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1、职业技术学院毕业论文(设计)毕 业 论 文(设计)题 目 上城区餐饮餐饮用水的调查研究 指导老师 专业班级 生物技术及应用0701 姓 名 学 号 2010年5月30日II摘 要本研究旨在了解餐饮业饮用水水质状况,为上城区改水防病工作提供依据。通过上城区疾控中心开展餐饮业水质普查的机会进行抽样,检验分散式供水水质的菌落总数、总大肠杆菌群、pH、浑浊度、耗氧量等指标,结果表明:样品大肠菌群和pH都在标准范围内,细菌总数有一份出现超标现象;耗氧量总数有一份出现超标,浑浊度总数有一份超标,应采取集中式供水,改善饮用水质量。关键词:餐饮业;饮用水;菌落总数;总大肠杆菌群;pH目 录引言.11实验材料与
2、方法.1.1.1实验材料11.1.1实验样品.11.1.2实验仪器和器材.11.1.3培养基及试剂.21.2实验方法21.2.1细菌的检测21.2.2大肠菌群的检测31.2.3pH值的测定31.2.4浑浊度的测定31.2.5肉眼可见物的检测31.2.6耗氧量的测定32结果与分析.42.1各指标的结果42.2总体实验结果63.结论.7参考文献8I引言我国人们物质生活和精神生活不断提高,消费水平也逐步提高,餐饮业与人们的生活联系越来越密切1,2。特别是小型餐饮业发展迅速,但普遍存在水质质量不合格,布局不合理3,从业人员素质低等问题,已成为食品安全的隐患4。为了解决餐饮业饮用水水质卫生现状,为水防病
3、工作进一步发展提供依据,上城区与每月都开展了上城区餐饮业水质调查5,6。1 实验材料与方法1.1 实验材料1.1.1 实验样品(水样分别采自六个场所)(1)杭州里约大酒店(9月份)(2)浙江杭州凯悦大酒店(9月份)(3)杭州金茂商务酒店(9月份)(4)柳莺宾馆(9月份)(5)汉庭快捷(9月份)(6)99元我的客栈(9月份)1.1.2 实验仪器与器材生化恒温培养箱(型号SPX-250B-Z,上海博迅实业有限公司医疗设备厂)、高压灭菌锅(型号SHINVA,山东新华医疗器械股份有限公司)、电子天平(0g200g,精确至0.01g,型号BL-310,美国双杰兄弟有限公司)、超净层流室(型号HFsafe
4、1200,上海力申科学仪器有限公司)、自动菌落分析器(型号ShiNESO,杭州迅数科技有限公司)、其它: 放大镜、带橡皮塞试管、 培养皿(9cm)、 移液管(1ml、10ml)、酸度离子测定仪(型号pH211A,北京哈纳科仪科技有限公司)、散射光浊度仪(型号TSZ-400A,厦门飞华环保器材有限公司)、COD检测仪器(型号GDYS-101SQ2天津盛鑫泰科技有限公司)1.1.3 培养基及试剂1.1.3.1 培养基 普通营养琼脂培养基(杭州天和微生物试剂有限公司)、乳糖胆盐培养基:(杭州天和微生物试剂有限公司)、伊红美蓝琼脂培养基(杭州天和微生物试剂有限公司)、革兰氏染色液(杭州天和微生物试剂有
5、限公司)1.1.3.2 试剂苯二甲酸氢钾标准缓冲试剂(上海爱建实验有限公司),此溶液pH值在20时为4.00。混合磷酸盐标准缓冲试剂(上海爱建实验有限公司),此溶液pH值在20时为6.86。四硼酸钠标准缓冲试剂(上海爱建实验有限公司),此溶液pH值在20时为9.22。福尔马肼标准混悬液(400NTU)(国家标准物质研究中心)福尔马肼标准混悬液(40NTU):使用时将上述标液稀释10倍 1:3硫酸溶液:一份浓硫酸加入到3份纯水中 0.01000mol/L草酸钠溶液 0.01000mol/L高锰酸钾溶液 1.2 实验方法按生活饮用水标准检验办法GB5750-85检验水质,和生活饮用水卫生标准GB5
6、749-85进行卫生学评价。检测项目有饮用水pH、浑浊度、肉眼可见物、耗氧量、细菌、大肠菌群共6项指标。1.2.1 细菌的检测取无菌吸管吸取1mL水样于灭菌平皿内再取1mL水样于另一平皿内(作平行接种)再作110稀释分别取1mL加到两个无菌平皿中注入溶化并冷却至45左右的营养琼脂立即混匀另取两只不加样的平板作空白对照待琼脂凝固后,倒置平板于361的恒温培养箱内培养48h取出计数。1.2.2 大肠菌群的检测在2个装有50mL三倍浓缩乳糖胆盐培养液的试管中各加入水样100mL在10支装有5mL三倍浓缩乳糖胆盐培养液的试管中各加入水样10mL于361培养24h观察每管是否产气(若产气变色,作证实实验
7、,接种EMB平皿,做复发酵及革兰氏染色镜检。)1.2.3 pH值测定打开酸度离子测定仪预热30min左右稳定后,标定离子测定仪(一般饮用水的pH都高于7.0,所以用混合磷酸盐标准缓冲溶液和四硼酸钠标准缓冲溶液调节即可。)将水样倒入烧杯插入电极和温度测定针基本稳定后开始读数并记录数据。1.2.4 浑浊度的测定打开散射光浊度仪预热20min左右用40NTU福尔马肼标准混悬液标定仪器将样品倒入样瓶至刻度线(拿瓶的上端,或用擦镜布等包住,以免影响测量结果)拧紧瓶盖擦净样瓶(用不落毛软布擦净样瓶上的水迹和指纹)将样瓶放入样池(样瓶的箭头对准样池上的尖角凸起标志)然后盖上浊度仪盖子待浊度仪读数稳定后读数,
8、并读数两次,记录数据。1.2. 5肉眼可见物的检测 将水样直接摇匀,直接观察,记录1.2.6 耗氧量的测定取100ml充分混匀的水样,置于250ml具三角烧瓶中,加入5ml(1:3)的硫酸溶液,用滴定管加入10.00ml0.01000mol/L高锰酸钾溶液,将具塞三角瓶放入沸腾的水浴锅内,准确加热30分钟。取下三角烧瓶待水样冷却至70-80,滴加10.00ml0.01000mol/L草酸钠溶液,然后摇匀,再于白色背景上,自滴管加入0.01000mol/L高锰酸钾溶液,至溶液呈微红色且30秒内不褪色即可,记录用量V1(mL)。向滴定至终点的水样中,趁热(55-80)加入10.00ml0.0100
9、0mol/L草酸钠溶液,立即用0.01000mol/L高锰酸钾溶液滴定呈红色,记录用量V2(ml),如高锰酸钾溶液浓度为准确的0.01000mol/L,滴定时用量应为10.00ml。否则可求一校系数:K=10/V2 计算公式:耗氧量(mg/L)=(10+V1)K-10*0.08*1000/102 结果与分析2.1 各指标的结果2.1.1 细菌与大肠菌群的测定结果将接有细菌的培养基培养48h后,从培养箱中取出,用全自动菌落分析仪分析,记下各平板的菌落数后,求出同一稀释度各平板生长的平均菌落。从实验结果可以得出:空白对照培养基上均无细菌生长。其中3号饮用水没有稀释的培养基中细菌不可计数,稀释10倍
10、后读数如表2.1。当乳糖胆盐发酵管培养24h后,从培养箱中取出,观察各管中颜色的变化及产气情况,如不产气则报告为大肠菌群阴性;若变色有气体产生则为推测性实验阳性,则做证实试验,结果每个水样中都未检出大肠菌群,细菌总数有一份出现超标,记录结果如表2.1。表2.1 六个餐饮场所饮用水中细菌及大肠杆菌数样品编号细菌(cuf/ml)大肠菌群(MPN/L)细菌报告值(cuf/ml)大肠菌群报告值(MPN/L)10000132010013352850400516034264216002403510001365872006532.1.2 pH值的测定结果温度对测定pH值有两种重要的影响,即电极本身的电位随着
11、温度而改变,水样的电离作用也随温度而变化,故一般报告结果时应注明测定水样的温度。测量两次,取平均值,pH检测结果如表2.2。各地所取样品的pH在标准范围内。表2.2 六个餐饮场所饮用水温度及pH值样品编号溶液温度pH测定值pH报告值115.77.277.287.3215.67.267.267.3315.87.317.317.3416.87.357.357.4516.57.277.277.3615.97.137.137.12.1.3 浑浊度的测定结果1) 在测量浑浊度时,显示的数字也会有一些不稳定,这是由于水样波动,水样中气泡过多或悬浮的杂质引起的,当显示的数字变化幅度不是很大,即当小数点后第2
12、位读数不再变化,第3位变化范围很小时,可以读数,并读两次,取平均值。表2.3 六个餐饮场所饮用水浑浊度样品编号123456浑浊度(NTU)0.260.221.10.220.170.22各地所取样品浑浊度总数有一份超标,其余均合格。2.1.4 肉眼可见物的测定结果表2.4 六个餐饮场所饮用水的肉眼可见物样品编号123456肉眼可见物无无无无无无各地所取样品都无肉眼可见物,均合格。2.1.5耗氧量的测定结果表2.5 六个餐饮场所饮用水的耗氧量样品编号124563耗氧量(mg/L)3.12.92.82.82.93.0各地所取样品耗氧量如表2.5,样品总数有一份超标,其余均合格。2.2 总体实验结果依
13、据生活饮用水卫生标准GB5749-85进行评价,细菌总数1000cfu/ml。大肠菌群18MPN/L。pH的在6.88.5之间。肉眼可见物不得含有。耗氧量3mg/L,浊度1NTU。检验结果依据生活饮用水卫生标准GB5749-85进行评价:在被检测的水样中,耗氧量高于标准值均判为不合格样本。将上述细菌、大肠菌群、pH、浑浊度、肉眼可见物、耗氧量的实验结果综合起来,得出结果如表2 .6。表2.6 六个餐饮场所饮用水样的总体检测结果样品编号细菌总数cuf/ml大肠菌群MPN/LpH浑浊度NTU肉眼可见物耗氧量mg/L 113 7.3 0.26无3.1 213 7.3 0.22无2.9 351603
14、7.3 1.1无2.8 42403 7.4 0.22无2.8 513 7.30.17无2.9 6653 7.10.22无3.0从上述测定结果中可以看出有两份样品不合格。1号样品中的耗氧量高出标准指标。3号样品中有两项指标超出标准范围,其中细菌明显高出标准范围,严重超标;浑浊度为1.1超出标准范围; 2、4、5、6号都在标准范围内,符合标准要求,即为合格样品。3 结论本实验严格按生活饮用水测定方法-2001和生活饮用水水质卫生规范卫生部(2001)进行,检出六份水样中有两份不合格。在实验过程中,细菌总数和大肠菌群严格按照国标方法进行实验,没有给水样带来污染,细菌总数有一份出现超标现象;耗氧量总数
15、有一份出现超标,浑浊度总数有一份超标。 分析不合格原因有以下几方面:(1)某些小型餐饮业对饮用水的卫生管理远远不如大型餐饮业对饮用水的管理,饮用水未能定期消毒和定期更换水质。(2)夏季天气炎热大量微生物在适宜水温中生长繁殖较快。(3)未按时间按要求对饮用水进行卫生处理以及水温普遍偏高加速氯的消耗分解,也是影响其效果的一大原因。水质微生物指标的超标对饮用者的身体健康存在着一定的危害,特别是大肠菌群的存在,提示可能有肠道致病菌存在,可能会造成一些介水传染病传播,如易引起肠道传染病、中耳炎、皮肤病等疾病。参考文献1 徐陆妹.生活饮用水中耗氧量检测不确定度的评定.中国卫生检验杂志, 2008, 11(8): 12-142 张松.临淋县餐饮业饮用水水质状况调查与分析.中国城乡企业卫生, 2007, 6(31): 9-113张广伟.在生活饮用水卫生标准中新增军团菌项目的探讨.中国公共卫生管理,2008, 24(4): 27-29 4曼彻施特.串联质谱分析河水中内分泌干扰物.沃特世公司, 2008, 12(7): 1-45刘向阳.上海市宝山区现制现售纯净水卫生状况.职业与健康, 2008, 1(24): 21-256周晓燕.绍兴市饮用水源汤浦水库水质特征研究.绍兴市水务集团技术质量中心,2007, 9: 297
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