生物科学毕业论文梨花粉水孔蛋白初探.doc
《生物科学毕业论文梨花粉水孔蛋白初探.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《生物科学毕业论文梨花粉水孔蛋白初探.doc(7页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、1 所在院系: 专 业: 姓 名: 学 号: 指导教师: 本科生毕业论文本科生毕业论文(设计设计) 题目:梨花粉水孔蛋白初探 生物科学与化学学院 生物科学 范洪刚 0810910005 徐 国 华 论文完成日期: 2012 年 5 月 2 目目 录录 摘要 .3 关键词 .3 英文摘要 .3 英文关键词 .3 一、实验材料与试剂配制方法 .3 (一)实验材料 .3 (二)主要试剂及配制方法 .4-5 二、实验步骤及方法 .5 三、实验中遇到的问题及解决办法 .5 (一)PEG4000 药品用量问题5 (二)每一份花粉培养皿中培养液体积的问题 .5 (三)关于花粉发后离心所需要的转速问题 .5
2、(四)关于荧光显微镜的使用方法 .5 (五)关于染色剂选择的问题 .5-6 (六)关于培养温度和渗透压问题 6 (七) 关于花粉涂抹的问题6 (八)关于封片的一些问题 .6 (九)关于花粉的选择问题 6 四、 实验结果分析与讨论 6 五、 参考文献 6-7 致谢 .7 3 梨花粉水孔蛋白初探梨花粉水孔蛋白初探 范洪刚 pb0810910005 江苏教育学院生物系 摘要:摘要:梨花粉在不同渗透压下萌发率和花粉管长度会发生变化,在半抑制条件的渗透压下,水孔蛋白的 抑制剂和激活剂处理花粉培养基,会影响花粉萌发率及花粉管长度。在半抑制条件下,在培养基中加入 适当浓度的抑制剂会降低萌发率,花粉管长度变短
3、,适当浓度的激活剂会提高花粉萌发率及增加花粉管 长度,说明水孔蛋白的活性在一定程度上影响花粉的萌发率和花粉管长度的伸长。本文通过荧光显微镜 观察花粉萌发实验,发现其中一些问题,并举出一些解决办法。 关键词:关键词:水孔蛋白; 梨;花粉萌发率;花粉管长度;荧光标记 Abstract: the pear flower powder in different osmotic pressure and pollen tube length under germination ratio can produce change, in half of the conditions of the inhib
4、ition osmotic pressure, the hole of the inhibitors and activate protein processing agent pollen culture medium, can affect pollen germination rate and pollen tube length. In the half inhibit conditions, with appropriate in culture of the concentration of the inhibitors reduce germination rate, polle
5、n tube length are short and the appropriate concentration activation agent can improve the pollen germination rate and increase the pollen tube length, the protein that hole activity in the impact on pollen germination rate and elongation of pollen tube length. This article through the fluorescence
6、microscope Observe pollen germination experiment, find some of these issues, and given a some solutions. Keywords: water holes protein; Pear; Pollen germination rate; Pollen tube length; Fluorescent marker 很早以前,人们认为水分是以自由扩散的方式进出细胞的,后来注意到动植物的一些器官、 组织具有独特的水分运转能力,例如: 动物的红细胞和肾上皮细胞,它们运输水分的速度远 非只凭扩散运输所能解释
7、的,人的肾脏细胞平均每昼夜要过滤180L的水,植物在种子萌发及 花粉管伸长时要伴随着由体积增大而发生的水分快速吸收,这些现象均使人们猜测是否有介 导水分运输的孔道存在。20世纪90年代初,Wayne 等指出在植物的质膜上存在着水分运输通 道。1992年Preston等第一次分离出具有水分运输特性的蛋白CHIP28( channel- formingprotein of 28 ku) ,它是红细胞质膜内在蛋白,在质膜上形成水分选择性运输通道, 1997年被基因组命名委员会重命名为AQP1。AQP1 的发现,掀起了人们分离、鉴定水孔蛋白( 亦称水通道蛋白) 的高潮。短短几年内,人们已在细菌、酵母、
8、动物、植物中分离出许多水 孔蛋白同源基因。在植物中第一个水孔蛋白TIP是由Maure 等于1993 年从拟南芥中分离出来 的。TIP的cRNA 在爪蟾卵母细胞( Xenopus oocytes) 中的异源表达,证明它具有水分运输特 性,属于植物水孔蛋白中的液胞膜内在蛋白(Tonoplas-t membrane intrinsic protein,TIP)。 植物质膜内在蛋白( Plasma membrane intrinsic protein, PIP)也是在拟南芥中首次发现 的,Kammerloher 等( 1994)用拟南芥根质膜内在总蛋白产生的多克隆抗血清来免疫筛选( immunoscr
9、eening) 拟南芥根cDNA文库, 得到了几个阳性克隆, 经鉴定为植物质膜水孔蛋白。 水孔蛋白与1984 年Gorin 等从牛晶体纤维( bovine lens fiber)细胞膜中分离到的MIP 基因(Major intrinsic protein)具有很高的序列同源性和结构相似性, 因此将它们同归于 MIP 家族,分子质量在26 29 ku 之间, 在生物膜中形成水通道并携助水分跨膜运输的膜内 在蛋白。绝大多数水孔蛋白形成水的选择性通道, 但也有一些水孔蛋白同时也可运输小分子 中性亲水溶质。 一、实验材料与试剂配制方法一、实验材料与试剂配制方法 (一)实验材料 本实验用梨品种丰水和翠冠
10、花粉为试材,采自江苏省农业科学研究院梨园。成 熟的花药采下包裹于称量纸中置密闭的硅胶瓶中常温干燥 1 d 后置- 20 冰箱中保存备用。 4 (二)主要试剂及配制方法 1.花粉培养 花粉培养基:(母液一:浓缩十倍) MES(g) 蔗糖(g)硼酸(g)硝酸钙(g)水(ml) 2.9350.000.050.1550.00 激活剂 -巯基乙醇:(取六支试管分别标记 100%、10%、1%、0.1%、0.01%、o.oo1%对应加入 母液 -巯基乙醇逐级稀释加入) 抑制剂氯化汞:(配置 10mmol/L、1mmol/L、0.1mmol/L、0.01mmol/L、0.001mmol/L) PEG4000
11、+PEG6000 配置 11 份。 (母液二) PEG4000(g)PEG6000(g) 水(ml) 5.000.187518 花粉培养编号培养皿 111 1234567891011 母液 一 2.5ml + +母液 二 + +- 巯基 乙醇 100%2 .5ml 加水 定容 至 25ml 母液 一 2.5ml + +母液 二 + +- 巯基 乙醇 10%2. 5ml 加水 定容 至 25ml 母液 一 2.5ml + +母液 二 + +- 巯基 乙醇 1%2.5 ml 加 水定 容至 25ml 母液 一 2.5ml + +母液 二 + +- 巯基 乙醇 0.1%2 .5ml 加水 定容 至
12、25ml 母液 一 2.5ml + +母液 二 + +- 巯基 乙醇 0.01% 2.5ml 加水 定容 至 25ml 母液 一 2.5ml + +母液 二 + +- 巯基 乙醇 0.001 %2.5m l 加 水定 容至 25ml 母液 一 2.5ml + +母液 二+ +氯 化汞 10mmo l/L2. 5ml 加水 定容 至 25ml 母液 一 2.5ml + +母液 二+ +氯 化汞 1mmol /L2.5 ml 加 水定 容至 25ml 母液 一 2.5ml + +母液 二+ +氯 化汞 0.1mm ol/L2 .5ml 加水 定容 至 25ml 母液 一 2.5ml + +氯化 汞
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 生物科学 毕业论文 梨花 水孔 蛋白 初探
链接地址:https://www.31doc.com/p-3955657.html