缺氧及复氧对去整合蛋白和金属蛋白水解酶10和淀粉样β分泌酶MRNA水平的影响.pdf
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1、作者单位: !“#$ 首都医科大学北京宣武医院神经内科 通信作者: 贾建平, %7 = 组及各自对照组。缺氧 组在缺氧条件下 (?#60, # = 后复氧, 分别于 “、 !0、 0 = 利 用逆转录D聚合酶链反应(5FDG!2 、 12 1; ! I “2 “#、 “2 “$H、 “2 “!) , 缺氧培养 0 = 后复氧各 时间点 797:!“ 7 = 后复氧!0 = 和0 = 表达上调 (分别较对照组上调$!2 #和 $#2 !; ! I“2 “0H、 “2 “#) 。结论8 缺氧及复氧可以降低 797:!“ 转录水平和增加 ;76=? $#331A“#$ %7!2 -M 12 1(!
2、I “2 “#, “2 “$H, “2 “!)L M(PPORO-L L(7 =4,RK Q4(-LK PLOR RO4+NSO-L(4- .(L= 0 =4,RK =NQ4+(2F7。这些研究提示血 管因素在 79 的发病过程中起协同促进作用,但其 0?中华神经科杂志 0“1 年 0 月第 $? 卷第 0 期8 “? 年 月至 “3 年 A 月采用人神经母细胞瘤 BC4BD3D 细胞缺氧模型, 研究缺氧及复氧对细胞活性和 0102!“、 :0; 和 2G 细胞培养及处理方法: BC4BD3D 细胞用按 !P !比例混合的 H! 和 2的孵养箱内进行培养。细胞 A T ? $ 换液 ! 次,
3、间隔 R $ 左右用 G 3Q胰酶进行消化传代。当 长至 U“Q的汇合度时将细胞置于充有 3Q F和 3Q;N的密闭容器内, 缺氧状态通过无氧检测试纸 验证 R。对照组 BC4BD3D 细胞在正常状态下培养。 AG 实验分组: 分为? 组, 包括缺氧! V 组、 缺氧 ? V 组以及其各自对照组。缺氧组分别设缺氧后 复氧 “、 !、 ? V A 个时间点。对照组与缺氧组在同 一时间点以相同的细胞数接种。每个时间点缺氧组 和对照组有 A T? 个独立的样本。 ?G 2KK 检测: 取对数生长期细胞以 ! W !“A个X 孔接种于 = 孔培养板中, 当细胞长至 U“Q 的汇合 度时缺氧组细胞置于充
4、有 3Q F和 3Q ;N密闭 容器内分别缺氧 ! V 和 ? V, 在复氧 “、 !、 ? V 时 分别取 ! 个孔加 2KK 至终浓度末“G 3 ,*X ,-, ARS 孵育 ? V 后弃去上清, 加入 !“ $- 二甲基亚砜溶解 结晶, 用 1L0IFNBKL;B OY ?“ 酶标仪 (巴斯德, 法 国) 在 33“ , 波长处测吸光度 (!) 值。对照组在相 同时间进行相同处理。 3G 引物序列: 根据 I) :#Z 提供的核酸序 列, 用 Y+%,)+A 软件设计引物。所用引物均由上海 博亚生物技术有限公司合成。引物序列为: 0102 上游: 34;0K000K0;IIK;K;04A
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