determination of amino acids in panax notoginseng by microwave hydrolysis and derivatization coupled with capillary zone electrophoresis detection.pdf
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1、C h e m R e s C h i n U n i v 2 0 1 3 ,2 9 ( 3 ) ,4 3 4 4 3 8 d o i :1 0 1 0 0 7 s 4 0 2 4 2 0 1 3 - 2 3 2 5 2 D e t e r m i n a t i o no fA m i n oA c i d si nP a n a x n o t o g i n s e n gb yM i c r o w a v e H y d r o l y s i sa n d D e r i v a t i z a t i o nC o u p l e dw i t h C a p i l l a r
2、 yZ o n eE l e c t r o p h o r e s i sD e t e c t i o n L IX i a o t i a n ,Z H A OY a - ji n g ,J I A N GC h e n g f e i ,Z H A N GH a n q ia n dY UA i m i n C o l l e g eo f C h e m i s t r y , J i l i nU n i v e r s i t y , C h a n g c h u n1 3 0 0 1 2 ,PR C h i n a A b s t r a c tT h em i c r o
3、w a v eh y d r o l y s i sa n dd e r i v a t i z a t i o nc o u p l e dw i t hc a p i l l a r ye l e c t r o p h o r e s i sd e t e c t i o nw e r e d e v e l o p e df o rt h es e p a r a t i o na n dd e t e r m i n a t i o no ft h ea m i n oa c i d si nP a n a xn o t o g i n s e n g T h ee x p e r
4、i m e n t a lc o n d i - t i o n sf o rt h em i c r o w a v eh y d r o l y s i sa n dd e r i v a t i z a t i o nw e r ee x a m i n e da n do p t i m i z e d S e v e r a lp a r a m e t e r so fc a p i l l a r y e l e c t r o p h o r e s i s ,s u c ha sp Hv a l u eo fb a c k g r o u n de l e c t r o l
5、 y t e ,b o r a t ec o n c e n t r a t i o na n da p p l i e dv o l t a g ew e r eo p t i m i z e d U n d e rt h es e l e c t e dc o n d i t i o n s 1 1a m i n oa c i d sw e r ec o m p l e t e l ys e p a r a t e d T h er e a ls a m p l ew a sa n a l y z e da n dt h e r e s u l t sw e r es a t i s f
6、a c t o r y C o m p a r e dw i t ht h a to fc o n v e n t i o n a lh e a th y d r o l y s i sa n dd e r i v a t i z a t i o n ,t h ea n a l y t i c a lt i m e o ft h i sm e t h o dw a ss i g n i f i c a n t l ys h o r t e n e d K e y w o r d s M i c r o w a v eh y d r o l y s i s ;D e r i v a t i z
7、a t i o n ;A m i n oa c i d ;C a p i l l a r ye l e c t r o p h o r e s i s ;P a n a xn o t o g i n s e n g ; 2 4 D i n i t r o f l u o r o b e n e n e 1I n t r o d u c t i o n P a n a xn o t o g i n s e n g ( B u r k ) F H C h e m ( P n o t o g i n s e n g ) i s ak i n do fc o m m o nm e d i c i n
8、eh e r ba n dh a sp r o m i n e n tc u r a t i v e e f f e c to nb o t hi n t e r a la n de x t e r a lb l e e d i n 9 0 1 - “S o m ep h a r m a - c o l o g i c a le f f e c t so f t h ec o n s t i t u e n t si nPn o t o g i n s e n g , s u c ha s a m i n oa c i d s s a p o n i n sa n dn o t o g i n
9、 s e n o s i d e s 【l 珥1w e r ei n v e s t i - g a t e d T h e r ea r eo n l yaf e wa m i n oa c i d sw h i c ha b s o r bu l r a v i o - l e tr a d i a t i o ni naw a v e l e n g t hr a n g eo f2 0 5 2 8 0n m M o s t a m i n oa c i d sa r en o td i r e c t l yd e t e c t e db ym o l e c u l a ra b
10、s o r p t i o n s p e c t r o m e t r y S ot h ed e r i v a t i z a t i o no ft h ea m i n oa c i d si s i m - p o r t a n ta n di n d i s p e n s a b l e C a p i l l a r ye l e c t r o p h o r e s i s ( C E ) i sa p o w e r f u lt e c h n i q u ef o rt h es e p a r a t i o na n dd e t e r m i n a t
11、 i o no fa w i d ev a r i e t yo fa n a l y t e s t “C o m p a r e dw i t ho t h e rs e p a r a t i o n t e c h n i q u e s 。C Eh a sm a n ya d v a n t a g e s ,s u c ha s l o wc o s t ,l o w c o n s u m p t i o no fs a m p l ea n ds h o r ts e p a r a t i o nt i m e t 6 - - l U J C a p r i l a r yz
12、 o n ee l e c t r o p h o r e s i s ( C Z E li sap o w e r f u lt o o lf o rt h es e p a - r a t i o na n dq u a n t i f i c a t i o no fi n o r g a n i ci o n s ,P g ,t h es e p a r a t i o n a n dd e t e c t i o no fm o n o s a c c h a r i d e sa n dc a r b o h y d r a t e si np o l y s a c c h a
13、r i d e sa n df o o d s 【2 。t h es t u d yo ff r o z e ns t o r a g eo nt h e e l e c t r o p h o r e t i cp a t t e r n so fs a r c o p l a s m i cp r o t e i n se x t r a c t e df r o m f i l l e t so fg o l d e nk i n g l i p t l 3 J a n dt h ed e t e r m i n a t i o no fi o d a t ei n t a b l es
14、 a l t 1 4 J C Ei sb a s e do nt h ed i f f e r e n c ei ne l e c t r o p h o r e t i c m o b i l i t yf o rv a r i o u sa n a l y t e si na ne l e c t r i cf i e l d L 6 T h e r e f o r ei t i ss u i t a b l ef o ra q u e o u ss a m p l e s A m i n oa c i d sa r ei n v e s t i g a t e d b vC Eb e c
15、 a u s et h e ya r ec h a r g e di na q u e o u ss o l u t i o n I ”J I nr e c e n ty e a r s ,m i c r o w a v et e c h n i q u eh a sb e e nw i d e l y a p p l i e dt oa c c e l e r a t i n gc h e m i c a lr e a c t i o n L l 6 1 7 ja n dh a sa t t r a c t e d a t t e n t i o nf o ri t sf a s c i n
16、 a t i n gp r o p e r t i e so v e rc o n v e n t i o n a lh e a - t i n g 【1 8 J M i c r o w a v ee n e r g yi sac l e a ne n e r g ya n dh a st h ec h a - r a c t e r i s t i c so fv o l u m i n a lh e a t i n g M i c r o w a v et e c h n i q u eh a st h e w i d ea p p l i c a t i o ni na n a l y
17、t i c a lc h e m i s t r y , s u c ha sm i c r o w a v e - a s s i s t e de x t r a c t i o n 1 9 ) m i c r o w a v ea s s i s t e dh y d r o l y s i s 2 0 一2 4 】a n d m i c r o w a v ed e r i v a t i z a t i o n 1 8 , 2 5 - - 2 9 】C o m p a r e dw i t ht h a tp r o v i d e db yc o n v e n t i o n a
18、 le x t r a c t i o nm e t h o d s t h er a p i dh e a tt r a n s - f e rp r o v i d e db ym i c r o w a v eh e a t i n gc a nr e s u l ti nas h o r t e re x - t r a c t i o nt i m ef o rc o m p l e xs a m p l e sa n dt h ee x t r a c t i o ny i e l d sa r e c o m p a r a b l e L “J I nt h ep r e s
19、e n ts t u d t h ed e t e r m i n a t i o no fa m i n oa c i d si n 尸n o t o g i n s e n gw a sp e o f o r m e d v i am i c r o w a v e h y d r o l y s i s a n dd e r i v a t i z a t i o nc o u p l e dw i t hz o n ee l e c t r o p h o r e s i sd e t e c t i o n S o m ee x p e r i m e n t a lc o n d
20、i t i o n sw e r ee x a m i n e da n do p t i m i z e d 2 E x p e r i m e n t a l 2 1 R e a g e n t sa n d I n s t r u m e n t s 2 4 D i n i t r o f l u o r o b e n z e n e ( D N F B ) w a sp u r c h a s e d f r o m W u h a nF u x i nC h e m i c a lC o m p a n y ( C h i n a ) 0 1 0m o l LD N F B w a
21、 sp r e p a r e di na c e t o n i t r i l e A m i n oa c i d s ,i n c l u d i n gt y r o - s i n e ( T y r ) ,l y s i n e ( L y s ) ,c y s t e i n e ( C y s ) ,p h e n y l a l a n i n e ( P h e ) ,m e - t h i o n i n e ( M e t ) ,v a l i n e ( V a l ) ,a s p a r a g i n e ( A s n ) ,p r o l i n e (
22、P r o ) ,s e - r i n e ( S e r ) ,a l a n i n e ( A l a ) ,g l y c i n e ( G l y ) ,h i s t i d i n e ( H i s ) ,t r y p t o p h a n e ( T r p ) ,t h r e o n i n e ( T h r e ) ,g l u t a m i ca c i d ( G l u ) ,g l u t a m i n e ( G l n ) ,l e u c i n e ( L e u ) a n di s o l e u c i n e ( I l e ) ,
23、w e r ep u r c h a s e df r o m S i g m a ( U S A ) A 1 lt h ec h e m i c a l sw e r eo fa n a l y t i c a l - r e a g e n t g r a d e T h em i x e ds t o c k s o l u t i o no ft h ea m i n oa c i d sw a s p r e p a r e di nd i s t i l l e dw a t e ri nw h i c ht h ec o n c e n t r a t i o n so f t
24、h ea m i n oa c i d sw e r e0 0 0 4m 0 1 Le a c he x c e p tt h a tt h e * C o r r e s p o n d i n ga u t h o r E - m a i l :a n a l c h e m j l u e d u c n R e c e i v e dA u g u s t3 1 ,2 0 1 2 ;a c c e p t e dD e c e m b e r6 ,2 0 1 2 S u p p o r t e db yt h eS p e c i a l f u n d e dP r o g r a
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