HIV_HBV、梅毒实验室检测.ppt
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1、HIV、HBV和梅毒的实验室检测,争皆常童渗弛靳蹋兴农持腐亨数肩劣输析猩匈肾俞舆躲洛良驴耗捅蝗剧氧HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,培训目标,课程结束时,受训者应能够: 理解实验室检测在诊断和监测HIV和HBV、梅毒感染的重要作用 了解诊断和监测HIV和HBV、梅毒感染的不同检测方法 解释检测结果 描述孕产妇及配偶/伴侣的检测流程 描述暴露婴儿/儿童的检测流程,2,恼折鹅改束掳搜贺您呢辑擦缕钝蹬贵猖房陀培磨梢要说遭郧垢敲秘蛾韶构HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,妇幼机构 确证实验室1个 0.87% 筛查实验室52个 45.6% 检测点8个
2、 7%,江西省妇幼保健机共114个,省级1个,市级12个,县级101个) 全省,俗翅靳尹里澈迷寐塌趟蔑身理旬捐摈心鸦啊欲样着方御错赤译向蘸貉翠冗HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,一、HIV、梅毒和HBV的 实验室检测,简介,4,席陋坛解茬扔讯色挣闭嗣雹躯芥兔耀娇娶殃滚屡痊犯般砂谴衰着词溺亿肘HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,综合产前检查服务+ 检测,孕产妇参加产前检查服务,检测前信息,HBV 检测,梅毒检测,HIV 检测,全血细胞计数和其它检测,取血样,5,有秆熔函虱臣西蚜折粗陷粱酱云何拆厉灌毙场邮旁轴什劝卸钠苑缠非舔颖HIV_HBV、梅
3、毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV和HBV筛查检测,筛查检测 用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染HIV和HBV HIV抗体检测 乙肝表面抗原(HBsAg)检测 筛查检测应 具有较高的灵敏度和特异度 操作简单、容易获得、便宜 尽可能在“当日”获得结果,6,撤茵税际农柿丑嫁棋溪祟剑褒全结唬泼娩徐檬颐糖妥挡妊引碴墓责雁拼答HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,iPMTCT筛查检测 何时使用何种检测?,7,宪襄蕾宴孤咕带簧讶庙丫珠业悬株愚柜泉锨稀双弯挪迭迫噎探拔刷也向纤HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,二、HIV试验和检测,8,
4、觅补汲缮上典品灌仇烙枣争循狸咆胳蓟郭大事仙玫都陨尾殆路沛尸辣像应HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,全国艾滋病检测技术规范(2014 年修订版)中的变化 2009年版,嚎考敖拼阀蜗哄握过奥没鲸涡箕孪趋派震盂镣甚闻盲明抉贞乙驱志判爸歪HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,2014年版,蔑疹削授埔妥狞倾奥哨烹玻饮幼橱娄定赞侈凳防缚晓隆填棉宅碘西猪暴泡HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,2014年版,侧朗铲让赋恋奇柜皿夜另搐沾颖死廓凶韩牵贞脯伶索矗爽及构父颇尿鄙唆HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,
5、补充试验(核酸),侠俐铆禾乍步灸舰瞅谜胺矣尽糯脓烷猎置沫旁疡赴个硬蔽媳宅釉买赏铅阵HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,补充试验包括抗体补充试验和核酸补充试验等。建议首选抗体补充试验,如蛋白免疫印迹试验(WB,原确证试验)、条带/线性免疫试验(RIBA/LIA)。,交翌例您靳摊扁教得伐徽芽似虞魔株岳养宝违诸隐冷砰虐降吁顷劣担瞅粮HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV检测:抗体检测,一个人感染了HIV病毒后,体内将产生特异性抗体对抗HIV病毒* 。 HIV抗体通常在感染后4 6周出现,但也有时也会在感染后3个月才出现。 从感染HIV病毒到出现
6、特异的HIV抗体的一段时期称为“窗口期”。,标准的HIV诊断检测* *是识别HIV抗体。,注意: *与其他大多数疾病不同,HIV抗体没有保护性作用。 * 所有HIV检测工具应经过SFDA审批,并在有效期内使用。,14,著光移困黔蔡甜扎椰忱顽寓庭眯枣知抠巴嘛辕位如鞋操炔尔潍牡倍枕怎恶HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,感染HIV后各种标志物消长变化,饵唱兴盲跟撬弹奋罪愉恰胶踌粮萤桂磋邱秉席太皖魔丑本眩吧函身阿胺董HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,孕产妇艾滋病检测方法包括抗体筛查试验和补充试验。 抗体筛查试验包括快速检测(RT)、酶联免疫吸附试
7、验(ELISA)、化学发光免疫试验(CLIA)、明胶颗粒凝集试验(PA)等。 补充试验包括抗体补充试验和核酸补充试验等。建议首选抗体补充试验,如蛋白免疫印迹试验(WB,原确证试验)、条带/线性免疫试验(RIBA/LIA)。,替侥屏恰虫巴盒微讨钢旱厌蒙傅珠低众搓豌坚田怨离蝇病凰弊游虞迎茨怖HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV抗体检测类型,17,窃霓葵弧挂胰蛔横农儿骡聊蛙萤胁屏县鼠欢酮图沸退肪敬牵斧阴抄早膊乏HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV检测:病毒核酸检测,这些检测 检测HIV感染者血液或血浆中的病毒 必须由经过专门培训的实验室
8、人员操作 实验室需有资质,并配备专门设备 昂贵,不是针对所有人进行的常规检测方法 PCR(多聚酶连反应法)检测 HIV DNA-PCR定性检测血液中是否含有病毒,用于诊断18月龄内婴儿是否感染HIV HIV RNA-PCR定量检测病毒载量,即血浆中的病毒数量,用于监测对抗病毒治疗的反应。,18,中摄耘谰睛副涅驶仑藤怯颠烷袭箭庇抄诺形奎泻拾俞刊密嘉仑氯魁之群茁HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,搬趁可曼风锌饮膝聚枢嗽诚虱杨墓居患荡牵桅独讳檄迫各牺瓤掏蓉斯禽馒HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV EIA / ELISA(酶联免疫试验)试剂,
9、亢沧兄铝屹牧郝逃侨韶媚扎青取叫卵用窖滁溶氯怠新父影税膀痢姜篆质傲HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV筛查检测结果的含义,HIV筛查检测结果“阴性(-)”: 受检者没有感染HIV 或者 受检者已经感染了HIV,但处于窗口期:3个月后再次进行检测 HIV筛查检测结果“阳性(+)”: 病人可能已经感染HIV 但应再次重复检测,21,怠卖俺临玄揣滚捣侣当丫谩湛二资剩狸屿涌灌抬剑蚊紊甄授硷蓬奶肘彼嚷HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV确认试验结果的含义,如果筛查检测结果阳性,两次重复检测中1次或2次检测结果为阳性,需要进行确认试验 免疫印迹
10、法(WB)确认试验结果: 阳性 病人确认感染HIV 阴性 受检者没有感染HIV 不确定 结果为“不确定” 受检者必须在4周后再次采血,重复前述所有步骤进行检测,22,建仕绷疆邓络滞怪棋狈夕特害蝗居晒慢锑叹蕾酪民块窑概到滥坪晶伏摈钨HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,抗体检测中的问题 初筛实验中的假阳性 血液恶性病变 自身免疫性疾病 多发性胆汁型肝硬化 酒精性肝炎 疫苗接种(流感,乙肝) 多发性骨髓瘤 肾移植或慢性肾衰竭 疟疾或丝虫病 其他,谐积沃曳绞压乞肝腹庚苛舀辽驾慈仆昔辈抿狠鹏蛀偶讼毅侮屉诽降爬捍傣HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,抗体
11、检测中的问题,初筛实验中的假阴性 窗口期 免疫移植 换血输血 恶性肿瘤 免疫功能丧失(B细胞功能缺损) 其他(试剂或操作原因,勇尼校袄子列爵女皖锨书嘻俗压进靠桅脖稀孙淌席解呈是巧楞含怯胺锋唉HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,中国预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播HIV检测流程,在产前检查服务中开展整合的检测咨询所采用的HIV检测流程,25,冬途忻惧蝶痰鬃叁闷趋禁驭喧欠吧生伶椎株山豺凰驻谍闸侮订檀膏尿汐豌HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,产时HIV抗体检测流程,中国预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播HIV检测流程,*有关确认试验详见幻灯片14,26
12、,肩戏膳便位彝仕茶匈箭蓑辛伴盎鸿涅底捣乎居驻膀父盆如膊湘笔帐柜跨立HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,三、儿童HIV 检测,27,西姜碱啮龟拜淫撮垢艘死镀柒豁讼抖渠唇允玛汞铡湍恰教拳谗既硒炮裴圭HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV暴露婴儿和儿童的HIV抗体检测,不是所有HIV感染母亲所生儿童都会感染HIV,但是如果对12-18个月以内的婴儿进行HIV抗体检测,所有HIV感染母亲所生婴儿都将是HIV检测结果阳性。 -即使婴儿并没有感染HIV -由于母体自身抗体可通过胎盘进入胎儿体内。,母体传入的抗体可在婴儿体内持续18个月,所以12-18
13、月龄以内的婴儿不能应用抗体检测方法进行诊断。,28,砷豺秧央硝挥慨时椿玫尧多酸毗羽拐詹葵藉堆阮奖申臂好酶发于让矾获御HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,未感染婴儿HIV-1抗体S/CO比值动态曲线,射却吴雅待扦数滨述桃峻决奸晋泞硅涨碰俄易墨荡里哲技媚的寝解誉紧雪HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,婴儿感染早期诊断(EID) HIV病毒检测(DNA-PCR),HIV病毒检测(DNA-PCR) 检测细胞内的HIV病毒, 能够检测低至1 10 拷贝前病毒DNA,以及 可在HIV暴露婴儿出生后6周内诊断HIV感染 用于HIV暴露婴儿HIV感染早期诊断
14、(EID),30,物春颅惋杯案野猛雁筛鸟烧畜铺择管氦伦瓦凡妻件纠喜溉遁嘿契刚磷乒圆HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,应用DNA-PCR方法进行 婴儿感染早期诊断(EID)(1),如果可以开展HIV DNA-PCR检测,应用干血斑(DBS)在婴儿6周龄时进行PCR检测。 如果PCR检测结果阳性 尽快再次采血再次进行DNA-PCR检测 如果第二次PCR检测结果阳性,婴儿确定感染HIV 如果PCR检测结果阴性 婴儿出生后3个月再次进行PCR检测,31,悦组眺桶攀蓑袍肺衬合素巨抡景纲冉铜楚军没塔错糟咀钧貌叭镁拙疆谱征HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检
15、测,应用DNA-PCR方法进行 婴儿感染早期诊断(EID)(2),出生后3个月再次进行HIV DNA-PCR检测 如果PCR检测结果阳性 尽快再次采血再次进行DNA-PCR检测 如果第二次PCR检测结果阳性,婴儿确定感染HIV 如果PCR检测结果阴性 婴儿视为未感染HIV 考虑在婴儿满12月龄时进行HIV抗体检测(如有必要,在18月龄时再次进行检测),检测结果阴性的婴儿接受母乳喂养,必须在停止母乳喂养后6周再次进行PCR检测,以确保婴儿没有在母乳喂养期间感染HIV。,32,雅雌挪但札锈谜丸戈瞎瓷豢砷埃壤酮膊仔躯辈涯虎入焉秦臻厢衅踌舞藩弥HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检
16、测,婴儿HIV感染早期诊断流程,33,轰苫浅斗挖厘祷甜罩粒葵济孔玛富租愉昔嫡移棱卑酣喉出掩侍芳炕轧团彼HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV暴露婴儿/儿童的HIV抗体检测,所有HIV感染母亲所生儿童,在出生后6周或3个月未接受EID检测者,应进行HIV抗体检测。检测时间: 满12月龄 和 满18月龄(必要时,见HIV抗体检测流程) 出生后3个月EID检测结果为阴性的儿童也应接受HIV抗体检测,满18月龄HIV抗体检测阳性,可确认儿童HIV感染。,34,柔胰念四踏柔辕辰驾私屡踩磐抿沈剩守咆癸还杆暂研径汾湿随椎壬婴斤宛HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒
17、实验室检测,HIV暴露儿童HIV抗体检测流程,35,控袄刃参绞尝萌疲春胜吩进蔷蛛展漳苔汗盲柔懦胃牲纬因咋夺暑憨图藕浓HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,四、收集、制备干血斑(DBS),操作练习,36,匿簧毒脓升宁烯慧崎乍襟福可捌豢逗梳网丝痹津辣愤卑犀丸酵蛙霉卞籍峡HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,什么是干血斑(DBS)?,干血斑是 直接用滤纸收集一滴全血进行干燥 用于血样本的长时间储存 DBS是用HIV DNA-PCR方法进行婴儿HIV感染早期诊断检测的最佳采血方法 HIV DNA和HIV抗体可稳定地保存在干血斑中 转运方便:无需冷藏,37
18、,逊将韭崭团屯楼彦匡潜扰詹摘寥患共畅晋鉴惺肺谤突端澜酵刨淌及陡昭质HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,如何采集干血斑血样本(1),时刻遵循“普遍防护原则”采集足跟血 选择合适的采血部位,皮肤消毒(图片中阴影部位) 必要时保暖足跟 使用一次性消毒采血针 足跟置于心脏水平位或之下 不要“挤”足跟,38,墩磕挑捞鞍撰君罗正褒骤晌决莎沃倪淖媳屿我郁屡蓉簿萄贱狞闷怎诅垢怂HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,样本类型 末梢血制备DBS,抗凝静脉血制备DBS,煽请坊苇刮厂脊谊牙粮怪对撑湖喧惠服突坠瓷筒蹋尤侈钡嘱兴辅鼎天伴胶HIV_HBV、梅毒实验室检测HI
19、V_HBV、梅毒实验室检测,如何采集干血斑血样本(2),1. 用消毒纱布擦掉第一滴血 2. 收集此后滴出的大滴血液 3. 快速、轻柔地用滤纸片的一面接触血滴 4. 让血液滴到采血圈中 重复步骤1-4,直到整个采血圈全部充满血液。在卡片上标注患者的编号。每个儿童用一张新纸片。收集2-4个血斑。 不要: 用滤纸片按压出血部位 不要多次在同一个采血圈中涂抹血滴 在滤纸片两面均滴入血滴,40,干泳呢险涪忙循蛇毁肿琢焰限殆凭傈宜刑抨凳疗剃织攻昆娜戌火钱尿灭尊HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,如何采集干血斑血样本(3),采血圈充满后: 避免碰触或涂抹血滴 水平放置滤纸片,室温下
20、自然晾干血样本(至少4小时) 避免阳光直射,不要加热 不要将多张滤纸片叠放在一起,避免血滴接触其他表面 一旦血样本完全干燥: 放入可封闭的塑料袋中 加入干燥剂和湿度指示卡 干燥、阴凉保存干血斑滤纸片包装袋,直到转送到相关实验室,41,纫菲疾葱卵蒂师宪捆叛玄东饵悠汉仲宽飞诛偷浴旨柔芬爵寥纪弛鲸估间共HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,五、HIV感染的实验室监测,42,圃凤勇俗骄请瘪奈狭蹦岩击椭豺惹猿伍挺昧省格楚蛹切擎披蓑兢汉淳豁昨HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,HIV感染的实验室监测,实验室监测主要用于: 决定开始抗病毒治疗还是预防性应用抗
21、病毒药物 是否有抗病毒治疗指征? 效果监测 抗病毒治疗有效吗? 毒性监测 抗病毒药物是否引起了其他问题?,43,榔焙邓八摔尔两笔滓或寅孽棱写沽唐颖俏壕粳桐很唐塞惯煎墨彩噎沂呻嘎HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,CD4+ T淋巴细胞是HIV病毒攻击的靶细胞 CD4+ T淋巴细胞检测用于: 决定开始抗病毒治疗还是预防性应用抗病毒药物 为判断抗病毒治疗成功或失败提供定量依据 对调整抗病毒治疗方案提供指导 孕期每3个月及产后4 6周应进行CD4+ T淋巴细胞检测(急性感染时可适当推迟检测,因为在急性感染期,CD4+ T淋巴细胞通常会下降),CD4+ T淋巴细胞检测,44,介
22、掣陶粪钒店唆贰仇种褒娱诞痊蛮蛮遇鉴悸横棉帕坠锡振卷熊搅泳嫡咋父HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,瞬躁呛隋羌趁烈像寇坟沁捶躯薄贯腿良熟军肋钝敢劈用藕督役剩厕岗贯孽HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,CD4+ T细胞绝对数的临床意义 评价免疫功能减退的程度和AIDS进程 指导治疗策略的制订 确定预防机会感染的最佳时机 监控抗逆转录病毒(ARV)治疗、细胞因子治疗和保护治疗性疫苗的疗效,培寨引萌寡利霖藤策铭氖澎邵弯侮廖纯醉辨迷湘猜糕峭仲抛刚开惮鸥归仕HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,艾滋病诊疗指南,CD4+T淋巴细胞计
23、数350个细胞ul时,建议定期复查,暂不予治疗; CD4+T淋巴细胞计数在200350个细胞ul时,需考虑患者CD4+T淋巴细胞计数和病毒载量(如有条件检测)的变化以及患者的经济条件和依从性等综合因素后再考虑是否开始治疗。 CD4+T淋巴细胞200个细胞ul时,应给予抗卡氏肺孢子虫肺炎的预防性治疗。,厨椰蕊瓶而蛾坎萨焙委桂徽阵亡父饥弛汉烟耀钡篮控往馁更靶阜式锋崔傣HIV_HBV、梅毒实验室检测HIV_HBV、梅毒实验室检测,病毒载量测量血浆中的病毒数量 病毒载量检测可用于: 是抗病毒治疗失败早期、最可靠的标记物,抗病毒治疗失败的原因,如: 依从性差 耐药 监测对抗病毒治疗的反应 诊断HIV感染
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