GBT 12389-1990.pdf
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1、GB 123891990 中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准 食物中胡萝卜素的测定方法食物中胡萝卜素的测定方法 Method for determination of carotene in foods Method for determination of carotene in foods GB/T 123891990GB/T 123891990 1 主题内容与适用范围 本标准规定了食物中胡萝卜素的测定方法纸层析法。 本标准适用于植物性食物和含有植物性食物的混合食物中胡萝卜素的测 定,其最小检出限为 0.11 1 主题内容与适用范围 本标准规定了食物中胡萝卜素的测定方法纸层析法。
2、 本标准适用于植物性食物和含有植物性食物的混合食物中胡萝卜素的测 定,其最小检出限为 0.11g。 2 原理 以丙酮和石油醚提取食物中的胡萝卜素及其他植物色素,以石油醚为展开 剂进行纸层析,胡萝卜素极性最小,移动速度最快,从而与其他色素分离,剪 下含胡萝卜素的区带,洗脱后于 450nm 波长下定量测定。 3 试剂 31 石油醚(沸程 3060) :同时是展开剂。 32 丙酮:分析纯。 33 丙酮-石油醚混合液:3:7(V/V) 。 34 无水硫酸钠:分析纯。 35 5%硫酸钠溶液。 36 1:1 氢氧化钾溶液:取 50g 氢氧化钾溶于 50mL 水。 37 无水乙醇:需经脱醛处理。 3 8 -
3、胡萝卜素标准溶液: 取 5mg g。 2 原理 以丙酮和石油醚提取食物中的胡萝卜素及其他植物色素,以石油醚为展开 剂进行纸层析,胡萝卜素极性最小,移动速度最快,从而与其他色素分离,剪 下含胡萝卜素的区带,洗脱后于 450nm 波长下定量测定。 3 试剂 31 石油醚(沸程 3060) :同时是展开剂。 32 丙酮:分析纯。 33 丙酮-石油醚混合液:3:7(V/V) 。 34 无水硫酸钠:分析纯。 35 5%硫酸钠溶液。 36 1:1 氢氧化钾溶液:取 50g 氢氧化钾溶于 50mL 水。 37 无水乙醇:需经脱醛处理。 3 8 -胡萝卜素标准溶液: 取 5mg-胡萝卜素标准品, 溶于 10m
4、L 三氯甲烷中, 浓度约为 500g/mL,准确测其浓度。 取标准溶液 10.0 -胡萝卜素标准品, 溶于 10mL 三氯甲烷中, 浓度约为 500g/mL,准确测其浓度。 取标准溶液 10.0L,加正己烷 3.90mL,混匀,测吸光值,比色杯厚度 1cm, 以正己烷为空白,人射光波长 450nm,平行测定三份,取均值。 计算公式: L,加正己烷 3.90mL,混匀,测吸光值,比色杯厚度 1cm, 以正己烷为空白,人射光波长 450nm,平行测定三份,取均值。 计算公式: 01. 0 01. 3 1000 1 1 = E A X(1) (1) 式中:X 式中:X1胡萝卜素标准溶液浓度:mg/m
5、L; A吸光值; E-胡萝卜素在正己烷溶液中,人射光波长 450nm,比色杯厚度为 1cm,溶液浓度为 1ppm 的吸光系数,为 0.263 8; 1胡萝卜素标准溶液浓度:mg/mL; A吸光值; E-胡萝卜素在正己烷溶液中,人射光波长 450nm,比色杯厚度为 1cm,溶液浓度为 1ppm 的吸光系数,为 0.263 8; 1000 1 将 ppm 换算成 mg/mL; 将 ppm 换算成 mg/mL; 01. 0 01. 3 测定过程中稀释倍数的换算。 测定过程中稀释倍数的换算。 39 -胡萝卜素标准使用液:将已标定的标准液用石油醚准确稀释后,每毫 升溶液相当 50 39 -胡萝卜素标准使
6、用液:将已标定的标准液用石油醚准确稀释后,每毫 升溶液相当 50g,避光保存于冰箱中。 4 仪器和设备 41 实验室常用设备。 42 玻璃层析缸。 g,避光保存于冰箱中。 4 仪器和设备 41 实验室常用设备。 42 玻璃层析缸。 中华人民共和国卫生部 19900319 批准 19901201 实施 GB 123891990 43 分光光度计。 43 分光光度计。 44 旋转蒸发器:具 150mL 球形瓶。 44 旋转蒸发器:具 150mL 球形瓶。 45 恒温水浴锅。 45 恒温水浴锅。 46 皂化回 装置。 46 皂化回 装置。 47 点样 或微量注射器。 47 点样 或微量注射器。 48
7、 新华滤纸:定性,快速或中速,101 号。 48 新华滤纸:定性,快速或中速,101 号。 5 样品的采集和处理 5 样品的采集和处理 51 粮食:样品用水洗三次,置 60烤箱中烤干,磨粉,储于塑料瓶内,放 一小包棒脑精,盖紧瓶塞保存,备用。 51 粮食:样品用水洗三次,置 60烤箱中烤干,磨粉,储于塑料瓶内,放 一小包棒脑精,盖紧瓶塞保存,备用。 52 蔬菜与其他植物性食物:取可食部用水冲洗三次后,用纱布吸去水滴, 切碎。用匀浆器制成匀浆,贮于塑料瓶内,冰箱内保存备用。 52 蔬菜与其他植物性食物:取可食部用水冲洗三次后,用纱布吸去水滴, 切碎。用匀浆器制成匀浆,贮于塑料瓶内,冰箱内保存备用
8、。 6 测定步骤(以下步骤需在避光条件下进行) 6 测定步骤(以下步骤需在避光条件下进行) 61 样品提取 61 样品提取 611 取适量样品,相当于原样 15g(含胡萝卜素约 2080g)的匀浆, 粮食样品视其胡萝卜素含量测定,量 100mL 带塞锥形瓶中,加入丙酮 20mL,石 油醚 5mL,振摇 1min,静置 5min,将提取液转入盛有 100mL5%硫酸钠溶液的分 液漏斗中,再于锥形瓶中加入 10mL 丙酮-石油醚混合液,振摇 1min,静置 5min, 将提取液并入分液漏斗中,如此提取 23 次,直至提取液无色为止。 611 取适量样品,相当于原样 15g(含胡萝卜素约 2080g
9、)的匀浆, 粮食样品视其胡萝卜素含量测定,量 100mL 带塞锥形瓶中,加入丙酮 20mL,石 油醚 5mL,振摇 1min,静置 5min,将提取液转入盛有 100mL5%硫酸钠溶液的分 液漏斗中,再于锥形瓶中加入 10mL 丙酮-石油醚混合液,振摇 1min,静置 5min, 将提取液并入分液漏斗中,如此提取 23 次,直至提取液无色为止。 612 植物油和高脂肪样品,需先皂化,取适量样品(10g,加脱醛乙 醇 30mL,再加 10mL1:1 氢氧化钾溶液,回流加热 30min,然后用冰水使之迅速 冷却,皂化后样品用石油醚提取,直至提取液无色为止。 612 植物油和高脂肪样品,需先皂化,取
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