GB-15569-1995.pdf
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1、中华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农 业 植 物 调 运 检 疫 规 程 C B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 P l a n t q u a r a n t i n e r u l e s t r a n s p o r t i n g o f a g r i c u l t u r a l p l a n t , 主题内容与适用范围 本标准规定了在国内 调运农业植物种子、 苗木和其他繁殖材料及应施检疫的植物、 植物产品检疫的 程序 本标准适用于各类农业植物种子、 苗 木和其他繁殖材料及应施检疫的植物、 植物产品的调运检疫。 2 术语 2 . 1 调运检疫 指各 类植物种子
2、、 苗木和其他繁 殖材料及应施检疫的植物、 植物产品在 流通( 包括托运、 邮寄、 自 运、 携带、 销售等) 过程中, 农业专职植物检疫人员根据植物检疫法规进行的检疫检验和签证 22 应施检疫的植物及植物产品 指国家和省( 自 治区、 直辖市) 公布的应该实施检疫的植物和植物产品。 23 检疫对象 指国家公布的农业植物检疫对象和省( 自治区、 直辖市) 公布的补充检疫对象。 2A 批 指同一时间、 同一发运地点、 收货地点、 if 11 一 品名i 品种) 、 同一运输工具的全部应检物品 2 . 5 件 指同 , 包装的全部应检物品。 3 调运检疫程序 调运检疫程序见下图。 国家技术监督局1
3、 9 9 5 一 0 6 一 0 2 批准1 9 9 6 一 0 1 一 0 1 实施 G B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 4 准备工作 4 . 1 凭介绍信( 或身份证) 受理并审核农业植物调运检疫报验申 请单 附 录A ( 补充件月, 调人地提交要 审核的农业植物调运检疫要求书 附录B ( 补充件) , 复检时核查植物检疫证书。 4 . 2 向中报人查询货源安排、 运输工具、 包装材料等情况, 准备检疫工具, 确定检疫时间、 地点和方法 5 现场检查 51 现场检查内容 现场调运应检农业植物、 植物产品及其包装材料、 运载工具、 堆放场所等, 是否有检疫对象, 有无病 原物和害
4、虫各虫态及其排泄物、 分泌物、 蜕皮壳、 蛀孔等痕迹 复检时应核查调运应检农业植物及其产品 与检疫证书是否相符。 5 . 2 抽样 根据不同应检农业植物及其产品、 不同包装、 不同数量, 分别采用对角线五点取样或分9 z 设点等方 法取样。川肉眼或手持放大镜直接观查抽件样品 G B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 5 . 3 检查 对种子 过筛检查, 对苗木、 接穗、 块茎、 果实等仔细检查根部、 枝条、 茎秆、 皮层内外、 叶片、 芽眼和果 实表面、 曹洼、 果梗等部位有无害虫各虫态及蛀孔、 虫道、 虫瘦; 有无病害症状、 肿瘤、 菌廖、 杂草籽等。具 休抽查件数见表 1 表 1 现
5、场抽样件数标准表 种类 按货物总件数抽样百分率, %抽样最低数 种子类 -4 0 0 0 k g 的2 5 1 0 0 0 0 株的 3 -5 1 0 0 - 1 0 0 0 0 株的6 -1 0 1 0 0 株 果实类、 块根茎0 . 2 - 5 . 0 5 件或 1 0 0 k g 中药材、 烟草 0 . 2 - 5 . 0 5件 注: J 散装种子 1 0 0 k g 为一件, 苗木1 0 0 株为一件。 下足抽样最低数的全部检验。 其他类可参照表中比例抽查. 6 室内检验 6 门取样 6 . 1 . 1 对现场检查难以得出有无检疫对象, 需要室内检验或认为有必要保存样品的, 应结合现场
6、抽件 检查, 取样带回室内检验或保存。 6 门. 2 取样方法 根据不同应检农业植物及其产品、 不同包装、 不同数量、 不同检疫对象, 注意货物不同部位的代表 性, 采用对角线、 棋盘式或随机取样的方法提取代表样品, 取样份数和每份祥品数量见表2 和表3 0 表 2 现场取样份数 货物总量 取样份数 1 0 0 件以下1 1 0 1 -5 0 0 件2 5 0 1 3 0 0 0 件3 3 0 0 0 件以上4 表 3 每份样品数量 植物种类 每份样品数量, 9 或株 种子类 块茎、 块根、 葱头、 大蒜、 红枣等2 0 0 2 5 0 0 花生、 玉米、 大豆、 蚕豆、 菜豆等 1 0 0
7、0 - 1 5 0 0 稻谷、 麦类、 高粱、 绿豆、 棉籽等1 0 00 谷子、 小米、 芝麻、 油菜籽、 亚麻籽等5 0 0 蔬菜、 牧草籽、 花卉籽等1 00 烟籽等 1 0 - 3 0 苗木类 柑桔、 苹果、 花卉、 薯苗等1 0 - 1 0 0 果实类 柑桔、 苹果等2 0 0 02 5 0 0 注: 士 训也 类参照表中类型抽取样品。 2 7 6 C B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 6 . , . 3 提取检验样品 6 . 1 . 3 . 1 种 f - 类 现场取回的代表样品, 分别进石充分混匀后, 铺在玻璃板上, 样品厚度不超过 1 c m, 分法, 抽取室内检验所
8、需样品的数量。 6 . 1 . 3 . 2 苗木、 果实、 块根 ( 茎) 类 现场所取的样品逐一检查, 检取带有害虫及病虫为害症状者, 进行室内剖检和镜检等 6 . 2 仪器设备 农业植物调运检疫检验所用仪器设备, 见附录Q( 参考件) 。 6 . 3 室内 一 般检验方法 植物检疫人员根据应检物品情况采取一种或几种检验方法 6 . 3 . 1 种子过筛检验 将受检样品倒入相应孔径筛内, 筛孔规格见表4 0 表 4 样品种类及其筛孔孔径规格表 再用正方形四 样品种类筛层数 各层孔径规格, m m孔形 花生米、 大豆、 玉米、 蓖麻籽等 3 3 . 5 , 2 . 5 , 1 - 5圆形 水稻
9、、 麦类、 高粱、 大麻籽等 22 . 5 , 1 . 5 圆形 谷子、 油菜籽、 芝麻、 亚麻籽等 2 2 . 0 , 1 . 2圆形 必要时按下列公式计算含量。 每公斤含量一发现数量( g ) / 试样重量( g ) X L 0 0 0 6 . 3 . 2 种子比重检验 运用病种子、 虫蛀种子与健康种子间的比重差异, 用不同比重的溶液区分沉浮, 然后捞取浮种进一 步检查。 6 . 3 . 3 种子染色检验 6 . 3 . 3 . 1 高锰酸钾染色法 主要用于检验禾谷类种子。 取洁净样品1 5 g 放人金属网或塑料网中, 在3 0 C 温水中浸泡1 m i n , 移入1 g 高锰酸钾溶液中
10、 再浸 泡1 m i n取出立即用清水漂洗2 0 -3 0 m i n 至干净, 在放大镜下检查, 对粒面有。 . 5 m m左右的黑斑种 粒者挑出进一步检查。 6 . 13 . 2 碘化钾染色法 主要用于检验豆类种子。 将样品5 0 g 放入金属网 或塑料网中, 放入1 % 碘化钾溶液或2 % 碘酒中1 1 . 5 m i n , 移入。 . 5 氢 氧化钠或氢氧化钾溶液中浸泡2 0 - 3 0 s , 取出, 用清水冲洗0 . 5 m i n后, 用扩大镜或肉眼检查 对粒面有 1 -2 m m黑圆点者挑出进一步检查。 6 . 113 油浸检验法 主要用于检验豆类种子。 按1 g 豆粒用橄榄
11、油或凡士林或机械油1 -1 . 5 m L 拌匀, 浸泡0 . 5 h , 则油脂浸润的豆粒变唬拍色, 幼虫孔道呈透明斑纹。 6 . 3 . 4 直接镜检 将查获害虫各虫态, 在双筒解剖镜下鉴定种类, 挑取样品病变部分, 沾涂于玻片上, 用显微镜检查病 原物种类 63 . 5 洗涤检验 G s 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 将受检样品5 一2 5 g 倒入1 0 -5 0 m l 无菌水的三角瓶内, 振荡5 1 0 m m, 离心浓缩. 取其浓缩的沉 淀液适当稀释, 段于显微镜下检查病原物种类 必要时计算病原物接种体的负荷址, 63 . 6 解剖检查 对疑难病害或隐蔽型病虫为害的应检
12、农业植物及其产品, 用刀解剖被害处或切片, 片解剖镜或显微 镜下检查 63 . 了 分离培养检验 将受检样品消毒, 并移于相应的培养荃上培养检验 6 . 38 血清反应检验 分别采用特制的抗血清检验细菌、 病毒、 类菌原体 6 . 3 . 9 噬菌体检验 利用专化性噬菌体的浸染试验快速检验细菌 6 . 3 . 1 0 萌芽检验 常用的有保湿培养、 沙土萌芽、 土内萌芽、 试管幼苗症状观测等检验方法 6 . 4 几种主要检疫对象的检验方法 下列几种检疫对象的检验按下列方法进行, 其他检疫对象和补充检疫对象的检验, 按照国家和有关 省( 自治区、 直辖市) 的规定执行。 6 . 4 . , 水稻细
13、菌性条斑病检验方法 详见附录 D , ( 补充件) 6 . 4 . 2 小麦矮腥黑穗病检验方法 详见附录E , ( 辛 卜 充件) 6 . 4 . 3 棉花枯黄萎病检验方法仁 详见附录F , ( 补充件) 6 . 4 . 4 柑桔溃疡病检验方法 详见附录G , ( 补充件) 7 6 . 4 . 5 马铃薯癌肿病检验方法 详见附录H, ( 补充件) 6 . 4 . 6 甘薯瘟病检验方法 详见附录 J , ( 补充件) 6 . 4 . 7 小麦黑森瘦蚊鉴定方法仁 详见附录K, ( 补充件) 6 - 4 . 8 苹果绵蚜和苹果蠢蛾鉴定方法 详见附录1 , ( 补充件) 6 . 4 . 9 柑桔大实蝇
14、鉴定方法 详见附录M, ( 补充件) 6 . 4 . 1 0 美国白 蛾鉴定方法仁 详见附录N, ( 补充件门 6 . 4 . 1 1 毒麦鉴定方法 详见附录P , ( 补充件) 7 评定与签证 了 . 1 评定 根据现场或室内检验结果, 对受检农业植物及其产品进行评定 了 . 2 签证 未发现检疫对象的签发植物检疫证书并放行, 复检不签证; 发现带有或感染有检疫对象的植物或产品, 除保留样品和标本外, 签发农业植物调运检疫检验结果 通知单 详见附录C , ( 补充件) , 通知申 报单位或个人. 立即采取消毒、 改变用途、 控制使用或销毁等处 理并监督执行。 G B 1 5 5 6 9 一
15、1 9 9 5 附录A 农业植物调运检疫报验申请单 ( 补充件) 编号 : 植物及产品名称包装材料及方法备注 件数重鳍( 株数) 产地起运地点 运往地点运输工具 发货单位 人)收货单位( 人) 申 请单位( 盖章) : 联 系 人( 签字) : 电话。 邮政编码 : 年月日 附录B 农业植物调运检疫要求书 ( 补充件) ) 检字 植物检疫姑 : 兹介绍 单位)同志去 接洽调运种子( 苗木) 及其他植物、 植物产品公斤( 株) , 检疫对象为: 签发机关检疫专用章检疫员 有效期止:年月日 年月日 一一、 一一一,一一一一一 注 本表共三联, 第一联交调出 地检疫机关, 第二联寄调出省检疫机关,
16、第三联留存签发机关 G B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 附录C 农业植物调运检疫检验结果通知单 ( 补充件) () 检() 字第 货 仁 接受人 样品名称 检验 目的 检验方法和结果 代理人 接收 日期 抽样数量 检验 日期 处理意 见 签发机关检疫专用章站长 检疫员 年月日 注式二联。第一联交报检单位( 人) , 第二联留存签发检疫机关。 附录D 水稻细菌性条斑病检验方法 ( 补充件) D 1 检验样品 种子脱壳后, 取谷壳1 0 三种方法之一检测有无细菌 B , 加磷酸缓冲液P B S ( p H 7 . 0 ) 2 0 m L , 浸泡过夜, 过滤得滤液样品, 可用下列 D
17、2 噬菌体检验法 取灭菌培养皿三套, 分别加入条斑病菌悬浮液( 1 0 C f u / m L ) l m L , 并逐个加入样品滤液。 . 2 , 0 . 5 和 1 . 0 m 1 , 混匀, 每皿中加入嫡化后冷却至4 5 5 0 营养琼脂培养基 9 m L , 摇匀, 冷却后, 放在2 8 C 恒温 箱中培养1 2- 1 8 h , 观察有无圆形透明的噬菌斑出现。 结果判别: 无噬菌斑的表示为无病种子, 噬菌斑的数量与病害的严重度相关。 D 3 直接分离法 取滤液 1 0 m l - , 离心( 8 0 0 0 r / m i n ) 1 0 m i n , 沉淀, 再悬浮在1 m L
18、P B S中, 取2 0 0 p L涂抹在预先制备 好的营养琼脂平板上 重复 1 0 个培养皿。 在2 6 - 2 8 0C 恒温箱中培养3 -7 d , 观察有无圆形、 隆起及质地 均匀蜜黄色的典型菌落出现。 G B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 D 4 血清学检验法 检验技术有多 种可选择, 最常用的是酶联免疫吸附分析( E L I S A ) , 免疫荧光法( I F ) , 反向间接血凝 技术及金黄葡萄球菌共凝集反应。 酶联免疫吸附分析法常用的是双抗体夹心法, 详见柑桔溃疡病检验方法 附录G, ( 补充件) ; 反向 f9 1 接血凝法可参见附录1 ( 补充件) 金黄葡萄球菌
19、共凝集反应较为简单易行。 取浓缩样品悬浮液一滴放于载玻片上, 加人经抗体致敏的 金黄葡萄球菌一滴, 用灭菌牙签或细竹针搅拌3 0 - 5 0 s , 如出现絮状凝集, 表示阳性反应, 否则即为阴性 反应, 以灭菌水或 P B S液为阴性对照。 附录E 小麦矮腥黑穗病检验方法 ( 补充件) 将小麦样品按四分法提取两份试样, 每份5 0 g , 分别倒人三角瓶, 加入1 0 0 m L蒸馏水, 用力振荡5 - 1 0 m i n , 再将全部洗液分别倒入清洁离心管内, 以1 0 0 0 r / m i n的速度离心5 m i n , 倒出上清液。 底部的 沉淀物加入1 m L席尔氏液, 再摇动离心
20、管, 用清洁吸管吸取悬浮液于玻片上。 一个样品镜检5 个玻片。 鉴定矮腥冬抱子时, 每个样品必须测量2 5 -3 0 个抱子, 测量冬饱子网目 的大小, 网脊的高度, 胶质鞘的 厚度, 凡是7 0 %以上的抱子网目 大小在3 . 5 -5 . 0 p m, 网脊高度在 1 . 5 - 2 . 5 p m, 胶质鞘厚度在2 . 0 - 3 . 0 k m, 确定为矮腥。矮腥与普通腥黑穗病饱子的区 别见表E l o 表E l 三种小麦腥黑穗病菌的形态特征比 较 项目光腥网腥 矮腥 菌瘦麦粒状 麦粒或近圆形圆形坚实 网纹无 有有 网目 大小, da m 无z . 0 - 4 . 03 . 5- 5
21、. 0 网脊高度, t-无 0 . 7 1 . 5 - 2 . 5 胶质鞘厚度, y m 无 1 . 0以下2 . 0 - 3 . 0 附录F 棉花枯黄萎病检验方法 ( 补充件) F 1 消毒 将棉籽放入7 0 %酒精中浸泡2 - 3 s , 除去气泡, 置于0 . 1 %升汞液中消毒2 m i n , 用灭菌水冲洗2 - 3 次; 将棉籽放在2 0 漂白粉溶液中浸3 -5 m i n , 流水冲洗, 将应检种子置于三角瓶中( 5 0 0 m L三角瓶 可 放种子5 0. 1 0 。 粒) , 瓶口 罩上铁网或纱布。 取橡皮管一段, 一端接在自 来水龙头上, 一端接一玻璃管, 插入_ 几 角瓶
22、内, 打开龙头, 冲洗 2 4 h . G s 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 F 2 分离 将消毒过的种子移放在分离黄萎菌的琼脂培养基和分离枯萎菌的P D A平板上, 每皿放5 - 1 0 粒, 7 1, 于2 2 - 2 5 C 的温箱培养3 4 d , 然后放入冰箱冷冻处理( 0 -5 C, 2 4 h ) , 再放回原温箱培养1 0 d 左 右, 用低倍镜看大胞子形态检查棉籽枯萎病菌; 黄萎病看小型分生胞子轮生情况及微菌核, 并用高倍镜 作进一步鉴定, 记载两种病菌带菌率。 分离种子数量应在 1 0 0 0 粒以上。 重要检验还应将分离到的病菌 纯化, 回接在棉花幼苗根部, 观
23、察其是否发病再作结论。 附录G 柑桔溃疡病检验方法 ( 补充件) G , 肉眼检查 G 1 . 1 枝条症状: 病斑近圆形, 灰褐色, 表面粗糙、 突起、 无黄色晕环, 几个病斑常连成不规则的斑块。 干 燥情况下, 溃疡病斑海绵状、 木栓化, 隆起、 表面破裂; 潮湿时溃疡迅速扩大, 表面完整, 边缘油状 抗性品 种在病健交界处形成愈伤组织层, 通过用刀切去外部软木塞状物质而留下粗糙表面, 可以确认为溃疡 病。在暗绿色健康组织里可见明亮至暗褐色病斑, 变色区大小、 形状、 深浅均有变化。 G 1 . 2 叶片症状: 病斑初时针头大、 黄色、 油渍状、 扩大后叶的正反面都隆起、 破裂, 呈海绵状
24、, 灰白色, 后来病部木栓化, 表面粗糙, 呈灰褐色火山口 状开裂。 病斑多近圆形, 周围有黄色晕圈, 老叶上病斑的黄 色晕圈有时不明显。 G 1 . 3 果实症状: 病斑与叶片上的相似, 但火山口 状开裂更显著, 木栓化程度更高, 坚硬粗糙, 一般没有 黄色晕圈, 病部只限于果皮上, 不发展到果肉。 果实生育前期发生的病斑多隆起, 中、 后期发生的则较扁 平 。 G2 G2 . 1 在G l 检查无法确认的情况下, 由植物检疫人员视情况采取以下一种或几种方法检验。 分离 取小块病组织用无菌水冲洗后放入0 . 5 -2 . 0 m L无菌水中, 用灭菌玻棒研碎, 在室温下侵泡 1 5 - 2
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