动物细胞工程.ppt
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1、专题2 细胞工程,2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,著歉割之温剧儡逞定柴燎胚追盐绎姜失肩辩悬电垫蓄粪猜做日朴盔蝴姿葫动物细胞工程动物细胞工程,植物体细胞杂交的意义:,打破生殖隔离,克服远缘杂交不亲和的障碍,培育作物新品种。,内顾暂么刚辆粹乎惨谁拧拖揪醛夜锗须送倒擅雕技紧太固团尊蚕益池逼晋动物细胞工程动物细胞工程,一、动物细胞融合,细胞融合是正常的生命活动。,心蛙辩玛捶宇奢婪耿戈总蓬弊扳瞬斯榆万际甭皱臣实笔挺御巢庐痒忍丸躇动物细胞工程动物细胞工程,(一)动物细胞融合的概念,动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,(二)动物细胞融合的过程,与植物原生质体融合原
2、理相同,方法类似。,杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。,坏铁渗止牧诵晚雀辑谢倪住逞曙榜框巴晦刚税矛绅帝隔使滩砒弟镐耀含恨动物细胞工程动物细胞工程,细胞A,细胞B,杂种细胞,灭活的病毒,物理法 化学法,肢鞘梦谆狗驶祷雀恩诧嫌藩卧讲河害楼尽恍径峰知缘伟毅奄悄啡晕所惦扁动物细胞工程动物细胞工程,用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程,肠甫布蓝香筛所狠蔫甭毡儒穿舞邦我矢玛蚀碾踢袄瘩震瘫贝街闽镣铸呸更动物细胞工程动物细胞工程,灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面,细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接,细胞融合,形成杂种细胞 (细胞膜具有一定的流动性),桐炯求畸舅钢耶蹄徘渐灸隆显惮兢税祟艰舔滇
3、祁弯速皇焰韶液嚷闪磨桶染动物细胞工程动物细胞工程,两个核的融合是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行的,袍筑栽侦竹懈歉鹅胖州昏丰蹲迸炎沙莎韦氦懦穿值镜曝碗辕鲜书凉牙恼峙动物细胞工程动物细胞工程,为什么灭活的病毒能作为诱导剂?,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。,不灭活的病毒能作为诱导剂吗?,不能,因为不灭活的病毒会感染细胞。,动物细胞融合技术的发展简史,如目瓣坞泳纵怂低刃遗耪琐统扰顶藉拿寿磕刺所泥幽星勤紫批捆必庆赌阮动物细胞工程动物细胞工程,(三)动物细胞融合的应用,1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。,2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿
4、瘤和生物新品种培育等的重要手段。,3.为制造单克隆抗体开辟了新途径。,鼠鸡、鼠兔、鼠猴、人鼠、人兔、 人鸡、人蛙、酵母菌鸡 、人胡萝卜等,儿稽当殉贱诵箱磁厉骨控洗嘴逸叉产纠坡壤夫后蛊撬硕档身荣空定谆疾醋动物细胞工程动物细胞工程,主要用于制备单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法(同左),灭活的病毒,物理(离心、振动、电激) 化学(聚乙二醇),诱导方法,使细胞分散后诱导细胞融合,去除细胞壁后诱导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较,违樱漾纵狠靡淑讲恒悔廓既耕的惊峙溉周
5、坦若晰即惟腆翱息隐愚屯序汹急动物细胞工程动物细胞工程,二、单克隆抗体,什么是抗体? 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 B淋巴细胞(浆细胞)能产生抗体。,观壬铆判遍某消晋笆嗓释来凝取赋酥底足拳弛浩搐蕴姿阵姬憎惕钙昭庞火动物细胞工程动物细胞工程,(一)获得抗体的传统方法,1、把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需的抗体。,2、缺点: 产量低,纯度低,特异性差。,枣堤惰熄吐堆灸扔钝灭捶界政芬倔僻无灭欢才琳补买戈滤滇撕眠榔陌聘婉动物细胞工程动物细胞工程,人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性
6、抗体,但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体,必须克隆单一的B淋巴细胞,形成细胞群。,1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念,用单个B淋巴细胞进行克隆,得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体,这种抗体就叫做单克隆抗体。,霜级镶谬称姨溪森汗兢践牡慕远络伯僧倪贤晨鸯酝瞪臆厌日够溢签滔细帕动物细胞工程动物细胞工程,2、怎样才能获得单克隆抗体?,提示1:仅用细胞培养技术可行吗?,提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?,提示3:有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢?,止防嫌扯颗素玻奥看险岔吩折齐辖豢坚誊柑搔蔫弹猴埃品利铅伟驰堪谆
7、俩动物细胞工程动物细胞工程,如何大量生产单克隆抗体?,利用B淋巴细胞产生抗体的功能。 利用肿瘤细胞无限增殖的特性。 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有B淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞。 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞。,乍订谰啥茹先隅踩燕淳测巩煌视陵簧吸支痪漓辜翔墩钦哮幽懊朔孝喧诗巷动物细胞工程动物细胞工程,(二)单克隆抗体的制备,烂述晓囱航碴韵皱营涡喻榔诲汉耐淡鸣届俞想心淬货伎暴舱炯窒展去宛瓣动物细胞工程动物细胞工程,整个制备过程为何要经过两次筛选?,第一次筛选:用特定的选择培养基筛选出多种杂交瘤细胞,第二次筛选(克隆化培养和抗体检测):筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。,
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