生物发酵法生产透明质酸可行性报告.pdf
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1、5000 公斤/年生物法透明质酸-东营市源聚生物制品有限公司 5000 公斤/年生物发酵法生产透明质酸项目 可行性研究报告可行性研究报告 2008 年 9 月 PDF 文件使用 “pdfFactory Pro“ 试用版本创建 1 一、总 论 1项目概述 该项目属于生物化工领域,旨在将保湿性能好、生物相容性强的 生物功能材料透明质酸实现产业化。该技术利用蔗糖和蛋白胨为原 料,采用代谢调控的发酵新工艺和膜分离等高新技术生产透明质酸, 发酵水平达到 4.56.0g/L,产率提高 20%以上,技术达到国际先进 水平。 2项目的社会经济意义及必要性 近年来,天然生物制品的添加使用是化妆品生产的重大进展
2、之 一。透明质酸(HA)优异的保湿性受到国际化妆品界的广泛关注,成 为日本、欧美等国家高档化妆品的必备保湿剂,被誉为理想的天然保 湿因子,又称为“仿生化妆品” 。由于保湿性强、生物相容性好,透 明质酸还是一种重要的医药用原料,用于眼球晶移植手术、眼角膜修 复、关节炎治疗等,同时透明质酸还是一种抗癌药物,可有效刺激免 疫系统,防止癌细胞扩散的作用。该项目的实施,对改善人类生态环 境、提高人类健康水平、调整产业产品结构、促进行业发展和科技进 步具有重要意义。 该项目符合国家产业、技术政策,有较高的创新水平和较强的市场竞 争力,有较好的经济效益和社会效益,应尽快实现产业化,来满足国 内急需和国际市场
3、。同时优良的高科技项目转化为生产力,也是顺应 国家推动高新技术产业化的政策,能创造良好的社会经济效益,具有 PDF 文件使用 “pdfFactory Pro“ 试用版本创建 2 深刻的社会意义。 因此应加快生物发酵法生产透明质酸的产业化进程, 使产品系列 化和规模化,有利于下游产品的研制和开发。本项目利用蔗糖和无机 盐为原料,采用先进的代谢调控技术生产技术含量高、附加值高的产 品, 有较高的技术创新水平和较强的市场竞争力, 而且符合国家产业、 技术政策。 该项目的实施,为企业的多元化发展提供了新的思路, 将为我国生物产业开创新的应用领域。 二技术可行性和成熟性分析 1项目的技术创新论述 (1
4、)本项目的基本原理及关键技术内容: 以蔗糖和无机盐为原料,采用生物发酵法,利用代谢调控、膜过 滤等高新分离技术将透明质酸和蛋白质成份进行分离纯化, 得到高纯 度的产品。 以射线,快中子和磁场法复合诱变,得到透明质酸高产菌株。 优化发酵工艺参数,发酵过程实现在线调节。 建立高效絮凝、双膜分离和先进制粉相结合的提取工艺。 斜面菌种 培养 摇瓶菌种 移种 种子罐培养 移种 发酵罐发酵液 沉淀 透明质酸粗品 溶解 溶解液 膜过滤 滤液 精过滤 沉淀 无水乙醇脱水 溶解制粉 干燥无菌包装 贮存。 (2)项目创新点 1)提出采用选育和透明质酸缺陷型菌种新方法,目标明确方法 PDF 文件使用 “pdfFac
5、tory Pro“ 试用版本创建 3 简单可行, 成功率高, 避免了盲目性, 大力的提高了透明质酸的方法。 2)采用磁场复合快中子及射线诱变,提高了诱变成功率,降 低了回复突变的可能性。 3)采用高效絮凝剂,使细菌易于沉降。为后续膜分离奠定基础。 4)在原中试技术的基础上,进行技术创新,拟在透明质酸的发 酵后期,先后加入一种新的添加剂和寡糖诱导剂,刺激微生物多糖的 分泌,使菌体荚膜增厚,同时改变了细胞通透性,使细胞内产生的透 明质酸易于分散进入发酵液,加快了胞内透明质酸的生物合成,提高 发酵生产水平 5.58.0g/L,使产率提高 20%以上。 5)拟采用微滤工艺,分离纯化透明质酸,在超滤前
6、除去蛋白质,分 离蛋白质,提高了超滤的分离效率,更有效地除去重金属离子,提高 了产品收率纯度。采用超滤等高新分离技术,得到不同分子量段的透 明质酸,以满足不同的用途。 6)拟采用代谢调控的办法,阻断了被透明质酸酶降解的途径,使透 明质酸分子量增大,产量大大提高。 (3)项目国内外发展现状、存在的主要问题及国内外同类产品 比较 项目国内外发展现状:透明质酸(简称 HA) ,是由-D-N-乙酰 氨葡萄糖和-D-葡萄糖醛酸为结构单元的以-1,4-糖苷链连成的 一种链状高分子酸性粘多糖, 由美国 Meyer 等人首先从牛眼玻璃体中 分离出该物质。 它是一种性能优良的生化物质, 对人体皮肤刺激性小, 安
7、全无毒,广泛应用于医药、日化、食品等领域,具有独特的保湿性 PDF 文件使用 “pdfFactory Pro“ 试用版本创建 4 能,是目前国内外生物化工界热点产品之一。 目前常用的生产制备技术有两种: 一是利用天然原料即从动物组 织中提取,主要原料是人的脐带、鸡冠和牛眼玻璃体等。用丙酮或乙 醇将原料脱脂、脱水、风干后,用蒸馏水浸泡、过滤,然后以氯化钠 水溶液和氯仿溶液处理,之后加入胰蛋白酶保温得到混合液,最后用 离子交换剂进行处理、纯化得到精制的透明质酸。该法提取率极低, 仅为 1%左右。二是生物发酵法。以葡萄糖作为碳源,以酵母萃取物 和蛋白胨作为氮源。在培养基中发 28 小时,发酵结束后
8、,过滤除去 菌丝体和杂质,然后用醇沉淀发法等操作即得到高纯度的产物。 存在的主要问题:采用发酵法制造的透明质酸,关键在于菌种的 选择,目前多选用链球菌属类菌种等。我国利用动物组织提取生产透 明质酸,由于原料资源有限,因而制备成本较高,无法形成产业化。 生物发酵法具有产品不受原料资源限制,生产成本低等特点,但发酵 水平有待于提高,与国外先进水平仍有较大差距,后提取技术也有待 于改进,成为近年来主要的研究开发方向。 透明质酸的技术性能与国内外先进水平的比较 该项目与国内外同类研究、同类技术的综合比较 国内提取法 国内发酵法 国际发酵法 本项目 透明质酸发酵水平(g/I) 3.0-4.2 4.0-6
9、.5 4.5-6.5 透明质酸分子量 1.1106 蛋白质含量(%) 8-12 5 1.0 1 葡萄糖醛酸(%) 17-25 30-34 35-40 44 重金属离子(pb.ppm) 40 40 40 10 PDF 文件使用 “pdfFactory Pro“ 试用版本创建 5 砷(ppm) 10 10 10 10 国际先进水平以日本 Chisso 公司产品为标准由表可知,本项目在发酵水平已达到国际领先水平, 重金属离子的含量也较低,蛋白质含量接近国际水平,总体水平达到国际先进水平。 三项目产品市场调查与竞争能力预测 1项目产品的主要用途、需求量、未来市场状况 透明质酸在人体皮肤中的生理机构有
10、水化、润滑、溶质的输送、 细胞的移动、异化作用的进行。有优良的保湿性能、生物相溶性好, 被广泛应用于高中档化妆中和医药方面。同时还是一种抗癌药物,可 有效刺激免疫系统,阻止癌细胞扩散等作用。目前国内化妆品行业的 市场潜在需求量约 20 吨左右。发酵法是近几年发展起来的方法,还 未完全形成产业化。随着其在化妆品和医药等方面用途的不断拓展, 透明质酸作为一种新的生物功能新材料, 已成为当前国内外极具发展 潜力的化学品,将具有广阔的市场前景。 技术质量指标透明质酸质量指标 项 目 指 标 透明质酸分子量(Da) 1.1106 蛋白质含量(%) 0.1 葡萄糖醛酸(%) 44 重金属离子(pb ppm
11、) 1 PH(1%的水溶液) 6075 干燥失重 10 细菌个数 10 砷(ppm) 2 2本项目产品国内生产状况 本项目产品国内的生产方法有提取法和发酵法。 国内几家利用鸡 冠为原料提取透明质酸的厂家,由于原料有限、技术工艺的局限性, PDF 文件使用 “pdfFactory Pro“ 试用版本创建 6 产品质量很低,产量很小,纯度很低,基本处于停产状态。发酵法生 产厂家共有山东福瑞达公司、东营东辰集团,前两者均采用原山东省 商业研究所的技术,该所目前已解体,后者采用北京化工大学技术。 山东福瑞达的生产能力为 1000 公斤,开工率为 100%,主要为内部使 用;东营东辰集团生产能力 30
12、00 公斤,开工率 100%。发酵水平和产 率低,生产成本较高。 3.本项目产品国内外市场情况 透明质酸优异的保湿功能就受到了国际化妆品界的广泛关注, 富 含透明质酸的化妆品可以从真皮中汲取大量水分。同时,由于表皮脂 层质屏障作用,可以防止水分蒸发与散失,达到维持皮肤水环境的恒 定作用。无论在低温度还是在高温度条件下,它都具有相同的高吸湿 性。 因此, 它被当作一种理想的天然保湿因子, 广泛应用于化妆品中, 制成适合不同肤质、气候、环境下使用的产品。透明质酸还能改善皮 肤生理条件,为真皮胶原蛋白和弹性纤维的合成提供优越的外部环 境,加强营养物质是供给,起到护肤养颜的效果。研究表明,透明质 酸可
13、以阻止细胞中一些酶的生产,减少自由基的形成,在防止自由基 破坏细胞结构、产生脂质过氧化和引起机体衰老等方面起着重要作 用;低分子量透明质酸具有抗炎、抑制病菌产生、保持皮肤光洁的作 用;为细胞增殖与分化提供合适的场所,直接促进细胞生长、分化、 重建与修复等。因此,它被作为高档膏霜、乳液、化妆水、美容液、 口红、粉底等化妆品必备的添加剂,以达到增湿保湿、嫩肤抗衰老和 抗皱消炎等功效。目前,含有这种成分的化妆品被公认为“仿生化妆 PDF 文件使用 “pdfFactory Pro“ 试用版本创建 7 品”备受推崇。添加透明质酸的化妆品成为国际日化界的主流产品。 目前,国内取得生产许可证的化妆品生产企
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