河北省邢台市第二中学人教版高中生物选修一学案专题5课题1DNA的粗提取与鉴定.pdf
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1、专题 5 DNA和蛋白质技术课题 1 DNA的粗提取与鉴定 【学习目标】 1.尝试对植物或动物组织中的DNA 进行粗提取 2.说出 DNA 的物理化学性质 3.能说出 DNA 粗提取以及DNA 鉴定的原理 【重点难点】 DNA 的粗提取和鉴定方法 【预习案】 任务一 . 提取 DNA的方法 提取生物大分子的基本思路是。 对于 DNA 的粗提取而言,就是要利用DNA 与、和等 在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 1.DNA 的溶解性DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不同, 利 用这一特点,选择适当的盐浓度就能使充分溶解,而使杂质沉淀,或者相 反,以达到分离目的。
2、此外, DNA 不溶于溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原 理,可以将DNA 与蛋白质进一步的分离。 2.DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解,但是对没有 影响。大多数蛋白质不能忍受6080 oC的高温,而 DNA 在以上才会变性。洗涤剂 能够瓦解,但对 DNA 没有影响。 3.DNA 的鉴定在条件下, DNA 遇会被染成色,因 此二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂。 任务二提取 DNA的实验设计 1. 实 验 材 料 的 选 取凡 是 含 有的 生 物 材 料 都 可 以 考 虑 , 但 是 选 用 的生物组织,成功的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的实验材料:
3、鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、 菠菜、在液体培养基的大肠杆菌 【思考】哺乳动物的红细胞的特点? 2.破碎细胞,获取含DNA 的滤液动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡 血细胞液中加入一定量的,同时用搅拌, 过滤后收集滤液即可。如果实验材料 是植物细胞,需要先用溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA 时,在切碎的洋葱中 加入一定的和,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。 3.去除滤液中的杂质阅读课本的三个方案, 4.DNA 的析出与鉴定将处理后的溶液过滤, 加入与滤液体积、 冷却的, 静置,溶液中会出现,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒搅 拌
4、,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。 取两支 20ml 的试管,各加入物质的量浓度为的 NaCl 溶液 5ml,将丝状物放 入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml 的 。混合均匀后,将试管置于中加热5min,待试管冷却后,比较两支 试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA 的溶液是否变。 任务三操作提示 以血液为实验材料时,每100ml 血液中需要加入3g ,防止。 加入洗涤剂后,动作要、,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步 骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要,以免,导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀。 二苯胺试剂要,否则会影响鉴定的效果。 【探究
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