【优质文档】农残检测方法.pdf
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1、农残检测方法 1.农残试剂配置 缓冲溶液:取一包缓冲剂,加入 500ml 蒸馏水,溶解搅拌均匀,密闭、避光、 阴凉处保存。 显色剂:取显色剂一瓶,加入15ml 缓冲溶液溶解, 4冰箱中保存。 底物:取底物一瓶,加入15ml 蒸馏水溶解, 4冰箱中保存。 乙酰胆碱酯酶:取乙酰胆碱酯酶一瓶,用 3ml 缓冲溶液溶解, 4 冰箱中保 存。 注:因农残试剂生产厂家众多,使用时请以试剂说明书为准! 2.样品处理 选取有代表性的蔬菜样品,擦掉样品表面泥土,剪成 1cm 见方碎片,取样品 1g,放入烧杯或提取瓶中,加入 5ml 缓冲溶液,振荡 1min 2min ,倒出提取液,静 置 3min5min,待用
2、。 注意:样品不可用水冲洗,应擦去表面泥土等杂物后取样。为了保证取样具有代 表性,叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样本,果菜从不同个体的表皮处取样。 3.对照溶液测试 在提取瓶中加入 2.5ml 缓冲溶液,再加入 100ul 酶液、 100ul 显色剂,摇匀后于 37放置 15 分钟 ( 每批样品的控制时间必须一致 ) 。15 分钟后再加入 100L 底物 摇匀 , 此时检液开始显色反应 , 应立即倒入 1cm 比色皿,放入仪器比色池中,将仪器 调到测量界面 , 按操作指示面板按键区的“对照” 按钮,仪器开始做对照。 3 分钟后仪器自动对照完成,对照完成后将对照样取出,保持仪器界面不变。 注
3、意:对照测试必须在第一通道进行,对照测试A 应 0.3 ,若对照测试 的结果小于以上数值时,仪器会自动提示“对照错误”,须重新做对照,以保证 测量结果的准确性。 ( 对照测试 A0.3 的原因:一是酶的活性不够,二是反应 温度太低。 ) 4.样品溶液测试 另取干净的提取瓶,放入 2.5ml 样品提取液,加入 100ul 酶液、 100ul 显色剂, 摇匀后于 37放置 15 分钟 ( 放置的时间与对照液放置的时间必须一致 ) 。15 分钟后再加入 100 L 底物摇匀 , 此时检液开始显色反应, 应立即倒入 1cm 比色皿, 放入仪器比色池中,按操作指示面板按键区的“测量”按钮开始测量, 3
4、分钟后仪 器测量完成,显示测量结果。结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示,当蔬菜样品 提取液对酶的抑制率 50%时,表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药存在,样品为阳性结果,阳性结果的样品需要重复检验2 次以上。 对阳性结果的样品,可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。 5.说明 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有 影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬 菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法,减 少色素的干扰。 甲醛检测方法 1.试剂配置 甲醛试剂(一) 甲醛试剂(二):将甲醛试剂(二)加少
5、量热水溶解,再加入甲醛试剂 (二),冷却后定容于50ml 容量瓶 注意:所有试剂均需避光、低温(冰箱4)保存!甲醛试剂(一)有腐蚀性; 配制好的甲醛试剂(二)可使用一个月。 2.样品处理 准确称取 0.2g 样品放入哈希管中,加入 5 滴甲醛试剂(一)和 10ml 蒸馏水, 混匀后盖紧瓶盖,放入沸水中加热5min,取出冷却至室温,用0.45 m 微孔滤膜 过滤,以除去悬浮颗粒,此为待测溶液。 3.空白 取蒸馏水 10ml 于 10ml 比色管中,加入甲醛试剂(二) 1 ml ,混合均匀,放 入恒温水浴锅中 50加热 15 分钟,取出冷却至室温,移入 1cm 比色皿中,放入仪 器相应比色池中,按
6、操作指示面板区的“对照”键进行对照,对照完成后,仪器会 自动记录对照结果,并在显示屏下方显示为“对照测量完成” 。 4.测量 移取处理好的样品溶液5ml 于 10ml 比色管中,加入蒸馏水定容至10ml,然 后再加入甲醛试剂(二) 1 ml,混合均匀,放入恒温水浴锅中50加热 15 分钟, 取出冷却至室温,移入1 cm 比色皿中,放入已经做过对照的仪器通道中按操作 提示面板区的“测量” 键进行测量,测量完成后,仪器自动显示样品中甲醛浓度 值 X(mg/kg )。 吊白块检测方法 1.试剂配置 吊白块试剂(一) 吊白块试剂(二):将吊白块试剂(二)加少量热水溶解,再加入吊白块 试剂(二),冷却后
7、定容于50ml 容量瓶 注意:所有试剂均需避光、低温(冰箱 4)保存!吊白块试剂(一)有腐蚀 性;配制好的吊白块试剂(二)可使用一个月。 2.样品处理 准确称取 0.2g 样品放入哈希管中,加入 5 滴吊白块试剂(一)和 10ml 蒸馏 水,混匀后盖紧瓶盖,放入沸水中加热 5min,取出冷却至室温,用 0.45 m 微孔滤 膜过滤,以除去悬浮颗粒 , 此为待测溶液。 3.空白 取 10ml 蒸馏水于 10ml 比色管中,加入吊白块试剂(二)1 ml ,混合均匀, 放入恒温水浴锅中50加热 15 分钟,取出冷却至室温,移入1cm 比色皿中,放 入仪器相应比色池中,按操作指示面板区的“对照”键进行
8、对照,对照完成后, 仪器会自动记录对照结果,并在显示屏下方显示为“对照测量完成” 。 4.测量 移取处理好的样品溶液5ml 于 10ml 比色管中,加入蒸馏水定容至10ml,然 后再加入吊白块试剂(二)1 ml ,混匀后放入恒温水浴锅中50加热 15 分钟, 取出冷却至室温,移入1 cm 比色皿中,放入已经做过对照的仪器通道中按操作 提示面板区的“测量” 键进行测量,测量完成后,仪器自动显示样品中吊白块浓 度值 X(mg/kg )。 双氧水检测方法 1.试剂配置 双氧水试剂(一) 双氧水试剂(二) 注意:所有试剂均需避光、低温(冰箱4)保存!双氧水试剂(一)有 腐蚀性,双氧水试剂(二)有毒。
9、2.样品处理 准确称取 1.0g 样品放入哈希管中,加 2ml 双氧水试剂(一)和 6ml 蒸馏水, 混匀后盖紧瓶盖,放入恒温水浴锅 0.45 m 微孔滤膜过滤,滤液移入 50下加热10min ,取出冷却至室温,用 10ml 比色管中,加 0.2ml 双氧水试剂(二), 再加蒸馏水至 10ml 刻度,此为待测溶液。 3.空白 向比色管中加入 2ml 双氧水试剂(一)和 0.2ml 双氧水试剂(二),再加蒸馏 水至 10ml 刻度,混匀,转入 1cm 比色皿,放入仪器相应比色池中,按操作指示面 板区的“对照”键进行对照,对照完成后,仪器会自动记录对照结果,并在显示屏 下方显示为“对照测量完成”
10、。 4.测量 向待测液中加入 2ml 双氧水试剂(一)和 0.2ml 双氧水试剂(二),再加蒸馏水 至 10ml 刻度,摇匀,转入 1cm 比色皿中,放入仪器比色池中进行测量,测量完成 后,仪器会自动显示样品浓度结果 X(mg/kg )。 亚硝酸盐检测方法 1. 试剂配置 亚硝酸盐试剂(一):加少量热蒸馏水溶解,冷却后定容于50mL 容量瓶。 亚硝酸盐试剂(二):加蒸馏水溶解,定容于50mL 容量瓶。 亚硝酸盐试剂(三):将两种亚硝酸盐试剂(三)溶于少量热水中,冷却后 定容于 50ml 容量瓶。 亚硝酸盐试剂(四):将亚硝酸盐试剂(四)加亚硝酸试剂(四)定容 于 100mL 棕色容量瓶,避光保
11、存。 亚硝酸盐试剂(五):加蒸馏水溶解,定容于 100mL 棕色容量瓶,避光保存。 注意:除试剂(一)需常温保存外所有试剂均需避光、低温(冰箱 4)保存! 亚硝酸盐试剂(一)容易析出,请用50左右水浴加热1 分钟后使用。配制好的亚 硝酸盐试剂(五)有腐蚀性,可放置一个月左右,溶液变绿后不能使用。 2. 样品处理 准确称取 0.1g 经搅碎混匀的试样,置于哈希管中,加入1mL 亚硝酸盐试剂 (一)和 5mL 的蒸馏水,密闭后于沸水浴中加热 15min ,取出后冷却至室温,然后 一面转动一面加入 1mL 亚硝酸盐试剂(二),摇匀,再加入 1mL 亚硝酸盐试剂 (三),以沉淀蛋白质。加水至 10ml
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