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1、第十九章胃液和十二指肠引流液检验 本章考点 1. 胃液检验 2. 十二指肠引流液检验 一、胃液检验 (一)理学检查 1. 量:在空腹不受刺激的情况下,24h 胃液分泌量为1.2 1.5L , 正常空腹12h 的胃液残余量约为50ml。 在插管成功后持续负压吸引1h 所得的胃液总量称为基础胃液量,正常为 10100ml。若大于 100ml 为增多, 常见于胃分泌增多、胃排空障碍、十二指肠液反流等。若胃液量小于10ml 为减少,主要见于萎缩性胃炎、 胃蠕动功能亢进等。 2. 颜色:正常胃液为无色透明液体,不含血液、胆汁,无食物残渣。混浊灰白色:混有大量粘液所 致。鲜红血丝:多因插胃管时损伤胃黏膜所
2、致。棕褐色:胃内出血与胃酸作用所致,见于胃炎、胃溃 疡、胃癌等。咖啡渣样:胃内有大量陈旧性出血,见于胃癌、胃溃疡及糜烂性胃炎等。黄色、黄绿色: 混有胆汁,见于插管时引起的恶心、呕吐,以及幽门闭锁不全、十二指肠狭窄等所致的胆汁反流等。 3. 粘液:正常胃液中有少量分布均匀的粘液。当胃液中出现大量粘液时,提示胃有炎症,特别是慢性 炎症。粘液一般呈弱碱性,大量增多时可影响胃液的酸度。 4. 气味:正常胃液可略带酸味,而无其他臭味。发酵味:消化不良或明显的胃液潴留、有机酸增多时 可出现发酵味,见于幽门梗阻、胃张力高度缺乏。氨味见于尿毒症,恶臭味见于晚期胃癌,粪臭味见于小 肠低位梗阻、胃大肠瘘等。 5.
3、 食物残渣:空腹12h 后的正常胃液内无食物残渣。若胃排空障碍,如胃扩张、胃下垂、幽门溃疡、 幽门梗阻及胃蠕动功能减退时,胃液中常出现食物残渣,甚至呈食糜样。 6. 组织碎片:正常胃液中无组织碎片。胃癌、胃溃疡患者胃液中有时会出现组织碎片,必要时可将组 织碎片做病理检查以协助诊断。 7. 酸碱度:正常胃液pH为 0.9 1.8 。pH 3.5 7.0 为低酸, pH7.0 为无酸。胃酸减少:萎缩性胃炎、 胃癌、继发性缺铁性贫血、胃扩张、甲状腺功能亢进等。胃酸增多:十二指肠球部溃疡、胃泌素瘤、幽 门梗阻、慢性胆囊炎等。 8. 分层:正常胃液放置片刻后形成不很明显的两层,上层为少量粘液(多为咽下的
4、鼻咽部粘液),下 层为无色透明的胃液层。病理情况下,如胃癌、幽门梗阻时,胃液可分为三层,上层为粘液,中间为胃液, 下层为食物残渣或坏死组织。 (二)化学检查 1. 胃酸分泌量测定:以五肽胃泌素等作刺激物,定时留取基础胃液,测定单位时间内胃酸的分泌量。 (1)参考值: BA0 (基础胃酸排量): 3.901.98mmolh(很少超过5mmol h)。 MA0 :323mmol h(男),女性略低。PA0 (高峰胃酸排量): 20.608.37mmolh。BA0MA0 (最大胃酸排量):0.2 。 (2)临床意义:影响胃酸分泌的因素很多,尽管采集标本、试验方法满意,但其检测仍可受患者的性 别、精神
5、、年龄、食欲、酒烟嗜好等影响。故胃酸分泌量测定对诊断疾病的特异性较差,仅在十二指肠溃 疡、胃泌素瘤、胃癌等的诊断中有一定意义。 胃溃疡:胃酸分泌量大多无明显增高,少数可增高,但有的患者降低。 十二指肠溃疡:BAO5mmol/L有诊断意义, PAO40mmol/L高度提示合并出血与穿孔。 胃泌素瘤: BAO15mmol/L ,MAO30mmol/L ,BAO/MAO 0.6 2. 乳酸测定:正常空腹胃液中有少量乳酸,但一般方法不易检出。当胃液呈中性或碱性而食物在胃内 潴留 6h 以上时,由于细菌分解糖类而使胃液中的乳酸、醋酸等增多。乳酸测定主要用于观察胃内食物潴留 及协助诊断胃癌。 3. 隐血试
6、验:正常胃液不含血液,显微镜检查无红细胞。当急性胃炎、胃溃疡、胃癌时可有不同程度 胃出血而隐血试验呈阳性,但多次连续检查的意义更大。溃疡病的隐血试验阳性多为间歇性的,而胃癌则 多为持续性。由于隐血试验比较敏感,插管损伤、牙龈出血咽下后均可呈阳性。另外,胃液中维生素C过 多可抑制颜色反应而出现假阴性。 (三)显微镜检查 1. 细胞 (1)红细胞:正常胃液无红细胞。插管损伤时出现少量红细胞无意义。胃液内有大量红细胞时,常提 示胃可能有溃疡、糜烂、炎症和恶性肿瘤等。 (2)白细胞:正常胃液中白细胞约为(0.1 1.0 )10 9L,多为中性粒细胞。白细胞 1.010 9L 时常有病理意义,见于胃黏膜
7、的多种炎症。鼻咽部分泌物及痰液混入胃液时可见大量白细胞,同时还可见 毛柱状上皮细胞和炭末细胞,常无临床意义。 (3)上皮细胞:胃液中可有来自口腔、咽喉、食管黏膜的鳞状上皮细胞,不见或偶见柱状上皮细胞。 柱状上皮细胞增多提示胃黏膜有炎性病变。 (4)肿瘤细胞:如发现有成堆的大小不均、形态不规则、核大或多核、染色质粗糙、可见核仁的细胞 时,应高度怀疑是癌细胞,需做巴氏染色进一步检查确诊。 2. 细菌:由于胃液的杀菌作用,正常胃液中检验不出确定的菌丛,仅见咽喉部天然寄居菌或酵母菌, 常无临床意义。在低酸、无酸或有食物潴留时可以出现一些有意义的细菌,如八叠球菌、博- 奥杆菌、抗酸 杆菌、化脓性球菌、幽
8、门螺旋杆菌、酵母菌等。 3. 食物残渣:正常空腹12h 胃液中食物残渣极少。若胃液中出现大量淀粉颗粒、脂肪小滴、肌肉纤维 等,多见于幽门梗阻、胃扩张、胃下垂等。 (四)临床应用 (1)胃分泌功能检查:胃液检查对胃泌素瘤、胃癌和十二指肠溃疡的诊断与鉴别诊断有重要意义。如 果空腹胃液量大于100ml,BA0大于 15mmolh,MA0大于 30mmolh,且 BA0 MA0大于 0.6 ,即可考虑胃 泌素瘤。临床上通过胃液检查和血清胃泌素的测定,95% 的胃泌素瘤可确诊。 (2)贫血的鉴别诊断:由于内因子生成减少和体内有抗内因子抗体的存在,使维生素B12吸收减少所 致的恶性贫血是一种巨幼细胞性贫血
9、。胃液检查为真性胃酸缺乏,五肽胃泌素刺激后无盐酸分泌,给予维 生素 B12 治疗后贫血纠正,但仍无胃酸分泌,依此可与营养性巨幼细胞性贫血鉴别。 (3)肺结核的辅助诊断:肺结核患者,特别是不会咳痰的儿童,常将含有结核杆菌的痰液咽下,如果 胃液浓缩找到结核杆菌,则可协助肺结核的诊断。 二、十二指肠引流液检验 (一)理学检查 正常十二指肠引流液的理学特性见表1-19-1 。病理情况下,十二指肠引流液的理学特性可以出现以下 改变。 表 1-19-1 正常人十二指肠引流液的理学特性 项目D液A胆汁B胆汁C胆汁 量( ml)1020 1020 3060 随引流时间而异 颜色无色或淡黄色金黄色深褐色柠檬黄色
10、 透明度透明或微混透明透明透明 粘稠度较粘稠略粘稠粘稠略粘稠 PH 7.6 7.0 6.8 7.4 比密1.009 1.013 1.026 1.032 1.007 1.010 团絮状物少量无无无 1. 胆汁排出异常:无任何胆汁排出:可见于结石、肿瘤所致的胆总管梗阻。无B胆汁流出:见于 胆总管上段、胆囊管梗阻,或胆囊收缩不良、胆囊摘除术后。B胆汁流出增多:特别是在未用刺激剂之前 已有大量B胆汁流出,常因Oddi 括约肌松弛、胆囊运动过强所致。 2. 胆汁粘稠度异常:引流出异常粘稠胆汁,多见于胆石症所致的胆囊淤积。引流出稀薄胆汁,多因慢 性胆囊炎而胆汁浓缩不良所致。 3. 胆汁透明度异常:胆汁中混
11、入大量胃液时可使胆汁中的胆盐沉淀而致胆汁混浊,加入NaOH 后可使沉 淀的胆盐溶解而变清。如加入NaOH 后仍然混浊并出现较多的团絮状物,可能因十二指肠炎、胆管炎、胆结 石、消化性溃疡、胰头癌等使胆汁含有较多的白细胞、上皮细胞及血液所致。 4. 颗粒沉淀物和胆砂:引流液中出现颗粒状沉淀物或胆砂(暗褐色砂粒状物,有粘土样感觉)见于胆 石症。可做胆石化学分析,以判断胆石性质。我国以胆红素结石为主,主要见于B胆汁。若C胆汁出现颗 粒状沉淀或胆砂提示肝内胆管结石。 5. 颜色异常:血丝:多因插管损伤所致。血性:见于急性十二指肠炎症、消化性溃疡、胆囊癌、 肝内出血或全身出血性疾病等。污秽陈旧血块:污秽陈
12、旧血块同时伴有混浊者,见于胆囊癌。白色: 因胆囊水肿、胆汁酸显著减少、粘液增多所致。脓性:见于化脓性胆囊炎。绿色或黑褐色:见于胆管 扩张伴感染,或胆石症所致的胆汁淤积。 (二)化学检查 十二指肠引流液的化学检查主要是针对胰腺外分泌功能所进行的检查,即促胰酶素- 促胰液素试验。常 见于胰腺炎、胰腺癌和胰腺纤维囊性纤维性变。 (三)显微镜检查 1. 细胞:检查细胞成分无需离心沉淀,直接取其团絮状物显微镜检查。红细胞:正常引流液无红细 胞,插管损伤引起少量红细胞,若大量出现见于十二指肠、肝、胆、胰等部位的炎症、消化性溃疡、结石 或肿瘤等。白细胞:正常引流液中可有白细胞010 个 HP ,主要为中性粒
13、细胞。在十二指肠炎和胆管 感染时可大量增多,并有吞噬细胞。上皮细胞:正常引流液中可有柱状上皮细胞,常无临床意义。十二 指肠炎、胆管炎时,柱状上皮细胞增多,并伴有白细胞增高和粘液。肿瘤细胞:引流液为血性时,应离 心沉淀,作巴氏染色以检查有无肿瘤细胞。十二指肠引流液的细胞学检查对胆囊癌、肝外胆管癌及胰头癌 的诊断均有重要的参考价值。 2. 结晶:正常十二指肠引流液中无结晶,胆石症时可出现相应的结晶。最常见的结晶为胆固醇结晶、 胆红素结晶和胆红素钙结晶。若结晶伴有红细胞存在,则结石的可能性更大。 3. 病原生物 (1)寄生虫及寄生虫卵:在B胆汁中可发现蓝氏贾第鞭毛虫滋养体、华支睾吸虫卵、钩虫卵、蛔虫
14、卵、 粪圆线虫蚴虫等。肝吸虫患者在胆汁中检查出虫卵的机会远较粪便为高。阿米巴肝囊肿偶尔可在胆汁中找 到阿米巴滋养体或包囊。 (2)细菌: 正常胆汁中无细菌,在胆管感染的胆汁中主要致病菌是革兰阴性杆菌,但也可有混合感染。 常用细菌检查方法有直接涂片法和培养法。B胆汁中培养出伤寒杆菌可确诊为伤寒带菌者;细菌性胆管感染 可培养出大肠杆菌、变形杆菌、克雷白杆菌及绿脓杆菌等。培养出大肠杆菌、变形杆菌、克雷白杆菌及绿 脓杆菌等。 (四)临床应用 1. 协助诊断某些寄生虫病:对可疑有寄生虫感染而又需确诊时,十二指肠引流液检查常可获得理想的 结果。如肝吸虫病、阿米巴肝脓肿和胆管蛔虫的诊断等。 2. 诊断胆石:
15、国内最常见的胆石为胆固醇结石、胆红素结石和胆红素钙结石。对于胆囊造影不显影或B 超检查不能确诊的结石,十二指肠引流液检查是唯一的选择,并且可进一步做胆石化学成分分析,以确定 胆石的性质。 3. 诊断伤寒带菌者:B胆汁中培养出伤寒杆菌即可诊断为伤寒带菌者。 4. 诊断胰腺疾病:采用促胰酶素- 促胰液素试验,观察胰液量、碳酸氢盐和淀粉酶的变化。对诊断慢性 胰腺炎、胰腺癌有一定价值。 第二十章脱落细胞检查 本章考点 1. 概述 2. 正常脱落细胞形态 3. 良性病变的上皮细胞形态 4. 肿瘤脱落细胞形态 5. 标本采集与涂片制作 6. 显微镜检查 7. 阴道脱落细胞检查 8. 浆膜腔积液脱落细胞检查
16、 9. 泌尿系统脱落细胞检查 10. 痰液脱落细胞检查 一、概述 (一) 脱落细胞学概念 脱落细胞学和细针吸取细胞学属于细胞病理学的一个分支,是采集人体各部位的上皮细胞,经染色后 用显微镜观察其形态,协助临床诊断疾病的一门学科。 (二)脱落细胞学检查的优缺点 1. 优点:脱落细胞学检查的优点有:简单易行、对设备要求不高、安全性强;对患者造成的痛苦少, 可反复取材检查;诊断迅速,癌细胞检出率较高,特别适用于大规模防癌普查和高危人群的随访观察。 2. 不足:有一定的误诊率,这是由于细胞病理学检查的局限性,只能看到少数细胞,不能全面观察病 变组织结构;具体部位难确定;不易对癌细胞作出明确的分型。 二
17、、正常脱落细胞形态 (一)正常脱落上皮细胞 正常脱落的上皮细胞主要来源于复层鳞状上皮(扁平上皮)和柱状上皮。 1. 鳞状上皮细胞:复层鳞状上皮,一般有10 多层细胞。被覆于全身皮肤、口腔、喉部、鼻咽的一部分、 食道、阴道的全部以及子宫颈。鳞状上皮细胞分为基底层细胞、中层细胞和表层细胞。 (1)基底层细胞 1)内底层细胞:细胞呈圆形或卵圆形,直径12 15m ;胞质巴氏染色呈深蓝、暗绿和灰蓝色,HE染 色呈暗红色;胞核圆形或卵圆形,居中,染色质细颗粒状;核与胞质比(即核的直径与细胞质幅缘之比, 简称核胞质比)约1:( 0.5 1)。 2)外底层细胞:细胞呈圆形或椭圆形,直径15 30m ;胞质较
18、丰富,巴氏染色呈染浅蓝色,HE染暗 红色;核圆形,居中或偏位,染色质疏松细颗粒状;核与胞质比1:( 12)。 (2)中层细胞:位于鳞状上皮中部。细胞呈圆形、梭形或多角形,直径3040 m ;胞质巴氏染色呈 浅蓝色或淡绿色,HE染色呈淡红色;胞核较小居中,染色质疏松呈网状;核与胞质比1:( 23)。 (3)表层细胞:位于阴道黏膜最表面,细胞扁平,呈不规则多边形,细胞体积增大,直径4060m 。 根据细胞成熟程度,又分为角化前、不完全角化和完全角化细胞。 1)角化前细胞:细胞核圆而小,直径6 8m ,染色较深,但染色质仍均匀细致呈颗粒状;胞质巴氏 染色呈浅蓝色或淡绿色,HE染色呈淡红色;核胞质比为
19、1:( 35)。 2)不完全角化细胞:细胞核明显缩小,固缩、深染,直径为4m ;胞质透明,巴氏染色呈粉红色,HE 染色呈淡红色,边缘可卷褶;核胞质比为1:5。 3)完全角化细胞:细胞核消失;胞质极薄,有皱褶,巴氏染色呈杏黄或橘黄色,HE染色呈淡红色,胞 质内可见细菌,此种细胞为衰老死亡的细胞。 (4)复层鳞状上皮从底层到表层细胞形态的变化规律为: 1)细胞体积由小到大。 2)胞核由大到小,最后消失。 3)核染色质由细致、疏松、均匀到粗糙、紧密、固缩。 4)核胞质比由大到小。 5)胞质量由少到多,胞质染色由暗红色到浅红色。 2. 柱状上皮细胞:柱状上皮主要被覆于鼻腔、鼻咽、支气管树、胃肠、子宫颈
20、管、子宫内膜及输卵管 等部位。柱状上皮脱落细胞主要包括涂片纤毛柱状细胞、粘液柱状细胞和储备细胞。 (1)纤毛柱状细胞:细胞呈锥形,顶端宽平,其表面有密集的纤毛,纤毛巴氏染色呈亮红色;胞质泡 沫状,巴氏染色染蓝色,HE染淡红色;核圆形位于细胞中部,染色质细颗粒状。在涂片中的常见排列形式: 1)蜂房状排列:细胞成群或呈片,排列紧密,不重叠。 2)栅栏状:细胞紧密排列,可有重叠。 (2)粘液柱状细胞:细胞呈圆柱形或卵圆形,有时呈锥形;胞质丰富,含大量粘液呈空泡状,故着色 淡而透明,有时含巨大空泡,将核挤到一侧,呈月牙形或戒指形,染色与纤毛柱状细胞相同;核呈卵圆形, 核圆形位于细胞的底部,染色质细致呈
21、网状,可见小核仁。 (3)储备细胞:是有增生能力的幼稚细胞(未分化)。居假复层柱状上皮的基底部,体积小,呈圆形、 卵圆形或多角形,染色质呈均匀细颗粒状,核边清楚。常见核仁。胞质量少,略嗜碱性。 表 1 不同鳞状上皮细胞形态比较 不同细胞胞体直径胞质巴氏染色胞核形态染色质核胞比 基底层 内基底圆形或卵圆1215 深蓝、暗蓝和灰蓝圆或卵圆细颗粒1:0.5 1 外基底圆形或椭圆1530 浅蓝色圆细颗粒1:12 中层圆形、梭形、多角形 30 40 浅蓝或淡绿核小疏松,呈网状1:23 表层扁平、多边形4060 角化前68 浅蓝或淡绿核小颗粒状1:35 不完全角化4 透明,粉红核更小1:5 完全角化杏黄或
22、橘黄核消失 3. 上皮细胞成团脱落时的形态特点 (1)成团脱落的鳞状上皮:基底层细胞呈多边形,细胞大小一致,核一致,距离相等,呈嵌铺砖状。 (2)成团脱落的纤毛柱状上皮:细胞常紧密聚合成堆,细胞间界限不清楚,呈融合体样,可见细胞核 互相重叠,形成核团。在核团的周围是胞质融合形成的“胞浆质带”。整个细胞团的边缘有时可见纤毛。 (3)成团脱落的粘液柱状上皮:细胞呈蜂窝状,胞质内含大量粘液,细胞体积较大。 (二)脱落上皮细胞的退化变性 细胞脱落后,因营养不良就会发生变性直至坏死称退化变性,简称退变。脱落细胞退变可分为肿胀性 退变和固缩性退变两类: 1. 肿胀性退变: 肿胀性退变表现为胞体肿胀,约增大
23、 23 倍,细胞边界不清楚;胞质内出现液化空泡, 有时可将细胞核挤压至一边;细胞核表现为肿胀变大,染色质颗粒模糊不清。最后胞膜破裂,胞质完全溶 解消失,剩下肿胀的淡蓝色裸核,直至逐渐核溶解消失。 2. 固缩性退变:固缩性退变表现整个细胞变小而皱缩变形;胞质染成深红色;细胞核染色质致密着深 蓝色,最后细胞核破裂为碎片或溶解成淡染的核阴影,称影细胞。 表层鳞状上皮常表现为固缩性退变;中、底层细胞常表现为肿胀性退变。柱状上皮细胞较鳞状上皮细 胞更易发生退变,多见于肿胀性退变。 三、良性病变的上皮细胞形态 (一)上皮细胞的增生、再生和化生 1. 增生:指细胞分裂增殖能力加强,数目增多,常伴有细胞体积增
24、大。多由慢性炎症或其他理化因素 刺激所致。增生的细胞形态特点是: (1)胞核增大,可见核仁。 (2)胞质量相对较少,嗜碱性,核胞质比略大。 (3)少数染色质形成小结,但仍呈细颗粒状。 (4)核分裂活跃,可出现双核或多核。 2. 再生:当组织损伤后,由邻近组织的同类细胞增殖补充的过程叫再生。细胞形态与增生的细胞相似, 常伴有数量不等的白细胞。 3. 化生:一种成熟的组织在某些因素的作用下,被另一类型的成熟组织所替代的过程称为化生。如子 宫颈柱状上皮细胞在慢性炎症时转变为鳞状上皮细胞,这种过程叫鳞状上皮化生,简称鳞化。若鳞化的细 胞核增大,形态、大小异常,染色质增粗、深染,表明在化生的同时发生了核
25、异质,称为异型化生或不典 型化生。 (二)上皮细胞的炎症变性 按病程可将炎症分为急性、亚急性和慢性三种类型,其细胞学特征分述如下: 1. 急性炎症:以变性(肿胀性退变)、坏死为主。伴有大量的中性粒细胞和巨噬细胞。 2. 亚急性炎症:除有变性、坏死外,还有增生的上皮细胞和各种白细胞。 3. 慢性炎症:以增生、再生和化生病理性改变为主,可见较多成团的增生上皮细胞,炎症细胞以淋巴 细胞和浆细胞为主。 4. 炎症时上皮细胞的改变:主要是核的改变: (1)核增大较明显,核胞质比稍增大。 (2)核固缩、深染,核胞质比不大。 (3)核形轻度畸形。 5. 炎症时背景:较脏,即有大量白细胞、红细胞,有时可见小组
26、织细胞或多核巨细胞,也可见到粘液 及退化坏死的细胞碎屑。 (三)核异质 核异质是指上皮细胞的核异常。主要表现为核增大、形态异常、染色质增多、分布不均、核膜增厚、 核染色较深, 胞质尚正常 。核异质细胞是介于良性和恶性之间的过渡型细胞,根据核异质细胞形态改变程 度,可分为轻度核异质和重度核异质。 1. 轻度核异质:多由慢性炎症细胞刺激而引起,又称炎症核异质。细胞核轻度增大,较正常细胞大0.5 倍左右,并有轻度至中度畸形,染色质轻度增多,染色稍加深,核胞质比尚在正常范围内。多见于鳞状上 皮中、表层细胞。 2. 重度核异质:因部分可发展为癌,故又称癌前核异质。细胞核体积比正常大12 倍,染色质增多,
27、 呈粗网状,分布不均,偶见染色质结节,核边增厚,核有中度以上畸形,核胞质比轻度增大。应结合临床 进行动态观察。 (四)异常角化 异常角化是指鳞状上皮细胞胞质的成熟程度超过胞核的成熟程度,又称不成熟角化或角化不良。巴氏 染色表现为上皮细胞核尚幼稚,而胞质已出现角蛋白,并染成红色或橘黄色。若出现在中、底层细胞称为 早熟角化;若出现在表层角化前细胞,则称为假角化。有人认为可能是一种癌前表现,应给予重视,定期 复查。 四、肿瘤脱落细胞形态 恶性肿瘤与正常细胞相比,具有超正常的增生能力并具有侵润性和转移性。一般来说,确定癌细胞主 要是根据细胞核的改变。根据癌的细胞学类型可将癌分为鳞状细胞癌、腺癌和未分化
28、癌。 (一)恶性肿瘤细胞的主要形态特征 1. 细胞核的改变 (1)核增大:胞核显著增大,为同类正常细胞14 倍,有时可达10 倍以上。 (2)核畸形:各种畸形,如结节状、分叶状、长形、三角形、不规则形,可有凹陷、折叠。某些腺癌 细胞畸形不明显。 (3)核深染:由于癌细胞DNA大量增加,染色质明显增多、增粗,染色加深,呈蓝紫色似墨滴状。腺 癌深染程度不及鳞癌明显。 (4)核胞质比失调:由于胞核显著增大,引起核胞质比增大。癌细胞分化越差,核胞质比失调越明显。 2. 细胞质的改变 (1)胞质量异常:胞质相对减少,分化程度越低,胞质量越少。 (2)染色加深:由于胞质内含蛋白质较多,HE染色呈红色,且着
29、色不均。 (3)细胞形态畸形:癌细胞呈不同程度的畸形变化,如纤维形、蝌蚪形、蜘蛛形及其他异型。细胞分 化程度越高,畸形越明显。 (4)空泡变异:腺癌细胞较为突出,常可融为一个大空泡,将核挤向一侧,形成戒指样细胞。 (5)吞噬异物:癌细胞胞质内常见吞噬的异物。如血细胞、细胞碎片等。偶见胞质内封入另一个癌细 胞,称为封入细胞或鸟眼细胞。 3. 癌细胞团:涂片中除可见单个散在癌细胞,还可见成团脱落的癌细胞。癌细胞团中,细胞大小、形 态不等,失去极性,排列紊乱,癌细胞繁殖快,互相挤压,呈堆叠状或镶嵌状。 (二)恶性肿瘤细胞涂片中背景成分 涂片中常见较多红细胞和坏死组织,如有继发感染,还可见数量不等的中
30、性粒细胞。 (三)癌细胞与核异质细胞的鉴别见表 1-20-1 。 表 1-20-1 癌细胞与核异质细胞的鉴别 癌细胞核异质细胞 核增大显著增大( 15 倍)轻度增大( 1 倍左右) 核畸形显著轻度至中度 染色质结构明显增多、增粗,深染轻度增多 , 轻度加深 核胞质比显著增大无明显变化 (四)常见癌细胞类型形态特征 1. 鳞癌:由鳞状上皮细胞癌变称为鳞状上皮细胞癌简称鳞癌。根据细胞分化程度,可分为高分化鳞癌 和低分化鳞癌。 (1)高分化鳞癌:癌细胞分化程度较高,以表层细胞为主。癌细胞的多形性和癌珠是高分化鳞癌的标 志。 (2)低分化鳞癌:癌细胞分化程度较低,以中、底层细胞为主。 2. 腺癌:由柱
31、状上皮细胞恶变而来的癌称为腺癌,根据分化程度分为高分化腺癌和低分化腺癌。 (1)高分化腺癌:胞体较大,可单个脱落也可成排成团脱落,胞质丰富,含有空泡,有时大空泡将核 挤于一侧,形成印戒样癌细胞。 (2)低分化腺癌:胞体较小,多成团互相重叠,极性紊乱,易融合成团呈花边样或桑葚样。 3. 未分化癌:从形态上难以确定其组织来源,分化程度最低,恶性程度最高的癌,称未分化癌。细胞 较小,胞浆量很少。根据癌细胞形态分为大细胞未分化癌和小细胞未分化癌。 脱落细胞学主要是研究恶性肿瘤细胞的异型性,为此作出正确诊断。但任何一种异型性表现都不能作 为绝对指征,须综合判断,并以涂片中背景细胞作对照,慎重得出结果。
32、五、标本采集与涂片制作 (一)标本采集主要方法 1. 直视采集法:在肉眼观察下直接采集,如阴道、宫颈、口腔、鼻咽部等部位,采用刮取、吸取或刷 取等方式采集标本,对食管、胃、肠道、气管、支气管可借助于内镜在病灶处直接刷取标本。 2. 直接留取:液体标本的采集如尿液、痰液、乳头溢液等。 3. 针穿抽吸法:浆膜腔积液可用穿刺吸取标本;浅表及深部组织器官,如淋巴结、乳腺、甲状腺、肝 等则用细针穿刺吸取。 4. 灌洗法:向空腔器官或腹腔、盆腔(剖腹探查时)灌注一定量生理盐水冲洗,使其细胞成分脱落于 液体中,收集灌洗液离心制片,作细胞学检查。 5. 摩擦法:用摩擦工具在病变处摩擦,取擦取物直接涂片。常用的
33、摩擦工具有线网套、气囊、海绵球 摩擦器等。可对鼻咽部、食管和胃等处病灶取材涂片。 (二)常用的涂片制作方法 1. 推片法:适用于较稀薄的液体标本,如尿液、浆膜腔积液。通常将标本低速离心或自然沉淀后,取 沉淀物推片。方法同血液制片。 2. 涂抹法:适用于较粘稠的标本,如食管和宫颈粘液及痰液。用竹签将标本顺向涂抹,不宜重复。 3. 薄层细胞检测法(TCT )或液基细胞学检查(LCT):是用特制的刷子将所取到的脱落细胞样本收集 到细胞保存液中,通过ThinPrep2000 系统程序化处理制成薄层涂片。优点是:几乎保留了取材器上所得 到的全部标本。避免了细胞过度干燥造成的假象。薄片中的不正常细胞容易被
34、观察,易于鉴别。 (三)固定 1. 目的:主要是保持细胞的自然形态,防止细胞自溶和细菌所致的腐败;固定能沉淀和凝固细胞内的 蛋白质,并能破坏细胞内的溶酶体,从而细胞结构清晰并易于着色,所以固定愈快,细胞愈新鲜,染色效 果愈好。 2. 常用固定液 (1)乙醚乙醇固定液:此液渗透性强,固定效果好。适用HE染色和巴氏染色。 (2) 95% 乙醇固定液:适用于大规模防癌普查。制备简单,但渗透能力较差。 3. 固定方法 (1)带湿固定:即涂片尚未干燥即行固定。适用于痰液、宫颈刮片及食管刷片等较粘稠的标本。 (2)干燥固定:即涂片自然干燥后,再行固定。适用于较稀薄的标本,如尿液、浆膜腔积液等。 4. 固定
35、时间:一般为l5 30min。含粘液较多的标本如痰液、宫颈刷片等,固定的时间要适当延长;不 含粘液的标本,如尿液、胸腹水等,固定时间可酌情缩短。 (四)常用染色方法 染色是利用细胞中各种结构的生化组成不同,对染料的亲和力不同,而显示不同的颜色,使细胞的形 态和结构易于辨认。常用的染色有HE 、巴氏及瑞 -姬氏染色,其特点如下。 1.HE 染色:此法染色效果也好,只是胞质色彩不丰富,不能用于观察阴道涂片对雌激素水平测定。优 点是操作简易,试剂易配制。 2. 巴氏染色:此法染色特点是细胞具有多色性,色彩丰富鲜艳,胞内结构清晰,染色效果好,是细胞 病理学检查常用的方法,尤其是观察女性雌激素水平对阴道
36、上皮细胞的影响。此法的缺点是操作程序复杂。 3. 瑞-吉氏染色:此法适用于血片、淋巴穿刺液和胸腹水涂片。 六、显微镜检查 (一)涂片观察方法 主要在低倍镜下观察,当发现有异常细胞时,再换用高倍镜辨认,必要时用油镜观察。 (二)报告方式 1. 直接法:根据细胞形态,对有特异性细胞学特征的、较容易确诊的疾病可直接作出诊断,如脂肪瘤 等。 2. 分级法:是常用的报告方式,能客观地反映细胞学的变化。目前有三级、四级和五级三种分类方法。 (1)三级分类法 级:阴性。涂片中均为正常细胞或一般炎症变性细胞。 级:可疑。涂片发现核异质细胞。 级:阳性。涂片中找到典型的癌细胞。可根据癌细胞形态,进一步分类。 (
37、2)四级分类法 级:阴性。 级:核异质。涂片中发现少量轻度核异质细胞,多由炎症变性所致。 级:可疑。涂片中有重度核异质细胞,其形态基本符合癌细胞标准。但由于数量过少,或形态不典 型,不能排除癌前病变的可能性。 级:阳性。涂片中可见典型的癌细胞。 (3)五级分类法(Papanicolaou分级): 级:涂片中均为正常细胞和一般炎症变性细胞。 级:有少量轻度核异质细胞,但无恶性迹象。 级:有较多重度核异质细胞,但不能肯定为恶性。 级:有大量重度核异质细胞,强烈提示为恶性肿瘤,但仍缺乏特异性癌细胞。 级:可见典型癌细胞,并能根据细胞学特点,作出初步分类。 (三)质量控制 1. 标本采集:只有合格的涂
38、片,诊断才是可靠的。各类标本中应出现有效细胞成分才能称为满意的标 本。 2. 制片:取材满意,好的涂片应厚薄适当、分布均匀、细胞结构须清晰。标本制好后应立即固定,苏 木素染液每天须进行过滤。 3. 阅片复查:仔细认真阅片,疑难片子要请示有经验的检验人员,对涂片进行复查或会诊是细胞诊断 质量管理体系一个重要措施。 4. 定期随访:加强与临床的联系,对细胞学诊断阳性或出现异常细胞病例,要进行定期随访,以达到 早期诊断、及时治疗的目的。 七、阴道脱落细胞检查 阴道脱落细胞多数为宫颈及阴道上皮,较少见子宫内膜细胞。阴道细胞学检查在脱落细胞中应用最为 广泛。 (一)正常脱落上皮细胞 1. 鳞状上皮细胞:
39、从外阴向内直至子宫颈外口的黏膜均被覆鳞状上皮。在其脱落细胞中可见底层、中 层、表层3 层细胞,细胞形态与正常脱落的鳞状上皮细胞基本相同。阴道上皮细胞形态变化与卵巢激素关 系密切相关。 (1)底层细胞:分为内底层和外底层细胞。阴道涂片一般不见内底层细胞,仅在哺乳期、闭经后,阴 道高度萎缩或糜烂、创伤时才见。 外底层细胞根据来源不同,分为3 型:宫颈型外底层细胞;产后型外底层细胞;萎缩型外底层 细胞。 (2)中层细胞:分为非孕期中层细胞和妊娠期中层细胞。 (3)表层细胞:月经周期中阴道上皮变化,主要表现在表层角化前和角化细胞所占比率上的变化。此 层最能反映雌激素水平。 2. 柱状上皮细胞来自子宫颈
40、内膜和子宫内膜。 (1)子宫颈内膜细胞:根据其形态,分为: 1)分泌型柱状细胞:又称粘液细胞。常见于排卵期分泌旺盛时的涂片。 2)纤毛柱状细胞:较少见,在绝经后较多见。 (2)子宫内膜细胞:可出现于月经周期的开始直到周期的第l0 12 天。一般而言,除使用子宫内避 孕器具外, 如在月经周期第12 天后出现, 应认为宫内膜有病变。根据其雌激素水平可分为周期型和萎缩型。 输卵管上皮细胞一般不易脱落,即使脱落也与子宫内膜细胞相混而不易辨认。 (二)正常脱落非上皮细胞 可见少许中性粒细胞、红细胞、阴道杆菌、粘液(呈蓝染丝状)、纤维素(呈红染网状)、精子(有 精子的涂片不宜作阴道细胞学检查)。 (三)阴
41、道上皮与卵巢功能关系 阴道上皮受卵巢内分泌直接影响,其成熟程度与体内雌激素水平呈正相关,雌激素水平高时,涂片内 有大量角化细胞,核深染致密;雌激素水平低时,涂片内出现底层细胞,故根据涂片内上皮细胞的变化可 以评价卵巢功能。利用阴道细胞学检查来反应体内雌激素水平。分为雌激素水平低落和雌激素水平影响两 大类。 1. 雌激素低落:分为极度、高度、中度及轻度低落4 级,涂片主要是底部及中层细胞多,多见于老年 妇女和卵巢切除者。 2. 雌激素影响:分为轻度、中度、高度及极度影响4 级,以角化细胞为主,随着角化程度的增加,角 化细胞从20% 可增加到90% 以上。见于行经后至排卵前、接受雌激素治疗及卵巢颗粒细胞癌,子宫内膜囊状 增生,子宫肌瘤,卵泡膜细胞瘤等。 (四)女性一生中各阶段阴道脱落细胞表现 1. 青春期:女性在1317 岁,卵泡的发育逐渐趋于成熟而致正常生理变化。青春期内分泌系统尚未稳 定,故阴道涂片上皮细胞无明显周期性改变。 2. 性成熟期:青春期后,卵巢发育成熟,阴道上皮随卵巢激素水平改变发生周期性变化。 (1)行经期:一般35 天,雌激素轻度影响,角化前细胞增多。 (2)行经后期:周期第511 天。雌激素水平轻度到中度影响,以角化前细胞为主,角化细胞逐渐增 多。 (3)排卵前期:周期第ll 13 天角化细胞占30% 50% 。
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