GB-7628-1987.pdf
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1、中华人民共和国国家标准 UDC 臼3 . 1 , 5 4 3 . 9 谷物维生素B I 测定方法 Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f v i t a m i n B, I n c e r e a l s GB 7 8 2 .一 8 7 , 适用范围 本标准 适用于测定谷物中 维生素B l 的含最。 2 测定原理 维生素B , ( 即硫胺 素C , Z H , , O N , S C 1 H C I ) 在碱性条 件下被铁佩化钾 氧化成荧光色 素 硫 色 素, 硫 色 素 在 正丁醉 中 的荧 光 强 度与 样品中 维 生素B
2、, 的含 量 成正 比, 依此进行维生素B . 的 定量 侧定。 8 仪器、设备 常用试验室仪器,特别 是: 8 . 1 容量瓶:1 0 0 m L , 2 5 m L. 3 . 2 吸附分离柱 ( 见图1 ) , 8 . 8 反应瓶 ( 见图2 ) , 组呈 图 1图 2 8 . 4 注射器,2 0 m l , , 3 . 5 电热恒温水浴. 3 . 6 电热恒温箱, 匀 . 了 荧光分光光度计。 中华人民共和国农牧渔业部1 9 8 7 - 0 3 - 0 4 批准 1 8 8 7一1 1 - 0 1 实施 GB 7 8 2 .一 . 7 4 试剂 全部试剂除有说明外,均为分析纯。 所用的水
3、应是蒸馏水。 4 . 1 盐酸 ( GB 6 2 2 -7 7 ) 4 . 2 硫酸 ( GB 6 2 5 一7 7 ) 0 . 1 m o l / L溶液,将8 . 5 m L盐酸用水稀释至1 o 0 0 m L . 0 . 0 5 m o l / L 溶液。将2 . 8 m L 浓硫酸加人水中,稀释至1 0 0 0 m L , 4 . 3 乙酸钠,2 . 5 m o l / L水溶液。 2 0 5 g 无水乙酸钠 ( G B 6 9 4 -8 1 )或 3 4 5 g结 晶乙酸钠 ( G B 6 9 3 -7 7 ) 溶于水,稀释至l 0 0 o m L, 4 . 4 淀粉酶 ( 可选用T
4、 a k a d i a s t a s e ,或接近其活性的其他磷酸醋酶) , 6 o g / L 悬浮液: 用2 . 5 m o l / L 乙酸钠溶液 ( 4 . 3 )悬浮6 g 淀粉酶制剂,稀释至l o o m L 4 . 5 抓化钾 ( G B 6 4 6 -7 7 ),2 5 0 g / L水溶液。 4 . 6 酸性抓化钾溶液: 将8 . 5 m l , 浓盐酸加人2 5 0 g / L 撅化钾溶液 ( 4 . 5 )中,并稀释至1 0 0 0 m L。 4 . 7 氢氧化钠 ( G B 6 2 9 一8 1 ) .1 5 o g / L 水溶液。 4 . 8 铁佩化钾 ( G
5、B 6 4 4 -7 7 ),l o g / L水溶液。 4 . 9 碱性铁氛化钾溶液:l o g / L 铁佩化钾溶液 ( 4 . 8 )与1 5 0 g / L氢氧化钠溶液 ( 4 . 7 ) 按 1 : 1 4 容 积比配制。现用现配。 4 . 1 0 冰乙酸 ( G B 6 7 6 一7 8 ),3 0 m L/ L水溶液。 4 . ” 人造沸石 ( Q / H G 1 2 -4 4 5 -6 3 , 6 0 一 8 0 目):使用前必需活化,方法如下: 将适量人造沸石置于大烧杯中,加人十倍其容积的 3%热乙酸溶液 ( 4 . 1 0 ) ,用玻棒均匀搅动 t o m i n , 使沸
6、石在乙酸溶液中悬浮,待沸石沉降后,弃去上层乙酸液。重复上述操作一次。换用五倍 其容积 的热抓化钾 溶液( 4 . 5 )搅 动清洗两 次, 每次1 5 m in 。再用热乙 酸溶液( 4 . 1 0 )洗1 0 m i n 。 最后 用热燕馏 水清沸浮石至无抓离子 ( 用l o g / L 硝酸银水溶液检验)。用布氏漏斗抽姆,烘干, 贮于磨口 瓶中 备用。 使用前,检查沸石对硫胺 素标准溶液的回收率,如达不到9 2 % ,需重新活化沸石。 4往 硫胺素标准溶液 4 . 1 2 . 1 硫胺 素贮备液I :盐酸硫胺 素 ( Q / H G 2 2 -1 5 2 7 -7 4 ) , 于五氧化二磷
7、干 燥器中干02 4 h , 称取0 . 0 5 0 o g , 溶解于2 5 % ( V / V )乙醇 水 溶液中并定容至5 o o m L , 盛于棕 色瓶中 低温保存。 该溶液每奄升含 0 . 1 m g 硫胺 素。 4 . 1 2 . 2 硫胺 素 贮备 液II : 取硫胺 素贮 备液I ( 4 . 1 2 . 1 ) i o m L 用2 5 % 乙醉 液 定容至l o o m L,盛于 棕色瓶中低温保存。 该溶液每 毫升中含1 0 W g 硫胺 素。 4 . 任二 硫胺素标准工作液: 取贮备液II ( 4 . 1 2 . 2 ) 酸钠溶液( C3 ) 混合,用水定容至l 0 0
8、m L。 现用现配。 该溶液每毫升中 含0 . 2 W B 硫胺 素。 4 . 1 5 硫酸奎宁 ( Q / H G 2 2 -7 9 7 一6 8 ) 4 . 1 3 . 1 硫酸奎宁贮备液:称取硫酸奎宁。 . 1 0 0 0 g , 贮于棕色瓶中 低温保存。若溶液混浊则需重新配制。 该溶液每毫升中含0 . 1 m g 硫酸奎宁。 2 m L,与7 5 m L 盐酸溶液 ( 4 . 1 )和5 m L乙 用0 . 0 5 m o l / L 硫酸( 4 . 2 ) 溶解并定容至1 0 0 0 m L 4 . 1 3 . 2 硫酸奎宁工作液:取贮备液 ( 4 . 1 3 . 1 ) 3 m L
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