2018年高中生物课本最全必修实验归纳与整理.pdf
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1、第 1 页 共 20 页 实验一:观察 DNA 、RNA 在细胞中的分布 一实验目的:初步掌握观察DNA和 RNA在细胞中分布的方法 二实验原理 1甲基绿 +DNA 绿色 两种试剂不是单独使用,应混合使用 吡罗红 +RNA 红色 2 8%盐酸:改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的 DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。 0.9%NaCl溶液:保持口腔上皮细胞正常形态 蒸馏水:配制染色剂,冲冼载玻片 三方法步骤 操作步骤注意问题解释 取口腔上皮 细胞制片 载玻片要洁净,滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液(生理盐水) 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁 上轻刮几
2、下取细胞 将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观察效果 保持细胞原有形态 消毒为防止感染,漱口避免取材失败 杀死并固定装片;烘干时应来回移 动,防止受热不均破裂 水解 将烘干的载玻片放入质量分数为8% 的盐酸( HCl)溶液中,用30 0C水浴 保温 5min 改变细胞膜的通透性,加速染色剂 进入细胞 促进染色体的DNA 与蛋白质分离而 被染色,细胞为死细胞 冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S 洗去残留在外的盐酸 缓水流:防止细胞被冲走 染色 用吸水线除去多余的水分 滴 2 滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上 染色 5min 吸取染色剂除去多余的染色剂并盖上盖玻片 观察 先低倍镜观察:选择染色
3、均匀、色泽 浅的区域,移至视野 中央,调节清晰 后才换用高倍物镜观察: 使观察效果最佳 现象 细胞核大部分被染成绿色 细胞质大部分被染成红色 细胞核也有小部分被染成红色 细胞质也有小部分被染成绿色 结论 DNA主要集中分布于细胞核中 RNA主要集中分布于细胞质中 在细胞质中也有DNA分布 在细胞核中也有RNA分布 几种液体 的作用 第 2 页 共 20 页 实验二:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应 。 1还原糖 (如葡萄糖、果糖、麦芽糖)+ 斐林试剂砖红色沉
4、淀 。 甲液: 0.1g/ml NaOH 溶液 乙液: 0.05g/ml CuSO 4 溶液 实质: 是还原糖(全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖)与新制的Cu ( OH ) 2反应生成砖红 色氧化亚铜(Cu 2O)。 2脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色(或被苏丹染液染成红色)。 3蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。( 蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性 NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu 2+作用,产生紫色反应。 ) A液: 0.1g/ml NaOH 溶液 B液: 0.01g/ml CuSO 4 溶液 实质: 在碱性条件下,肽键结构与铜离子反生络合反应,生成紫色络合物。 4. 淀粉遇碘变蓝色。
5、 三实验材料 1做 还原糖鉴定 实验:应选 含糖高,颜色为白色或近白色的植物组织,如苹果、梨。(因 为组织的颜色较浅,最好无色,防止颜色干扰且易于观察。) 2做 脂肪的鉴定 实验:应选富含脂肪的 种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡34 小时(也可用蓖麻种子)。 3做 蛋白质的鉴定实验:可用 富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等。 四、实验试剂 斐林试剂、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂、体积分数为50% 的酒精溶液,碘液、蒸 馏水。 五、方法步骤 (一)可还原糖的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释 1. 制备组织样液。 (去皮、切块、研磨、过滤) 苹 果或梨组织液必须临时制 备。 要取 组织的颜色
6、较浅,最好无 色,易于观察。 因苹果多酚氧化酶含量高, 组织液很易被氧化成褐色, 将产生的颜色掩盖。 2. 取 1 支试管,向试管内注 入 2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的 斐林试剂,振荡(此时呈 现斐林试剂的颜色:浅蓝 色)。 应将组成斐林试剂的甲液、乙 液分别配制、储存,使用前才 将甲、乙液等量混匀成斐林试 剂; 切勿将甲液、乙液分别加入苹 斐林试剂很不稳定,易分 解。 甲、乙液分别加入时可能无 4. 试管放在盛有50-65 0C 温 水的大烧杯中,加热约2 分 钟 ,观察到溶液颜色:浅蓝 色 棕色砖红色(沉 淀) 最好用试管夹夹住试管上部, 使试管底部不触及烧杯底部, 试
7、管口不朝向实验者。 也 可用酒精灯对试管直接加 热。 防止试管内的溶液冲出试 管,造成烫伤; 缩短实验时间。 留适当样液与反应后溶液做对照,结论:组织样液中含有还原糖 水浴加热 斐林试剂使用时:甲乙液等量混匀后立即使用 双 缩 脲 试使用时: 先加 A 液后加 B 液 第 3 页 共 20 页 (二)脂肪的鉴定 显微镜观察法 操 作 方 法注 意 问 题解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子 叶薄片, 将薄片放在载玻片的水滴 中,用吸水纸吸去装片中的水。 干种子要浸泡34 小 时,新花生的浸泡时 间可缩短。 因为浸泡时间短,不易切片, 浸泡时间过长,组织较软,切 下的薄片不易成形。切片要尽 可
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