脑脊液常规操作规程.pdf
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1、精品文档 . 1 检验目的 指导脑脊液( CSF) 常规测定。 2 方法原理 2.1 脑脊液是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体。由于脉络丛上皮细胞对血浆 中各种物质的选择性分泌和超滤作用,血浆中各种成分对血脑屏障的通透性各有不 同。其中最易通过血脑屏障的是氯、钠、镁离子及乙醇; 其次为清蛋白、葡萄糖、钙 离子、乳酸、氨基酸、尿素和肌酐; 纤维蛋白原、补体、抗体、某些药物、胆红素、 胆固醇则极难或不能通过。中枢神经系统任何部位发生器质性病变时,如感染、炎 症、肿瘤、外伤、水肿和阻塞等都可以引起脑脊液成分的改变。通过对脑脊液理学 检查,显微镜检查、化学和免疫学检查及脑脊液病原学检查,可对疾病
2、的诊断、治 疗和预后判断提供依据。 2.2 脑脊液( CSF )常规测定内容包括 : 颜色、性状、有核细胞计数、红细胞计数、潘 氏试验、细菌等。 2.3 潘氏( pandys) 试验: CSF中的球蛋白与苯酚结合,形成不溶性的蛋白盐而产生白 色混浊或沉淀。 3 方法性能参数(如线性、检出限、测量区间、不确定度、准确性、精密度、灵敏度和特 4. 标本类型 4.1 标本类型:新鲜 CSF 。 4.2 标本拒收条件:拒收延迟室温2h、冷藏 6h 未送达标本。 4.3 标本保存与稳定性:一般室温1h 内完成检验,久置可致细胞破坏,影响细胞计数 及分类检查。 1 颜色( COLOR) 6 中性粒细胞(
3、NE) 2 透明度( clearity) 7 淋巴细胞( LY) 3 凝固性( coagulability) 8 单核细胞( MO ) 4 脑脊液有核细胞计数 (CSF NUCL) 9 潘氏试验( pandys test ) 5 脑脊液红细胞计数( CSF RBC) 精品文档 . 5. 要求的容器、防腐剂或添加物、仪器、试剂或分析系统 5.1 标本容器: BD无促凝成分红头管或洁净干燥带盖玻璃管。 5.2 试剂 5.2.1试剂组分: 生理盐水0.9%Nacl 溶液 白细胞稀释液1% 冰乙酸( 1ml 分析纯冰醋酸 +蒸馏水至 100ml) 刘氏快速瑞氏染色液 A 液:曙红、甲醇 B 液:亚甲蓝
4、 潘氏试剂10% 苯酚溶液(纯苯酚 10ml+蒸馏水至 100ml) 5.2.2 试剂存储和有效期: 试剂名称存储条件有效期开瓶有效期位置 生理盐水室温1 年1 年存货柜 / 血常规室操作台 冰乙酸室温2 年1 年药品柜 1% 乙酸冷藏1 年1 年试剂冰箱 10% 苯酚溶液室温1 年1 年药品柜 刘氏快速瑞氏染色液室温2 年6 个月药品柜 / 染色操作台 5.3 仪器: OLYMPUS光学显微镜,血细胞计数板。 6. 校准程序(计量学溯源性) 不适用 7. 质量控制,控制品使用水平和频率,允许限的纠正措施 不适用 8. 程序步骤 精品文档 . 8.1 一般性状检查: 轻轻混匀 CSF ,观察量
5、、颜色、有无凝块和透明度 (一般细胞数 300 /l 个时或蛋白增加可产生混浊) ,并记录。 8.2显微镜检查 8.2.1细胞计数(无凝块标本) (1)清或微混标本: a) 混匀后直接冲入计数池,计数四角四大方格内细胞总 数(包括 RBC,NUCL) 。 b) 用白细胞稀释液作1:1 稀释,计数有核细胞数 c) 红细胞数细胞总数有核细胞数 (当白细胞数 30 个/l 时,在白细胞计数池中直接分类至少50 个白细胞) (2)混浊及以上标本: a)稀释标本:于清洁试管中按上表进行稀释,用以计数细胞总数; b)溶解 RBC:于清洁试管中按上表进行稀释,用以计数有核细胞数; c)冲池;计数 d)红细胞
6、数 =细胞总数有核细胞数 8.2.2 有凝块或粘稠标本: (1)用吸管旋转并挤压凝块,挤出里面的液体及细胞。 (2)2000rpm 5min 离心,分离上清液和沉渣。 (3)混匀沉渣,涂片,用高倍镜观察NUCL、RBC。 (4)报告每高倍镜视野的红细胞和有核细胞数。 8.2.3 离心获取沉渣和上清液:将完成计数的CSF 离心,2000rpm 5min 离心,吸出上 清液于另一试管,并在试管上编号。 8.2.4 瑞氏染色:当 NUCL10 6/l 时进行操作。将沉渣混匀涂片,厚薄根据有核细 胞数而定,血性标本可考虑推片。待干后,瑞氏染色进行分类(分 100个 NUCL ) ;如见有不能分类细胞或
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