2020届高考生物大二轮复习 专题十六 基因工程和细胞工程复习指导练案.doc
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1、专题十六 基因工程和细胞工程1(2017年天津市和平区生物一模)已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如图1所示。请回答下列问题:(1)过程代表的是_逆转录_,过程构建A基因重组载体时,启动子和终止子是重新构建的,它们应该能被受体细胞的_RNA聚合酶_所识别,以便于其催化转录过程。(2)如图2为A基因的结构示意图,已知区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G和C的总数共有400个,则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNA中A和U总数是_400_个。(3)在给小鼠皮下注射A蛋白时,要重复注射几次的目的是通
2、过二次免疫,增加小鼠体内的_浆细胞_数目。(4)在将X进行扩大培养前,至少需要经过2次筛选,第一次是将_杂交瘤细胞_筛选出来,第二次是将_能分泌所需抗体的杂交瘤细胞_筛选出来。(5)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的_A蛋白_来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较,或用图中的_抗A蛋白的单克隆抗体_与分离出的病毒进行特异性检测。解析(1)由以上分析可知是逆转录。启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点,能启动转录过程。(2)已知图中区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,则空白区域中碱基总数为1200个,又已
3、知空白区域中G和C的总数为400个,则AT总数为800个,每条链中AT总数为400个,根据碱基互补配对原则,由该区转录形成的成熟mRNA中A和U总数也是400个。(3)在给小鼠皮下注射A蛋白时,要重复注射几次的目的是通过二次免疫,增加小鼠体内的浆细胞数目。(4)在将X进行扩大培养前,至少需要经过2次筛选,第一次是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,第二次是采用抗体阳性检测法筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。(5)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的A蛋白所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒,与已知病毒进行核酸序列比较;或采用抗原抗体杂交法,即用
4、图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测。2(河北省衡水中学2017届高三下学期一模)转基因抗病香蕉的培育过程如图1所示,图2表示Pst、Sma、EcoR和Apa四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题:(1)质粒的化学本质是_DNA_。(2)利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒,即_基因表达载体的构建_;将目的基因导入受体细胞的方式是_农杆菌转化法_。(3)将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来,使用的限制酶是_Pst和EcoR_,一个质粒被限制酶Pst、Sma、EcoR同时切割后得到的DNA片段和粘性末端分别为_3、3c_个。单独用Apa切割质粒后的片段是
5、_和_。(4)转基因抗病香蕉的培育发生了_基因重组_(变异类型)。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,根据这一原理可利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断,重组质粒中应含有_卡那霉素抗性_基因作为标记基因。解析(1)质粒是一种小型的环状DNA分子。(2)基因工程的操作分四个步骤,其中构建目的基因的表达载体是核心步骤。图中将B的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法。(3)从图1中的目的基因的三种限制酶的切割位点可以看出,不能使用Sma,否则会破坏目的基因的结构,只有利用另外两种限制酶才能将目的基因切割下来。用三种限制酶切割环状DNA,能得到3个DNA片段和3个黏性末端。根
6、据图2中的Apa识别的碱基序列及切割位点可知,该酶切割质粒后得到的黏性末端是和。(4)基因工程的原理是基因重组,利用含卡那霉素的培养基能筛选出抗卡那霉素的细胞,由此可以推断重组质粒中的标记基因是卡那霉素抗性基因。3(2017年福建省泉州市生物一模)利用基因工程技术培育转基因抗冻番茄。该过程需要用多种限制酶,如图依次表示EcoR、Sma、Nae三种限制酶的识别序列及切割位点。请回答:(1)上述限制酶在特定位点切割DNA,其实质是断开DNA分子每条链中特定部位的两个核苷酸之间的_磷酸二酯键_切割后产生了_黏性末端和平_末端。(2)利用EcoR和Nae酶切得某种鱼的抗冻蛋白基因,可与被EcoR和Sa
7、m酶切后的质粒连接成重组质粒,原因是_相同的黏性末端之间可连接,且不同的平末端之间也可以连接_。(3)重组质料导入番茄后,欲检测抗冻蛋白基因是否转录出mRNA,需利用_标记的含有目的基因的DNA片段(或“标记的抗冻蛋白基因”或“标记的含有目的基因的DNA单链”)_作探针。(4)利用抗冻蛋白制备出相应的_抗体_,然后进行抗原抗体杂交,观察到杂交带出现,尚不足以确定转基因抗冻番茄培育是否成功。因此,还应将转基因番茄_置于寒冷环境培养(或进行个体水平检测或进行抗冻实验)_,以确定其耐寒能力是否提高。解析(1)限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间
8、的磷酸二酯键断开,产生黏性末端和平末端。(2)EcoR酶切出黏性末端,Sma和Nae酶切出平末端,利用EcoR和Nae酶切得某种鱼的抗冻蛋白基因,可与被EcoR和Sam酶切后的质粒连接成重组质粒,原因是相同的黏性末端之间可连接,且不同的平末端之间也可以连接。(3)欲检测目的基因是否转录出mRNA,需利用标记的含有目的基因的DNA片段作探针,进行核酸分子杂交,若出现杂交带,说明目的基因转录出了mRNA。(4)利用抗冻蛋白制备出相应的抗体,然后进行抗原抗体杂交,观察到杂交带出现,尚不足以确定转基因抗冻番茄培育是否成功。因此,还应进行个体生物学水平的鉴定,将转基因番茄置于寒冷环境培养,以确定其耐寒能
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