GB-7331-1987.pdf
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1、中华人民共和国国家标准 UDC 8 3 5 . 2 1 - 1 5 2 马铃薯种薯产地检疫 规程 GB 7331一 87 P l a n t q u a r a n t i n e r u l e s f o r p r o d u c i n g a r e a s o f s e e d p o t a t o 1 适用范围 本规程适用于各级原 ( 良)种场、科研院校、 集体单位和农户生产马铃薯种薯。 2 名词解释 2 . 1 产地检疫 指种薯生产过程中的全部检疫工作,即4 ,5 章规定的全部内容。 2 , 2 脱毒种薯 指通过茎尖脱毒培养方法,除去墙铃薯花叶型、卷叶型、矮化型病毒 ( 不
2、包括束顶型)的脱毒 核心材料 ( 或脱毒苗)在隔离条件下生产的脱毒原原种、脱毒原种级种薯,并经检验合格。 2 . 3 健康良 种 指按照5 . 3 所列方法进行检查和检验,未发现检疫对象, 控制病害发生率符合5 . 3 . 3 所订标准的种 薯。 3 检疫 对象及控制病害 3 . 1 检疫对象 3 . 1 . 1 当 铃薯 癌肿 病S y n c h y t r i u m e n d o b i o t i c u m ( S c h i l b ) P e r , 3 . 1 . 2 当 铃薯 环腐病C o r y n e b a c t e r i u m m i c h i g a n
3、 e n s e P v , S e p e d o n i c u m ( S p i e c h e t Ko t t h ) S k a p t e t B u r k h , 3 . 2 控制病害 3 . 2 . 1 马 铃薯 黑 胫病 E r w i n i a C a r o t o v a r a P v , a t r o s e p t i c a ( r o n e s ) 二 E r w i n i a P h y t o - p h o r a( A p p e l )H o l l a n d ) , 3 . 2 . 2 马铃薯花叶型、卷叶型、矮化型 病毒病。 4 种
4、井的生产 4 . 1 种薯地的选择 4 . 1 . 1 种薯 地应选在无 检疫对象发生的地区或轻发生地区的未发病地块。 4 . 1 . 2 留种地确定后,于 播种前一 月向所在地植检部门申 报并填写 “ 马 铃薯种薯产地检疫申 报表” ( 见表 1 ) 。 国家标准局1 9 8 7 - 0 3 - 0 1 批准1 9 8 7 一 1 0 一 0 , 实施 GB 7 3 3 1 一 . 7 表 1 马铃薯种薯产地检疫申报表 申报单位 联系人 繁殖地点 繁殖面积 品种 种薯 ( 或核心材料)来源 播种时期 隔离条件 备注 注:申报表一式三份,一份交植检部门、一份交种薯 收购主管部门,一份存浓育单位
5、 ( 或农户)备杳。 二2 脱毒种薯的生产 4 . 2 . 1 脱毒核心材料的培育见附录A ( 补充件) 。 4 . 2 . 2 脱毒原原种的繁育见附录B ( 补充件) 。 4 . 2 . 3 脱毒原种级种薯的高 倍繁 殖。 4 . 2 . 3 . 1 必须选用附有产地检疫合格证 ( 引 进的凭检疫证书,下同) 的脱毒原原种 ( 或脱毒原种) 为种薯。 4 . 2 . 3 . 2 播种一月前必须进行逐薯 块检验。 方 法见附录C ( 补充件) 。 4 . 2 . 3 . 3 检验合格的种薯用脐芽法繁育。见附录D ( 补充件) 。 4 . 3 健康良种的生产 4 . 3 . 1 以脱毒良 种(
6、三 代以下脱毒薯) 或以三 圃 提纯复壮后的优良种薯为生产健康良种的种落, 均须 附有产地检疫合格证。 4 . 3 . 2 4 . 3 . 3 4 . 3. 4 4 . 4 4 . 4 . 1 播种前将种薯 在室内 晾7 一1 0 天,以 汰除暴茸出来 的病薯。整薯 播种选用4 0 一 6 0 g 小整薯。 切块播种的地方,必须进行切刀消毒。见附录E ( 补充件) 。 亦可选用夏播 ( 或晚播)小种薯直接播种。 防疫措施 4 . 4. 2 4 . 4 . 3 4 . 4 . 3 . 4 . 4 . a。 癌肿病发生区应采用以 抗病品种为主的高厢畦植并彻底拔除隔生薯。 疫情处理:发现本规程所列病
7、害必须全部拔除病株,挖出已形成的种, 深埋或 烧毁。 药剂防护 1 用2 5 0/ a 粉锈宁可湿性粉 ( 或乳油)叶面喷雾防治马 铃薯癌肿病。 2 治蚜。田间蚜虫点片发生或有蚜株率 次,防止病毒再侵染。 4 . 4 . 3 . 3 田间发现晚疫病 4 . 4 . 4 窖藏管理 5% 时,开始药剂防治,每7 一1 0 天一次, 共23 “ 中心病株” ,开始药剂常规喷雾,保证田间检查和疫情处理准确进行。 4 . 4 . 4 . 1 人窖前严格汰除病、烂、伤、杂、劣 种薯并经常翻晾。 4 . 4 . 4 . 2 通风窖 贮存,贮量不超过窖内 空间的三 分 之一。 窖内温 度保持在1 一3 为宜,
8、 相对湿度 GB 7331一 87 7 5 。 。 j 【_1 0: 丫 , 4 . 4 . . “ 死窖”贮藏,冬季封好窖口,严防受冻或受热烂种。 5 检查和签证 5 . 1 脱毒核心材料必须同时采用指示植物及血清检验 ( 至少两种以上 血清方法) ,确认无病毒者签 发产地检疫合格证 ( 见表4 ) 。检验方法见附录F ( 补充 件)。 5 . 2 脱毒原原种和脱毒原种级种薯的检查 5 . 2 . 1 每周肉 眼检杏一次,若发现病株应及时拔除销毁。对其周围1 m 以内 的植株全部 进行血清检 测以拔除隐症病株。 5 . 2 . 2 收获前一周,脱毒原原种顺行每隔5 0 株,脱毒原种级种薯顺行
9、每隔1 0 0 株检查一株,并进行 血清检验以拔除隐症病株。 5 . 2 . 3 对无检疫对象和限制病害者发给产地检疫合格证 ( 见表4 ) 。 5 . 3 健康良种的检验 以田间检验为主,必要时进行室内复检。 5 . 3 . 1 田间检查 5 . 3 . 1 . 1 检查日 期。分别于苗高6-7 寸、盛花期和收获前各检查一次。 5 . 3 . 1 . 2 检杳株数。在观察全田的基础上, 根据不同面积随机选点,一亩以 下地块检查2 0 0 株,一 亩以L 的地块检查总株数不得少于5 0 0 株。 5 . 3 . 1 . 3 症状鉴别、田间病株和薯块症状,以肉眼观察为主。见附录H ( 参考件)
10、。 5 . 3 . 1 . 4 检查结果记人田间检查记录表 ( 见表2 ) . 表 2 马铃薯田间检查记录表 面积 地点 日 期 检 查 方 法 检 杳 数 最 发现病株情况 l 调查 马铃薯 癌肿病 马铃薯 环属病 马铃挤 黑胫病 马铃挤 病毒病 株 ( 块)%株 ( 块 )% 株 ( 块)%株 ( 块)% 薯块 检杏 人员意见 5 . 3 . 2 室内检验 5 . 3 . 2 . , 田 间不能确诊的植株 ( 或薯 块) ,采集标本作室内检验。 5 . 3 . 2 . 2 检验结果填人产地检验送检标本报告单 ( 见表 3 ) 。 方法见附录I( 补充件) 。 GB 7 3 31 一 8 7
11、 表 3 产地检验送检标本报告单 送检年月日检验年月日 标本编号检验对象检验方法检验结果检验人备注 5 . 3 . 3 凡经田间检查和室内检验未发现马铃薯癌肿病。 最后一次田间检查 ( 含前两次检查曾发现病 株已作彻底的疫情处理)未发现马铃薯 环腐病;黑胫病病株率0 . 2 %以下, 病毒病株率不超过1 0 % 者可 发给产地检疫合格证 ( 见表4 ) 。 表 4 马铃薯种薯产地检疫合格证 字第号 年度繁育品种 ( 脱毒核心材料、原原种、原种级 种薯、良种) 病毒病株率为 二 九 田万斤 ( 管)经产地检验未发现检疫对象, 黑胫病株率%, %,符合国家脱毒、 健康种薯标准,准予作种用,特发此证
12、。 5 . 4 5 . 4 . 5. 4 . 本证一式三联,第一联为存根衬第二联交制种单位 ( 或农户) ,第三联交种 r 收购部门 ( 或用户) 。 本证书半年之内有效,但只限本单 位( 户) 该批种,使用. 不得转借他人或弄虚作假, 否则以违章调运沦处。 本证不作检疫证书 使用。 其他要求 1 以当地植保 ( 植检)部门为主与种子 管理和育种单位组成三 结合产地检查小组。 2 详细填写马铃薯产地检疫档案卡片。见附录G ( 补充件) 。 CB 7 331一 87 附录A 马铃抽 脱毒核心材料的培育 ( 补充件) A. 1 器材与试剂 WS 2 - 8 4 一 5 4 手提式高压灭菌锅:2 8
13、 0 m 1 x 2 8 0 . l ,1 个。 无菌 箱:1 个; 紫外灯:1 个, 酒精灯:1 个; 长镊子 :2 个; 棒状温度计:5 只, 4 0 W日光灯:1 4 只. 培养 架: 一 组; 培养 室 : 3 0 m ; 试管:2 0 x 2 0 0 , 6 0 0 0 支; 营养钵:6 0 0 0 个。 聚 氯乙 烯 塑料 大 棚: 3 0 一 5 0 . 2 ,一 个; 7 5 % 酒精; 甲1R; 升汞; 高锰酸钾; 解剖针; 漂白粉溶液, p H试纸. M S培养基:配制见下表。 M S培养基母液配制表 I ;I 液化合物 数以 g 加蒸馏水1 0 ml 配制 i L培养 基
14、需母液肚 ml A N H , N O ,( 硝酸铁) K N O ,( 石 肖 酸钾) K日 2 P 0 ,( 碑酸 几 氢钾) M K S 0 , 7 H 2 O( 硫酸镁) C a C l , 2 H 2 O( 氮化钙) 1 6 . 5 1 9. 0 1 . 7 3 . 7 4 . 4 1 0 0 0 1 0 0 B F e S 0 ,( 硫 酸亚 铁 ) N a t 一 E D T A( 乙 飞 胺四乙酸 几 钠): 一: : t o o 5 C KI( 碘化钾) N a , M o O , . 2 H 2 0 0 1 1 酸钠)0 .0830 .025 1 0 0 1 CB 7881
15、一 8 7 续表 母液化合物 数量 8 加燕馏水量 ml 配制 1 L培养 基需母液量 ml C C O C 1 2 . 6 H 2 O( 抓化钻) C u $ O , 5 H 2 O( 硫酸铜) M n S O, 4 H 2 O( 硫酸锰) Z n S O , 7 H 2 O( 硫酸锌) H 3 B O 3( 翻酸) 0 . 0 0 2 5 0 . 0 0 2 5 2 . 2 3 0 . 8 6 0 . 6 2 1 0 01 D E F 盐酸硫胺素 ( B ) 盐酸素 ( B Z ) 甘氨酸 0 . 0 0 4 0 . 0 0 5 0 . 0 2 1 0 0 1 0 0 1 0 0 1 0
16、1 0 1 0 G H 获酸 肌 一 肌R A 蔗塘 琼脂 p H 0. 0 0 5 1 . 0 3 0 . 0 7. 0 5 . 8 : 1 0 1 0 直接加人 直接加人 注:在配制母 液A时最后加氮化钙。 A. 2 操作程序 A . 2 . 1 取刚出 土 幼苗或块茎上 的芽,切下1 一2 c m长一段,放在烧杯里,上 面盖好纱布, 用自来 水冲洗 1 h ,然后移人无菌 接种箱内,浸泡在饱和漂白粉溶液中5 一1 0 m i n ,取出后用无菌水冲洗2 一 3 次。 A . 2 . 2 将制备好的IN S培养基培养液分装于试管,每管l o m l ,试管口用包纱布棉花球塞紧,放人 硫酸纸
17、袋中 ( 每袋1 0 一2 0 支)在。 . 8 - 1 k g f / c m z 高压锅中消毒1 5 m i n ,冷却后放人无菌 接种箱待用。 A . 2 . 8 操作前操作室、工作台面、 操作工 具等用福尔马林 ( 甲 醛)熏蒸,然后用紫外线照射2 0 一 I 0 m i n , L 作人员 着清洁L 作服,手进人接种箱前用肥皂洗净并用7 0 %乙醇 擦拭消毒。 A . 2 . 4将 幼苗切 段放 在4 0 倍双 筒 解剖 显 微 镜下, 用 解剖 针去 掉 幼叶, 直 至 解出 半 光 滑的 生长 点, 用 解剖刀从0 . 1 - 0 . 3 m m 处切下, 接到试管内 培养 基上
18、 , 每个试管接三 茎尖, 接后在试管上 端外面纸 帽上 注明处理和接种f 期。 A . 2 . 5 把 接种好的试 箫从无菌箱中 移出 置于2 1 一 2 5 C 、光照3 0 0 0 一4 0 0 0 c d 条件下 培养。 CB 7331一 8 7 附录B 马铃翔脱毒原原种的该育 ( 补充件) B. 1 器材与试剂 同附录A。 B. 2 萦育材料 经检验合格的脱毒核心材料 ( 试管苗,下同)若干管。 B. 3 操作程序 B . 3 . 1 将配备好的ms 培养基培养液分装于试管中,每管l o m l ,放人高压灭菌锅灭菌处理1 5 m i n , 冷却待用。 B . 3 . 2 L 作台
19、 面和L 只 用7 0 % 乙醇 擦拭消毒;盛试 管苗 培养基的试管用1 % 升汞 表面消毒后放人 无菌接种箱。 B. 3 . 3 1 . 作人员着清洁L 作服,双手用肥皂洗净, 伸人无菌箱后用7 0 % 乙醇棉擦拭消毒,长把镊 子 和剪子每次使用前都应在酒精上 燃烧消毒。 B. 3 . 4 把试管苗木植株按节剪 断,每颗带一叶片,然后腋芽向上插于另一试管内 培养基上 ,烤于 管口,用棉球塞紧管口。 B. 3 . 5 插完的试管拿出无菌箱,用牛皮纸包好管口,放于试管架上,在温度2 1 一 2 5 C ,光照3 0 0 0 一4 0 0 0 c d 条件下培养。 B. 3 . 6 按细砂: 腐熟
20、马粪: 耕层熟土二 1 5 : 3 0 : 5 5 配制营养土,分装于 营养钵中。 B. 3 . 7 当试管内 小植株高5一l o c m时,去掉纸帽和棉球锻练1 2 天,移植到钵内, 置于大棚内 在温度2 0 C 下假植。 B . 3 . $ 假植苗株高1 0 . 1 5 c m时,放人网室定植。 B. 3 . , 加强水肥管理,发现蚜虫即用1 : 1 5 0 0 乐果常规叶面喷雾,每隔7 天喷1 次,直到无蚜虫为 止。 GB 7 3 31 一 8 7 附录C 脱毒原原种的拼块检查 ( 补充件) C. 1 设备和材料 . 1. 1 一 一; 培养室:3 0 m 左右。 培养架:一组。 木制
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