, 占3 . 0 %; 海藻酸 钠0 . l k g , 占0 . 7 %; 合 计1 4 . O k g , 制成1 . 1 7 万片产品, 每片1 . 2 g 。 每片 含钙( 元素计) 约为8 0 一 1 0 0 m g , 含维生素C 约为5 一 7 m g . 1 . 1 . 2维生紊C一 钙JL合营养片生产工艺流程 ( 1 ) 流程简图: 原料粉碎*称取、 配料叶搅拌、 混匀*加果汁搅拌、 混匀、 造颗 粒、干
4、燥、整粒压片 一铝塑分装*成品。 ( 2 ) 具体流程: 原料 处理: 白砂糖、 碳酸钙经超微粉碎机粉碎, 过50 目 筛与乳粉充 分混匀后备用。配料、 调和: 按一定比例称取各种配料后, 先 将柠檬酸和维生素C 加水溶解, 并与野果汁充分混合, 经纱网 过滤, 搅拌均匀备用。 然后在混匀的配料中加人果汁, 一边加一 边充分搅拌, 至物料呈硬膏状为宜。 造粒: 将硬膏状物料置于 孔径2 毫米的 造粒机内造粒。 干燥、 整粒: 将造料所得样品放 人沸腾干燥机中进行风热干燥。 干燥温度为8 0 1c, 时间为2 一 3 小时。出料为多孔性疏松颗粒, 喷人适量的鲜奶精调味。压 片、 包装: 物料颗粒
5、经异型压片机冲压成片( 片重约1 . 2 克) , 然 后将成品进行铝塑包装, 包装规格为每板6 片。 1 . 2实脸用t 要试刊 ( 1 ) 肝素钠: 1 5 0 U / m g , 上海惠 世生化试剂有限 公司生产, 批 号0 1 1 2 0 8 , ( 2 ) 0 . 9 %抓化钠注射液: 四川蜀乐药业股份有限公 司生产, 批号0 2 1 1 0 6 6 , ( 3 ) 冰醋酸: 分析纯, 天津市化学试剂一 厂生产, 批号2 0 0 0 2 1 2 0 ( 4 ) 无水乙 醉: 分析纯, 天津市化学试剂 有限公司生产, 批号2 0 0 1 0 8 2 1 , ( 5 ) 草酸: 分析纯,
6、 西安化学试剂 厂生产, 批号0 0 0 5 2 7 , ( 6 ) 双蒸水: 兰州医学院第一附属医院药 剂室生产。( 7 ) H N 0 3 : 分析纯, 西安化学试剂厂生产, 批号 0 0 0 1 2 6 0 ( 8 ) 高抓酸: 分析纯, 天津市东方化工厂生产, 批号 0 1 0 2 2 4 , ( 9 ) 盐酸: 分析纯, 甘肃省盐锅峡化工总厂生产, 批号 一9 8一 2 0 0 0 7 1 4 , 1 . 3 实脸用盛要仪畏 ( 1 ) 7 2 2 型 光栅分光光 度计: 上海第三分析仪器厂生产。 ( 2 ) 电 子分析天平: 1 2 0 型, 瑞士D re c i s a 公司生产
7、。 ( 3 ) 台 式离心机: 4 0 0 R型, 德国H e r a e u s 公司生产。( 4 ) 离心机: L D 4 一 2 型, 北京 医用离心机厂生产。 ( 5 ) 原子吸收分光光谱仪: G F U 一 2 0 2 型, 北 京分析测试仪器厂生产。( 6 ) 超低温冰箱: M D F 一 3 3 0 型, 日 本 S A N Y O E L E C T R I C C O . L T D生产。 2维生素C一 钙复合曹养片中维生紊C的测定 采用高效液相色谱法测定。 2 . 1 色 件条件 仪器: H P 1 1 0 0 ; 色谱 柱: O D S C l 8 ( 2 5 0 m m
8、 x 4 . 6 m m ) ; 流 动 相: 1 %乙酸; 流速: 1 m l / m i n ; 监测波长: 2 6 2 n m , 2 . 2挥备处理 准确称取样品0 . 5 一 1 . 呢, 加人1 %草酸溶液5 0 . O O m l 。 超 声提取3 0 分钟, 然后抽滤, 取滤液1 0 闪进样。 读取 样品 峰面 积。 2 . 3协唯曲伐 准确 称取5 0 m g 维生素以优级纯) , 1 %草酸溶液溶解并于 容量瓶中 定容成5 0 m 1 , 分别用1 %草酸稀释成0 . 0 , 2 5 . 0 , 5 0 . 0 和1 0 0 . O w g / m l 的 标准应用液, 在
9、仪器基线稳定后, 各进样 1 0 闪 。以 其含量对标准峰 面积作图, 绘制标准曲 线。 2 . 4计葬 根据样品峰面积, 查标准曲线得进样液中维生素C的含 量, 按下 式计算: 维生素C ( m g / g ) 二 5 0 x a / 1 O O O W, 式中a 为 从 曲 线中 查得的 样品 含 量( W g / m l ) , W为 样品 重量( g ) o 2 . 5 侧定佑果 每片 制品 含 维生素C 为5 . 8 一 6 . 2 m g o 3维生素 C一 钙配方制品中钙的测定 采用原子吸收光谱法测定。 3 . 1祥品肴处9 所有玻璃器皿均在H N 0 3 ( 1 : 1 ) 中
10、浸泡2 4 小时, 后用蒸馏 水冲洗, 再用去离子水冲 洗2 一 3 遍, 烘干防尘备用。 准确取l m g 样品, 加人到经酸处理过的5 0 m l 三角瓶中, 加6 m 1 混合酸 ( 分 析纯浓硝酸: 高抓酸二 4 : 1 ) 加热至无色, 若仍有色, 再加混酸至 万方数据 不出现颜色, 白烟冒 尽, 再加5 m H N 0 3 蒸干, 之后加现配盐酸 和硝酸混合溶液( 1 : 1 ) l o m 1 , 在电炉上加热近干时取下, 用去离 子水少量多次转移至l o w l 比 色管并定容至l o m l 待测。 3 . 2仪摇友侧试条件 使用的仪器为G F U一 2 0 2 型原子吸收分
11、光光谱仪 ( 北京 分析测试仪器厂生产) , 测试条件为: 波长4 2 2 . 7 n m , 空气阴极 灯电流4 m A , 狭缝0 . 2 m m , 空气流量2 0 0 L / h , 乙炔流量6 0 L / h , 3 . 3称难曲伐的 喇备众解舀的阅定 吸取l m g / m l 的C a 标准 贮备液5 . O m l 于1 0 0 m 1 容量瓶中, 用去离子水定容为5 0 W g / m l 标准应用液。 再分别吸取0 . 5 , 1 . 0 , 2 . 0 , 3 . 0 , 4 . O m l C a 标准应用液于1 0 0 m 1 容量瓶内, 用去离 子水稀释至刻度、 混
12、匀。 在仪器测试条件下, 分别测出各标准的 吸光值, 进行直线回归。 结果表明, 工作曲线线形良 好, C a 的r 值为0 . 9 8。在同样条件下, 测定样品, 并根据标准曲线计算样 品含量。 3 . 4衬衡众令准确众的洲试 称同一份样品, 按操作方法重复测定6 次, 其变异系数在 0 . 9 %一 5 . 4 %之间, 同时用加标法做回 收试验, 得到C a 的回收 率一般在9 1 . 8 %一 9 2 . 5 %之间, 说明方法是稳定、 可靠的。 3 . 5 侧定给辜 每片制品C a ( 元素计) 为8 8 一 9 5 m g o 4维生素C一 钙复合曹养片驱铅作用动物实验 4 . 1
13、 宾脸动物 一级昆明种雌小鼠9 6 只,由国家医药总局四川抗菌素工 业研究所实验动物中心提供 ( 合格证号: 川实动管质第0 9 2 号) 。 4 . 2刹贵这种 0 . 8 g / k g “ b w , 1 . 6 g / k g “ b w , 2 . 4 g / k g “ b w ( 分别相当于 人体推荐摄人量4 . 8 g / 人 日 的1 0 , 2 0 , 3 0 倍) 。 4 . 3 1要仪畏与试刹 原子吸收仪、 E D T A , ( C H 3 0 0 0 ) 2 P b 、 硝酸、 高抓酸等。 4 . 4 实脸方挂 小鼠按体重随机分为6 组, 分别为正常对照组、 模型对
14、照 组、E D T A对照组、维生素C 一 钙复合营养片0 . 8 g / k g “ b w , 1 . 6 g / k g b w , 2 . 4 g / k g b w 3 个剂量组。 除正常对照组外, 其余 各组饲料均含l 0 0 p p m 铅( 以乙 酸铅水溶液形式加人) , E D T A 对 照组饲料每千克加有E D T A 8 9 . 8 m g , 3 个试验组分别按相应剂 量折算 ( 按小鼠的日 进食量为其体重的2 0 %计算) 后在饲料中 加人维生素C 一 钙复合营养片( 粉碎后加人) 。 喂饲4 周后处死 动物( 每组1 0 只) , 采集血液、 肝、 肾、 股骨 标
15、本, 用硝酸一 高抓 酸混合液消化后按常规原子吸收法测定铅含量。 4 . 5 实脸么格晚计 使用S P S S 统计软件作数据处理, 各指标组间差异的显著 性检验使用方差分析和 检验。 4 . 6 份书 ( 1 )维生素C 一 钙复合营养片驱铅作用对小鼠体重的影 响。各组小鼠的初始体重、 中期体重和结束体重均无显著性差 异( 见表 1 ) , 衰l 各组小限的初始体,、 中期体,、 结束体,比较 初始体重中期体重结束体重 组别 动物数 ( 只) 体重( 克)体重( 克)体重( 克) 正常对照1 6 2 4 . 3 2 :0. 3 5 模型对照1 6 2 4 . 2 8 t 3 . 0 3 E
16、D T A对照1 6 2 4 . 2 0 t 3 . 5 2 低荆 f ( 0 . 8 g /kg b w ) 1 6 2 4 . 3 7 : 3 . 8 4 中 剂 f( 1 . 6 g / k g b w ) 1 6 2 4 . 0 6 1 3 . 3 1 高 荆 It ( 2 . 4 g / Ic g b w ) 1 6 2 4 . 0 6 1 3 . 8 6 1 5 2 8 . 6 014 . 7 8 1 4 1 6 2 8 . 2 113 . 3 6 1 4 1 6 2 8 . 0 9 t 3 . 8 6 1 3 1 5 2 9 . 2 0 t 4 . 0 8 1 3 1 5 2 8
17、 . 4 9 x 4 . 3 2 1 4 1 6 2 9 . 5 11 4 . 8 3 1 3 ( 2 ) 维生素C 一 钙复合营养片驱铅作用对小鼠 血铅、 肝铅、 肾铅、 股骨铅含量的影响。 维生素C 一 钙复合营养片驱铅作用对小鼠血铅含童无显 著影响( 见表2 ) o 表2 维生索C 一 钙盆合曹养片对小暇血铅含且的影响 组 别血 铅 含 f( y4 / m l ) 正常对照 模型对照 E D T A对照 低 荆I t ( 0 . 8 g / k g b w ) 中 剂f ( 1 . 6 g / k g b w ) 高 剂 It ( 2 . 4 g / k g b w ) 0 . 0 1
18、2 to . 0 0 5 0 . 4 3 1 t 0 . 0 8 1 0 . 3 8 9 t 0 . 1 5 2 0 . 4 1 2 t 0 . 1 3 4 0 . 4 9 3 t 0 . 1 3 7 0 . 4 1 9 t 0 . 0 9 3 注: 与正常对照组比较, “ P 0 . 0 5 维生素C 一 钙复合营养片YA铅作用对小鼠肝铅含t的影 响, 高剂量组小鼠的肝铅含量显著低于模型对照组, 表明其对 有高铅摄人的小鼠有驱铅作用( 见表3 ) o 衰3 雄生交C 一 钙复合曹养片对小吸肝铅含.的影晌 组别肝铅含t ( P g / m l ) 正常对照 模型对照 E D T A对照 低 剂
19、I t ( 0 . 8 g / k g b w ) 中 剂A( 1 . 6 g / k g b w ) 商剂lt( 2 . 4 g / k g b w ) 0 . 0 4 2 1 0 . 2 7 0 0 . 3 5 7 t 0 . 2 3 2 0 . 2 9 3 t 0 . 2 6 3 0 . 3 2 9 t 0 . 2 0 9 0 . 3 0 1 t 0 . 2 1 3 0 . 2 4 6 t 0 . 1 7 1 注: 与正常对照组比较, “ P 0 . 0 5 , 与模型对照组比较, P 0 . 0 5 维生素C 一 钙复合营 养片驱铅作用对小鼠肾铅含童无显 著影响( 见表4 ) o 裹
20、4 维生. C一“M合曹葬片对小皿怪铅含.的形响 组别 肾铅含f ( w g / m 1 ) 正常对照 模型对照 E D T A对照 低剂f ( 0 . 8 g / k g b w ) 中 剂f ( 1 . 6 g / k g b w ) 高 剂t( 2 . 4 g / k g b w ) 0 . 2 9 6 x 0 . 1 0 4 2 . 2 6 6 1 0 . 9 1 5 * 1 . 8 7 2 :1 . 5 6 5 1 . 7 9 6 11 . 3 3 4 * 2 . 1 0 1 t 1 . 9 4 8 1 . 8 2 2: t 1 . 5 4 7 注; 奋 与正常对照组比 较, P 0
21、 . 0 5 维生素C 一 钙复合营养片驱铅作用对小鼠股骨铅含童的 影响, 高剂量组小鼠的股骨铅含量显著低于模型对照组, 表明 其对有高铅摄人的小鼠有驱铅作用( 见表5 ) 0 表5 雄生班C 一 钙盆合曹养片对小吸股.铅含,的影响 组别 正常对照 模型对照 E D T A对照 低剂 I t ( 0 . 8 g / k g b w ) 中 剂A ( 1 . 6 g / k g b w ) 高 剂I t ( 2 . 4 g / k g b w ) 股骨 铅含 f ( A g / m l ) 1 . 6 8 0: t 1 . 5 7 8 1 2 5 . 3 4 2 t 4 0 . 8 1 2 9 6 . 6 6 2 t 5 1 . 8 0 3 1 3 1 . 9 4 6 t 印. 6 4 5 1 3 6 . 1 8 1 * 5 7 . 2 0 3 * 9 8 . 4 3 4 t 4 5 . 1 5 4 注: 与正常对照组比较, “ P 0 . 0 5 , 与模型对照组比 较户P 0 . 0 5 5 结论 ( 1 ) 维生素C 一 钙复合营养片对铅中 毒动物( 实验大鼠、 小 鼠) 有驱铅作用, 而且不会影响机体锌、 铁等的代谢。 2 ) 维生素c 一 钙复 合营养片 可作为驱 铅药物。 e 一9 9一 万方数据
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