2020高考生物浙江专用大二轮复习课件:专题八 生物技术实践 第17讲 .pptx
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1、,第17讲 微生物的利用与酶的应用,专题八 生物技术实践,1.大肠杆菌的培养和分离。 2.分离以尿素为氮源的微生物。 3.果汁中的果胶和果胶酶。 4.-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。,考纲要求,内容索引,梳理核心要点,排查易混易错,热点考向探究,01,梳理核心要点 SHU LI HE XIN YAO DIAN,1.培养基与微生物培养,LB液体,LB固体,提醒 (1)LB固体培养基添加琼脂等凝固剂,用于单菌落的分离。 (2)全营养LB培养基与尿素固体培养基:全营养LB培养基(含琼脂糖)是基础培养基;尿素固体培养基:选择培养基(如以尿素作为唯一氮源的尿素培养基)和鉴别培养基(如尿素培养基中加
2、入酚红)。 (3)加入尿素前的固体培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌,尿素溶液用G6玻璃砂漏斗过滤。,2.灭菌与消毒的比较,70%酒精,121,15,高压蒸汽灭菌,纸,1 mol/L盐,酸,尿素,3.微生物分离的两种常用方法的比较,连续,少,末端,逐渐减少,梯度稀释,固体,单个,玻璃刮刀,灼烧,提醒 划线分离操作的注意事项 (1)每次划线之前及最后一次划线之后都需要灼烧接种环。 (2)灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (4)划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。,4.大肠杆菌的培养与分离操作 (1)原理 接种在 培养基中使其
3、快速分裂增殖。 将待检测微生物样品通过划线分离法或涂布分离法接种在 培养基上,样品中的每一个细胞都可以生长繁殖形成 。,LB液体,LB固体,单个菌落,(2)流程,液体,固体,37 ,斜面,5.分离以尿素为氮源的微生物 (1)实验原理 筛选以尿素为氮源的微生物,使用以 为唯一氮源的选择培养基进行培养。 有些细菌合成的 能通过降解尿素作为其生长的氮源。 细菌合成脲酶能将尿素分解成 ,使培养基的碱性增强,pH升高,从而使加入酚红指示剂的培养基 。,尿素,脲酶,氨,变红,(2)操作步骤,尿素,菌落形态,数目,全营养,涂布分离法,提醒 分离以尿素为氮源的微生物中的易错点 (1)误以为分离以尿素为氮源的微
4、生物时,配制的培养基中加入酚红作为酸碱指示剂,加入琼脂作为凝固剂。应加入琼脂糖作为凝固剂。 (2)误以为降解尿素的反应中反应物只有尿素。降解尿素的反应中反应物除了尿素外还有水。 (3)误以为尿素灭菌采用高压蒸汽灭菌法。尿素遇高温会分解,所以其灭菌方法为G6玻璃砂漏斗过滤除菌。,6.探究酶活性最适条件和用量的实验设计 (1)探究影响果胶酶活性因素实验的分析 实验原则:遵循单一变量原则、对照原则,严格控制变量,尽量减少 的影响。 实验原理:果胶酶活性受温度、pH或酶抑制剂的影响,在最适温度或pH时,其活性最高,果肉的出汁率、果汁的澄清度都与果胶酶的 呈正相关。,无关变量,活性大小,(2)三个实验的
5、变量分析,温度,相同,果胶酶的用量,最适,提醒 关于果胶的两点说明 (1)果胶的作用:粘合细胞。 (2)果胶的鉴别方法:果胶不溶于乙醇,滴加95%的乙醇出现沉淀。,7.固定化酶的制作原理、方法及作用 (1)固定化酶的制作原理、方法,吸附,包埋,重复利用,(2)-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测,未吸附的酶,底物,02,排查易混易错 PAI CHA YI HUN YI CUO,1.微生物利用的正误判断 (1)从有机废水中分离能分解有机物的微生物时,接种后的培养皿需要放在光照培养箱中培养( ) 提示 异养微生物不需要光照。 (2)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害( )
6、 (3)每一次划线后都要将接种环灼烧( ) (4)除第一次划线外,每一次划线的起点都是第一次划线的末端( ) 提示 除第一次划线外,每一次划线的起点都是上一次划线的末端。 (5)筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中,尿素是唯一的氮源( ),(6)可分解尿素的细菌在分解尿素时,可以将尿素转化为氨,使得培养基的酸碱度降低( ) 提示 氨使培养基的酸碱度升高。 (7)划线分离操作简便,但涂布分离更容易得到单菌落( ) (8)高压蒸汽灭菌法是进行各种无菌操作都需要进行的灭菌方法( ) (9)利用LB液体培养基和LB固体培养基分别对微生物进行分离培养和扩大培养( ) (10)进入无菌室,首先打开超净台上
7、的紫外灯和过滤风,然后在酒精灯的火焰旁制备固体平面培养基( ),2.酶应用的正误判断 (1)将果胶酶用于果汁生产,既能提高果肉的出汁率又能提高果汁的澄清度( ) (2)酶的活性受温度、pH和酶用量等因素的影响( ) 提示 酶用量不影响酶的活性。 (3)果胶起着将植物细胞粘合在一起的作用,它溶于乙醇( ) 提示 果胶不溶于乙醇。 (4)用固定化-淀粉酶进行淀粉水解实验时不需考虑温度( ) 提示 温度影响酶的活性。 (5)固定化-淀粉酶可永久使用( ) 提示 固定化酶能够重复使用,但不是永久使用。,(6)-淀粉酶固定化实验结束后,将固定化柱放在常温下即可( ) 提示 固定化柱应低温保存。 (7)固
8、定化酶是通过物理或化学的方法将非水溶性的酶固定在某种介质上,使之成为可重复使用的酶制剂( ) (8)鉴别果胶最简便的方法是加入95%的乙醇( ) (9)果胶酶常存在于动物细胞,用于消化纤维素等营养成分( ) (10)制备固定化酶柱时,用10倍体积蒸馏水洗涤的目的是洗去未吸附的-淀粉酶 ( ),03,热点考向探究 RE DIAN KAO XIANG TAN JIU,考向一 考查微生物的利用 1.(2019浙江名校协作体高三联考)请结合以下酵母菌在人类生产生活中的实际应用,回答下列问题: (1)为了筛选出符合要求的酵母菌,科研人员在培养基中添加了青霉素,其目的是_;为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌
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