结核杆菌DNA疫苗PVS84与PIL2质粒联合免疫的保护效率研究.pdf
《结核杆菌DNA疫苗PVS84与PIL2质粒联合免疫的保护效率研究.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《结核杆菌DNA疫苗PVS84与PIL2质粒联合免疫的保护效率研究.pdf(5页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、中 国 人 兽 共 患 病 学 报 % =攻击的能力进行了评估。方法 将; i l A!插入T HA f 3, 构建了人 =攻 击, !周后取脾、 肝和肺培养结核菌并计数。结果 T H X Z $bT B Q !联合免疫组的鼠血清 i n a) *海南省自然科学基金资助项目( ,:J “ ! ! 3) 通讯作者: 朱中元a !G华南热 带农 业 大 学 国 家 生 物 技 术 重 点 实 验室 8 9 : ; R 8 C ;:4 ,) = / 0 - / R )R , 7 - ( a ) SL V ST B Q !G : 0 / * ST B Q !U / * R , ( * / 0 )% C
2、 9 Q/# R ) (#K . , - T *U ) . ) - ( a ) SU ) *U R ) () / R T B Q !T 0 / * S;R , 7 - ( a / ) / ( ( ,Q 7 +) 培养基进行) !G !G # T HA f 3真核表达载体: 美国B ( = ) ) !G !G + 大肠埃希菌(E s c ; e r i c ; i ac o l i )?E 缓冲液, S 4 : *,: % ;产物回收试剂盒,? A连接试剂盒, + 7 H i n dI I I? A 6 / . W ) ., 限制内切酶H i n dB B B, , L ; oB等购自大连宝生物
3、公司) !G !G ) 9 % 8: 上海生物制品研究所产品) !G !G % % C 9 Q+#小鼠: 购自北京维通利华实验动 物公司)均为雌性, 初次免疫时Z3 “周龄)动物 饲养在无特殊病原体条件)该公司提供的% C 9 Q+ #小鼠的核心种群来源于% = ) .Q / L , . / ( K - . ( ) ( B Q 7 !) 、 鼠白细胞介素7 #( B Q 7 #) 、 鼠白细胞介素7 3 “( B Q 7 3 “) 和 鼠 干 扰 素*( - . ( )B ( B 7 *) 定量测定试剂盒: 法国? / R 0 , ( ); ) * ) / . R oB酶切位点)斜体部分为终止
4、密码子) 产物长 度约$ D “ L T) !)以扩增 a 2 C e t C e n ep o 5 1 t 1 o n =攻击 实验)免疫方法: 将T H X Z $、 T HAf 3和T B Q ! X浓缩 制剂用T E CG !的无热源“G 3 , 0+Q: 9 X稀释至3 “ “ “K+ 0, 每只小鼠取“G 3 0分$点注射入腿部 肌肉内)T H X Z $bT B Q !组采用均为3 “ “ “K+ 0的 T H X Z $和T B Q !等量质粒混匀, 每只每次注射“G 3 0)T H X Z $bT B Q !组、T H X Z $免疫组、T HAf 3注射 组、 T B Q
5、! X组、: 9 X组, 在“、 3 和J “S分别免疫或 者注射3次, 共J次)9 % 8皮 内 注 射 免 疫,3 “ % O+鼠)只在第“S免疫3次) !G #G ) 脾细胞的培养及上清收集 各组小鼠经挑 除眼球收集血清后断颈处死, 消毒, 无菌取脾称重, 去筋膜, 制成匀浆, 加不完全; :6 B3 # $ “, 纱网过 滤, 计数淋巴细胞, 用; :6 B3 # $ “完全培养基配制 成3 “ #+ 0, 接种培养板,I% !环境J C_培养C ! =感染小鼠 将结核菌E J C ; =株接 种于Q 7 +斜面培养! “S, 挑取菌落制成悬液, 与麦氏 管比浊, 配成! K+ 0(
6、相当于!3 “ C% O + 0) , 冻 存于Y! “_)取“G 3 0接种Q 7 +斜面, 共J管, 培 养! “J “S, 计数% O)用生理盐水将E J C ; =菌 配制成3 “ C% O + 0, 尾静脉注射“G 3 0( 3 “ #个结核 菌) 感染小鼠) !G #G , 感染鼠组织器官的结核菌培养及计数 见 文献 $() !G #G ( 统计学处理 免疫组与各对照组的细胞因 子和脏器结核菌落数比较采用单向方差分析)两两 之间的均数比较采用S检验)分析工具为X : X X 3 “G “系统) # 结 果 #G ! T B Q !质粒的构建结果 : % ;扩增的B Q 7 !基 因
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 结核杆菌 DNA 疫苗 PVS84 PIL2 质粒 联合 免疫 保护 效率 研究
链接地址:https://www.31doc.com/p-3724159.html