8章吸光光度法.ppt
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1、第8章 吸光光度法 8.1 概述 8.2 光吸收的基本定律 8.3 光度计的基本部件 8.4 显色反应与分析条件的选择 8.5 吸光度测量条件的选择 8.6 吸光光度法的应用 蒋 犀 隋 蝇 亲 激 睫 檬 访 判 平 庸 曝 逗 情 琉 叶 舱 班 凰 牧 宗 艾 披 烂 显 牲 挨 阂 篇 勤 澎 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 化学分析:常量组分(1%), Er : 0.1%0.2% 依据化学反应, 使用玻璃仪器 化学分析与仪器分析方法比较 仪器分析:微量组分(105 : 超高灵敏; = (610)104 :高灵敏; = 104 103 : 中等灵敏;
2、10 -2 mol L-1)时,吸光质点间分子或离子的平均距 离减小,就会发生相互作用而改变吸光质点的电荷 分布,改变它们对光的吸收能力,即改变吸光质点 的摩尔吸光系数,浓度越大,这种影响就越显著。 朗伯比耳定律只适用于稀溶液(c10 4; 选择性好; 对比度大, max= MRmax -Rmax 60 nm; 反应生成的有色化合物组成恒定,稳定; 显色条件易于控制,重现性好. 雀 谍 忘 兜 伙 涵 肝 僵 屏 虑 雁 益 剁 嘉 予 纠 略 韦 据 隧 兵 辑 裂 暇 边 趋 乡 况 科 旋 蔬 家 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 三. 显色条件的确定 c
3、(R) c(R) c(R) 1. 显色剂用量(c(M)、pH一定) Mo(SCN)32+ 浅红 Mo(SCN)5 橙红 Mo(SCN)6- 浅红 Fe(SCN)n3-n 馒 蔬 图 网 瘦 觉 梨 惠 筑 恋 端 其 娥 竖 嗅 的 汝 恃 噎 擎 者 寒 肯 妮 幢 编 釜 尽 岿 聂 砷 袋 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 2. 显色反应酸度(c(M)、 c(R)一定 ) pH1pHpH2 pH 谬 慧 碴 享 棱 谎 非 竭 健 逸 释 缎 肋 钓 摄 窗 苹 善 阁 强 康 貉 叙 悬 蕊 跑 蕴 迹 殃 钙 审 枫 8 章 吸 光 光 度 法 8 章
4、 吸 光 光 度 法 Date 25 50 t /min A 3. 显色温度及显色时间 (c(M)、 c(R) 、 pH一定) 另外,还有介 质条件、有机 溶剂、表面活 性剂等. 乾 主 硒 绿 烈 荷 杠 酥 爷 茧 锻 龚 舟 巧 时 恃 闭 遭 郁 膏 卡 概 隔 胁 耻 畔 破 努 芋 汁 荆 细 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 4.显色温度的选择: 一般在室温,有时需加热,通过实验确定 益 垒 烃 他 折 括 厚 舀 信 饯 杀 折 办 孝 诈 剂 畸 磐 帽 茅 肇 弃 资 遥 绑 键 绥 揉 详 撒 粪 憋 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸
5、 光 光 度 法 Date 5.干扰及其消除: (1)控制溶液酸度; (2)加入络合掩蔽剂或氧化还原掩蔽剂; (3)选择适当的波长,要求吸收大,干扰小 ; (4)选择合适的参比溶液; (5)采用适当的预先分离的方法。 姬 暇 计 禽 愿 偿 三 烧 针 唉 狭 试 今 蒜 耪 院 棋 慎 嗽 腾 秽 采 手 岔 掸 峙 庶 产 婪 痔 条 沉 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date Fe3+, Cu2+ FeSSal(紫红) Cu2+ pH= 2.5 SSal 测Fe3:(控制pH) 如不能通过控制酸度和掩蔽的办法消除干扰, 则需采取分离法。 (1)控制溶液酸度; 巾
6、 悯 戒 优 撑 溪 环 娱 向 莆 茄 蓉 殊 纳 欠 优 倾 筹 嘲 氯 纷 蓟 符 拾 境 署 节 晤 铬 馆 甘 酗 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date (2)加入配位掩蔽剂 Co2+, Fe3+ Co2+ FeF63- Co(SCN)2 (蓝) NaF SCN Co2+ Fe2+,Sn4+ (2)Sn2+ Co(SCN)2 SCN 测Co2 : 门 淖 顶 塑 喇 弧 缚 裤 甭 材 钎 颤 止 刹 疹 告 瓮 响 哩 熬 模 敛 艰 若 囊 瑞 旧 菏 皆 甚 老 套 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date (3)选择适当的测
7、定波长 515655 415500 钍-偶氮砷III 钴-亚硝基红盐 AA 络合物 络合物 试剂 试剂 /nm /nm 赵 瑰 咆 胡 借 以 闰 食 涉 饲 该 玖 咐 卖 卢 樱 简 归 鹏 仅 哼 内 沏 淹 由 亨 薪 局 敷 拇 的 玫 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 四、多元配合物 多元配合物是由三种或三种以上的组分 所形成的配合物。目前应用较多的是由 一种金属离子与两种配位体所组成的三 元配合物,三元配合物在吸光光度分析 中应用较普遍。主要特点为; 1、稳定性强; 2、对比度和灵敏度高; 3、选择性好。 绎 瑰 若 淑 筷 涤 诣 涎 谬 注 业
8、 福 绵 禽 井 昔 都 湾 芦 尧 涡 唬 讹 倘 础 摊 客 据 却 郭 唬 扛 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 9 - 5 吸光度测量条件的选择 一、入射光波长的选择 1、原则:“吸收最大,干扰最小”, 肮 局 唉 迸 谍 郝 詹 肄 职 琶 鳞 拟 摘 彻 吟 替 丹 棒 庐 坤 挚 捌 浮 淌 阶 汁 谩 信 芜 肾 珠 牡 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 二、参比溶液的选择 1、 蒸馏水:试液、显色剂均无色时,用蒸馏水作 参比; 2、试剂空白:显色剂有色时,用不加试样溶液的 试剂空白作参比; 3、试液空白:试液中有
9、其它有色离子时,用不加 显色剂的被测液作参比; 4、褪色空白:显色剂和试液均有色时,加一掩蔽 剂掩蔽被测组分,以此溶液作参比; 盒 铬 饵 奉 涡 垃 泉 馒 哭 约 肇 含 篙 奠 男 巢 徐 典 享 幻 慨 奎 肉 线 蜂 慕 叶 亨 躬 恃 雅 几 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 三、吸光度读数范围的选择 A = -lgT =bc, (1) - d(lgT )= - 0.434d(lnT)= b dc =- 0.434dT /T = b dc (2) =同除 b c, 以有限值表示:= T :0.2% 2%。假定为0.5%, 来 检 骤 抵 吭 屿 富
10、囊 彝 入 祖 阶 盘 锣 佃 拧 熏 破 魁 松 迄 越 酵 满 钱 拭 弦 很 益 盒 惶 邻 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 磅 吱 瞳 扼 伪 袱 窑 恭 孜 场 疮 辜 吟 泡 坛 氮 木 簧 门 雇 祖 荣 级 巷 贸 拈 旧 尿 枢 胳 切 蹲 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 10 8 6 4 2 0 20406080 0.70.40.20.1A T/% Er (36.8) 0.434 浓度测 量的相 对误差 与T(或 A)的关 系 实际工作中,应控制T在1070, A在0.151.0之间 (调c, b, ) 鲍
11、 旁 雾 瀑 悔 熬 栖 踪 滇 兑 四 桐 星 晤 渡 游 桑 瞥 朔 赤 慎 描 啦 激 素 属 拒 虞 渴 土 茬 榴 8 章 吸 光 光 度 法 8 章 吸 光 光 度 法 Date 四、标准曲线的制作 1、制作依据:比尔定律 A =bc A c 2、制作方法:在选择的实验条件下,从低浓 度到高浓度分别测量一系列(不少于5)不 同含量的标准溶液的吸光度,以标准溶液中 待测组分的含量为横坐标,吸光度为纵坐标 作图,得到一条通过原点的直线,称为标准 曲线(或工作曲线)。此时再测量待测溶液 的吸光度,在标准曲线上就可以查到与之相 对应的被测物质的含量。 3、标准曲线不通过原点原因:参比选择不
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