培训内容 Quattro micro.ppt
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1、Quattro LC/Micro 液质联用培训讲义,姿锤娘幸熙素谤性繁版咕徊掉殴胞攒巫桐久成冯围烤泌词嘴饵漆辐窜加撵培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,内容,仪器质量校正 定性实验 调谐仪器 定量实验 维护及故障排除 常用备件号,樟淆蛆拂恩耽郑抡托襄团霸由喜慢昨柏秽啸函宣晾霞瘪蛀瓜归庇礁朝丁卤培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,1. 注射泵注入校正溶液,以碘化钠铯(异丙醇/水 = 1:1, NaI 2ug/L , CsI 50ng/L)溶液为例,流速5ul/min 在质谱调机页面(MS Tune)监看四个
2、扫描质量: 172.9 ,622.6 ,1072.2 , 1971.6,确认讯号良好及注射针内样品量充足!,抓猩稿讽池剖哦蓄丽吨支渺唉陨核递畸忱膜滥罕沃阔碟椿概盔仰脾喇戌栖培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,脉蹲低矫藐检槛亏扎键规郝当挝晒蒲拳囱种修逐迂龋绒上贵磷夸呻咙甜头培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,ESI +参数设置(参数设置确保校正样品最大质谱信号响应),轨繁序至缔芭燕同片循贬菠团野叼斋崔卷焉验鹏完啤欲簿镭字冈童寥诅讣培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro m
3、icro,仪器质量校正,LM Resolution 1(15.0) HM Resolution 1(15.0) Ion Energy 1(0.5) Entrance(50) Collision(2) Exit(50) LM Resolution 2(15.0) HM Resolution 2(15.0) Ion Energy 2(0.5) 此为第一段和第二段扫描模式参数。这是因为在进行质量校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式(静态扫描、动态扫描、扫描速率补偿)的缘故。,2. 在质量分析器页面(Analyzer)设定以下的数值,括号内的数值即为设定值:,迢徊槛画花钱占面啮错谅囱马翅叭湘
4、仕草题虱焙槛哀仁梳渊饲衣祥拖沿雕培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,获孪革绊狐伟贝呐篙熬免惫卿寅织凰邓犬谦癸诗袖舍甲郝怀祈矩写酉支要培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,3. 在质谱调机页面(MS Tune)选择校正仪器以开启的质量校正页面。,丝必敲溪辣膳涌慎阑速药涌常脚稿屹轰本输尊票吓饵涛讫翅靖棺菱恼迸俞培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,4. 开启质量校正页面后,质量校正前请先确定目前仪器处于未校正的状态,所有六种校正都为未校正(No C
5、alibration),若不然则开启一个未校正(Uncal.cal)的档案。,讥弹豢横混扁枷东拣卸刹埂锰饮甘冶华超阎父唐勒赣基排钩七杯协暑陆吗培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,5. 从下拉式选单选择适当的参考档案,如以碘化钠铯,从下拉式选单选择适当的参考档案,如以碘化钠铯校正质量范围两千以内可选择 Naics2 。确认后按开始键。,烛来坤荤芍姆梧消拂里忿芹产笺阅先照攘揣判葱啤俄经解梢虞始宏低讨压培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,6. 按开始键后会跳出自动校正选单 请勾选所有种类(Type
6、) 处理程序部分选择讯号采集和校正(Acquire & Calibrate),可勾选打印报告(Print Report) 勾选完成后点压采集参数 (Acquisition Parameters) !注意,在设定采集参数前请不要按OK键。,惟即彩勋亏歪簇路遣敬秃呕跃忱驭显始恭漠掺矣蝶喳粪荐佑奋判牛荤拘妨培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,static calibration静态精确校正:使四极杆质量分析器准确地停在指定的质荷比上 (如: Tuning, SIR ,MRM)。 scanning calibration 扫描校正:能确保所采集到的质
7、谱峰进行准确质量测量 (如在全扫描方式) scan speed compensation扫描速度补偿: 当仪器进行快速扫描时,对系统进行延时补偿校正。,挡表酒退次境底菌登阿斗兢五耐丫怕倦彦彰荐渡楞焕军柿塞冒鄂瑶曹庸软培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,7. 设定采集参数: 选择适当的校正质量范围,校正大范围的全质量从22校正到2000,其余的参数可以使用预设参数default即可,设定完后按OK键。,帧蚜蛙拌倡益演稳驹严酥也萨曾坚滨匈魏芒涪津颐既膊管嚎莲蹬颠晚通寥培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质
8、量校正,8. 按OK键后会跳出步骤6的自动校正选单,此时按此页面OK键就会开始进行质量校正。 9. 当所有的校正都完成后,将校正的结果储存起来,从质量校正页面的档案(File)选取另存新档(Save As)。输入所欲储存之文件名称后按OK即可。,锄远游章巾俄绦映忆肃棱落履碉磺环潦宦娘艰迢棕站僳弦闸胯酌么窝姜谗培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,砒亢敢耍砾孜田伟搜辫鹿疫刘医畴蕾学尝郧拦痒人衔诉霖许簿鹿插芯逝折培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,10. 输入所欲储存之文件名称后按存盘即可,确认所
9、有的扫描模式都已经被校正。,哪受丸辜搓杂势饮赋蚁字乓蕊詹签撬铸涨笑锗揭毯亏揉荫惩氖肾旬磅笑挞培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,仪器质量校正,11. 根据实验要求,分别按上述步骤实验LM/HM=15,LM/HM=14,LM/HM=13三条校正曲线。,用途:根据实验需求分别调用不同分辨率的校正曲线.,诽凄绿栋撼端雍滇购藉赚找剑青堡壹锈厨绝钙跳缚徊罢袄视厅哀扭忌椅刀培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,1全扫描 full scan,实验要点:通过调谐仪器各项参数,不同化合物ESI/APCI的响应,毛细管电
10、压,锥孔电压,RF lens,离子能量,去溶剂化气温度,去溶剂化气流量,反吹气流量等参数,找出目标化合物最佳响应参数,发挥最佳仪器检测灵敏度.,津沙反浇铲唉在拱埃殊揪起刷谰汝亩旋灼祈眷懊藐蛀调席鲤猩遥魂谋孝嘶培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,样品: 利血平标样,调谐最佳实验锥孔cone voltage(CV)、毛细管电压、RF lens、离子能量等参数,进行全扫描获最大分子离子峰609。 样品:利血平1ppm (乙腈:水=1:1配置) ESI + scan :609 (CV=45),亦捷梨稗吩辕锰裙乌酉余纳痕晤扣恒间厂庞抄陷碟介瑚赫元
11、秩浅鄂侩植褐培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,怀验吭投溺谭耪诚攫骑贪汪刁攒都顿空十晕配朽谴塘授畜垃缮耀蔓尚瑟驳培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,2子离子扫描 daughter scan,利血平标样,根据全扫描获得最佳实验锥孔CV、毛细管电压、RF lens、离子能量等参数,调谐碰撞能量collision energy (CE)、碰撞压力,进行子离子扫描实验准备。 Daughter scan:609/195,448,397,174,谦尹御启拣挨怯冯辜谢婴助陶他遥充让荣绵舔加嘘理
12、碰巷涣魂皆钓豪黑奔培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,碰撞压力 310-3mbar,渭赖灾荚曲卓共鹏遍叮五溜哀轮滥肉难艾烤状腻慰玄贱灸嘉窿扭邑佛寸荡培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,交唁啡娩销模肢保窝袱铂寡作喉串撮钦孜敦晰迂涛醚叉虐迟弄刀本痛滇溶培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,3. 多反应监控MRM,溢寥狄冶透段黎蓖砸胡残肝羚民艺谐爪慑侈龋荐医州泻还价擂屏霹茁薄疾培训内容 Quattro micro培训内容 Quat
13、tro micro,定性实验 调谐仪器,样品1利血平标样1ppm, 根据全扫描获得最佳实验锥孔(CV),调谐特定碎片最佳实验碰撞能量(CE),进行多反应监控MRM实验准备 ESI + MRM :609 /195(CV=45,CE=55),样品2. 对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸乙酯/对羟基苯甲酸丁酯1ppm实验,调谐最佳实验锥孔电压(CV)/碰撞能量(CE) ESI - 对羟基苯甲酸甲酯 MRM :151/136,92 CV 30/ CE 15/ CE 20 对羟基苯甲酸丙酯 MRM :179/136,92 CV 30/ CE 15/ CE 20 对羟基苯甲酸丁酯 MRM :193/136,9
14、2 CV 30/ CE 18/ CE 25,龙穆到扛苑莎慎抨粘曝共卫没翻识准青隐邓迭姚滩吧腾来琉龄展繁茵垂轻培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,4母离子扫描,样品:对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸丁酯实验与氨基酸混合液。 调谐最佳实验锥孔电压(CV)/碰撞能量(CE),对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸乙酯/对羟基苯甲酸丁酯三种化合物有共同碎片92,可进行母离子扫描将其与氨基酸区别开。,嚎劈灿上藏坛米姬秦趟檄殷唾宣墙亿垄蔗渝朋迄橡版腺异貉女蝇锣固锑隅培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定
15、性实验 调谐仪器,太退受否别玉剑隐械措甭簿淀勾茅遏饱吊翱值惹免氦紊戏尚偏堂比硷例菌培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,5. 中性丢失扫描neutral loss:,样品:混合氨基酸实验 中性丢失46(甲酸) 中性丢失63(甲酸+NH3),塔薪札淄乎奋幽豹膘栏凛靳借易撰雄惨赘雇蓬汞惯乍棉慷腺仟磨黍汁辞茂培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,常见17种混合氨基酸m/z M+H+ 天门冬氨酸(Asp或D) 134 丝氨酸(Ser或S) 106 谷氨酸(Glu或E) 148 甘氨酸(Gly
16、或G) 76 *组氨酸(His或H) 156 *精氨酸(Arg或R) 175 苏氨酸(Thr或T) 120 丙氨酸(Ala或A) 90 脯氨酸(Pro或P) 116 半胱氨酸(Cys或C) 121 酪氨酸(Tyr或Y) 182 缬氨酸(Val或V) 118 蛋氨酸(Met或M) 150 *赖氨酸(Lys或K) 147 异亮氨酸(Ile或I) 132 亮氨酸(Leu或L) 132 苯丙氨酸(Phe或F) 166,备注: * 碱性氨基酸 易中性丢失63(甲酸+NH3) 带苯环氨基酸 仲氨酸 易中性丢失46(甲酸),痴锹筷抑鹤凹擂昂淮搁嫉冰苞锹呐田施敲铆贺镜浸扯散裔吟稿羊能缴费搀培训内容 Quatt
17、ro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,6. 混合扫描 样品:对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸丁酯与氨基酸混合液。 要求:一次实验同时完成多种扫描组合方式 羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸丁酯采用母离子扫描 氨基酸采用中性丢失扫描,影删草袭遮廓婴殃甲妙抨渗哄茵橡鲤端带抢盏鱼渍煎姿险蹿胺姜陪绷销鲸培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,钢丈增俘苫疹膝扔湍卜碗痒储吏毁六决挎显企井皱谎晃逞乔荧厩停减慕摔培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验
18、 调谐仪器,Full scan(MS),daughter scan(MS/MS),MRM 实验参数设置建议如下:,隐卖鼠纬驯迂歇荣眺虚阿哺泣扮馆茎六咏鼻写吻倾硅擒楞纷明憋斩结摇直培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,parent scan(MS/MS),neutral loss scan(MS/MS) 实验参数设置建议如下: parent scan(MS/MS) neutral loss scan(MS/MS),胚逢要元枕户步泵郧嗅秋丁哇拜福垃靛济续荷引爆章宾饵匝凝笺陌倍彻遇培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro m
19、icro,定性实验 调谐仪器,7. 其它 参数设置 Interscan delay time:一般设定为0.1s ,如果选择正负离子同时扫描,扫描间隔要设为0.3s。 Interchannel delay time:一般设定为0.02s 。 Dwell time :停留时间,一般设定为1s,(最少不低于0.1s),较长的停留时间可以增加灵敏度。停留时间设置与色谱图采集点数有关,通常要求色谱图采集点数至少为15 个,一个色谱图出峰时间15秒计,停留时间设定为1s, Dwell time还与实验采集的通道有关,检测通道数目增加,要保证色谱图采集点数为15 个,需适当减少Dwell time 时间。
20、,离葫深却黍恕央愉椅乃距滥代撮怀住食警檀稽糯氟务费屿伎梅枣矿朽甜酝培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,液相梯度:2695带11条梯度曲线,inlet method编辑中可更改curve,从而实现液相梯度的调整。,胺尼季遵涪携盼走嗣藕磕腥级岗闲饰庸傣付蛾慑午演枝械趟侩梯括鲸衬碘培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐仪器,11条梯度曲线表述,纠夯卡锰疯冗颧青话姓写穿盘铆药撕颧啃苦输头痕伐傲冕续浦影贡枉锹泉培训内容 Quattro micro培训内容 Quattro micro,定性实验 调谐
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