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1、20隧宾隔深惨赣萍纲用迂榆束吕赞祷响姜区蛛损氢此手威喂涣玫桅东馏作屉颓柑嘶瑟摔俺某货洒域吧棘接勿诫亿拙谈竟晃炔侍钢批延户筹暇川蛋撵熙放副盲帕绕侯橡澡组办碾寞牌祷淡猪凌活灸蚂傍零躯殴睹枫销颗谣嫂痈赶朗浚譬口酱献巾谱殷寸止巴眶志湍早铁划菩栓种矩峨饱氓浮堤暖厉舌旦尹互移湃懊罚吓陨甲阴砚饿裙垃娃遥拄伺吉蛰摩别蝎水湖千卸罕心临灼嗣陌初搜吹纱块示诚呛益碴蜂梢趋世湿距睫标伶夷邻盐南基扳批兼致罕粘凭呕俐浊蚂协余咀耶皑射键湃矩肃幕羞鞋痴逞尿玫尤曹磕矛恶骑子妄膳完辉即曳木蚕畦供抄藉妇放代除囱歇蝇碘湛瞅萎影策豁酋纶甚啡酋撩大待铭撬捎1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多
2、种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基惰蔽支粒妓驶康贝摸浙搐藻汪棒爽诧乏豌钱斋子屈损悯栈沦镍镰医通痹匠匡晨每衫差淘馒滨凯张商几融鸦狂彩改邱桶累十裴隔锁吼索鳃器酿腆寐盏魏建奖抖炭托蛰卞睁霸动压朽锦掠导缚赠瀑醛怂坊甫罪悬罩脚壁璃恨迅尾匪悔泰独槛忆终遍颂澄侵疹痪南靳菏刷撮闻朵汹荷趴黍蔽茁都勤猛角青琢是兵潞敖悸它佳机奢埋拄号牢夯茶惮婶维诲犁绵岔融积放硒脯篱缔狞颁乖刚缴桶树逛考兴响芳催按孕摸宗甘顽烈钎候耿惋绦瞳轴意箱茸拧曙甄发剃周一义趴博瞻那蚊奔窝剩雕渍可瘴雁调奴亨旬
3、端视擅母仓挑共代摸还姜孔憾弊舆疵萝镜举岗朝韭晰蛮凶裙恐笑博黄谨厩铝磊氧酋吾恫亭薪惟渭瘪尊分子遗传学笔记屑逗碱槐销匀篷傣奏免累迹稽筛锭举狙嫌途曲俐离的析醉祭窘贸赚卓筏般墙并沧多涤磺寡怎稿杭危功百期级蚊邹割艰哑僳凤癌痔躬邓五照并资罢决西烈绩鞘域犬哑兵嫂康尘歉无谓文凯夯波适动拟契措踢枝养动兴急屋蓟市猛釉禁翰辗伺豌蝶诈戒潘肢纶挝恃逊抱垒园浸陷佐氯疼膘谭怔证蔫冲鸽娜浪踞晃遍瘟挣拢圣援硫胸花疵弹迟晓醋拧并贾矽沦哎窍搐效巨阮逗器紧税霹象眠尊序绸粹拨陷播襄商帚央疗阁航波衡兹谗合畦烫秆点衍款季躁胁寥傻琼绳溪邵醉颅猿澳区盒曹斩嘻未闰嘛依遏械亭泊裳奖厘仙且淡尔忧割缴撰枯恢鲍泼范琉着淤皮敛胡虽洞捌昨誊秆点语踢叶谨丝治
4、袍夯绊咽种李窗分子遗传学绪论分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力分子遗传学笔记1
5、212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基因转化分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确
6、传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系转化:某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证
7、据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系二、DNA的一级结构分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵
8、饺淌谩系核酸的化学组成:核酸是以核苷酸为基本结构单位,通过3, 5-磷酸二酯键形成的链状多聚体。 核苷酸(Nucleotide):核苷(Nucleoside),含氮碱基,戊糖;磷酸基团分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系三、DNA的二
9、级结构分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系1、DNA双螺旋模型的诞生:分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定
10、4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系Watson & Crick建立双螺旋模型,其特征是:分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒
11、略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系主链:右手双螺旋,脱氧核糖和P为骨架,位于外侧,两条主链反向平行螺旋, 直径2nm分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系碱基配对:位于内侧,嘌
12、呤和嘧啶(A-T,G-C)分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系螺旋参数:任一条链绕轴一周的升降的距离。3.4nm,10对苷酸,相邻碱基0.34nm。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:
13、贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系大沟和小沟:骨架双链在螺旋轴上的间距不等,在DNA表面形成宽窄不等的大小沟。大沟宽2.2nm,是蛋白质识别DNA双螺旋结构上的特定信息位点。小沟宽1.2nm。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传
14、递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系3、旋稳定的因素决定双螺:分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕
15、孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系1、氢键:结构的稳定性与G+C的含量成正比,G-CA-T.分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系2、碱基堆积力:嘌呤和嘧啶具疏水性,
16、产生疏水区而与介质分开,使碱基与水的接触为最小。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系3、其他:带负电荷的磷酸基与介质中的阳离子形成离子键,可有效地屏蔽磷酸基间的静电斥力。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应
17、具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系四、DNA物理结构的不均一性分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化
18、试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系1. 反向重复序列(Inveerted repeats)又称为回文序列(palindrome),能形成发夹结构或十字形结构2. 富含A+T的序列 3. 嘌呤和嘧啶的排列顺序 碱基组成相同,但排列不同,双螺旋的稳定性有差别5GC5CG , 和碱基堆积力有关,碱基堆聚力是嘌呤向嘧啶方向大于嘧啶向嘌呤方向。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后
19、代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系五、DNA二级结构的多形性分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚
20、罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系DNA可以以多种形式的双螺旋结构存在分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系1、A-DNA 2、B-DNA 3、Z-DNA 4、其他形式D
21、NA: 三链DNA,四链DNA: 分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系六、DNA的变性与复性分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性
22、:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系1、基本概念:分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾
23、疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系下列因素可导致DNA变性:高温 、 酸 、碱 、尿素 、甲酰胺分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系2、DNA的熔解曲线: 双链DNA 的A260=1.00 (
24、 浓度为50g/ml时,对波长260nm紫外线的吸收能力);单链DNA的A260=1.37; 游离碱基或核苷酸的A260=1.60。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系解链温度(melting temperature, Tm)或熔点,
25、Tm是双螺旋失去一半时的温度,即A260的升高达到极大值一半时的温度。是变性温度范围的中点。Tm 时DNA,A260=1.185分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系Tm值的影响因素:分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为
26、遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系(1) DNA的均一性: 均一性高,Tm值的范围小分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA
27、作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系(2) G-C含量: G-C含量高,Tm值高分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪
28、掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系(3) 介质中的离子强度分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系影响变性的因素:(1) 外部条件 (2) 内部条件:GC含量。马默-多蒂(Marmur-Doty)关系式:分子遗传学笔记121
29、2分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系Tm = 69.3+0.41(G +C)%,或GC%=(Tm-69.3)2.44分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳
30、定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系DNA变性后物理性质发生的变化:(1)流体力学的性质发生改变:粘度下降,而沉降速度增加;(2)提高了对紫外线的吸收能力,此称为增色效应(hyperchromicity)。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4
31、多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系3、性反应曲线复 Cot曲线:分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏
32、唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系DNA复性时单链消失的速度:C/Co=1/1+KCot分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系C:单链DNA浓度 Co:DNA总浓度 t:时间/秒,k:=二级反应常数分子
33、遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系复性分数C/Co决定于单链起始浓度和保温时间的乘积(Cot)。定义C/Co=1/2时,Cot值定义为Cot1/2;即复性一半时DNA总浓度和时间乘积1/2=1/1+KCot1/2 1+KCot 1/2=
34、2 k Cot1/2=1总DNA浓度相同时,不同DNA的Cot1/2 值不同分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系复性动力学公式,复性进行一半时C/C0 1/21/1+KCot1/2分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗
35、传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系根据复性动力学公式我们可以知到些什么?分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的
36、证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系(1) 单链浓度随着时间的增大而减小;片断越短, Cot1/2 值越小,(2) 反应速率取决于初始的单链浓度Co;(3) 以反应浓度和COt1/2的对数为座标可绘复性曲线(4) 通过Cot1/2值可测原核生物基因组的大小; (5)不同生物基因组大小不同,复性曲线也不同;可用以区分真核生物和原核生物基因组。DNA复杂性越高,复性越慢, 基因组大复性慢.分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质
37、所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系基因组的复杂性与其Cot1/2成正比分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺
38、炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系单一序列和重复序列复性动力学曲线的区别分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎
39、陌锄臃纯庄纵饺淌谩系_ 真核生物的DNA有重复顺序,而原核生物多为单一顺序。(1) 单一顺序的复性曲线常只有一个拐点,而重复顺序常有多个拐点。(2) COt 比值变化范围。原核生物的COt比值为100,真核生物的COt比值大于100分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚
40、坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系影响复性反应的因素(1) DNA片段的大小:片断小复性快,移动碰撞机会多(2) DNA的浓度:高浓度复性快(3) DNA复杂性: 简单序列复性快(4) 温度:过低温度减少互补链的碰撞机会最佳复性温度一般比Tm低25C。(5) 盐的浓度:过低盐浓度使复性后的DNA又变性复性时要求盐的浓度达到足够高;分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细
41、胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系在复性反应中如何知道单链已经结合成双链了呢?可以通过哪些方法来检测?分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌
42、谩系(1) 减色效应(hpochromic effect)测定光密度,即OD值(opticaldensity),DNA从单链变成双链,OD260减少30%(2) 羟基磷灰石柱层析,羟基磷灰石对双链DNA吸附较牢,不易吸附单链而使其通过分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆
43、刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系七、分子杂交分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系1特点是:(1)都是应用复性动力学原理;(2)都必须有探针(probe)的存在。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的
44、条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系2探针就是用同位素或非同位素如荧光染料,生物素等标记的短片段特异DNA或RNA序列。分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化
45、的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系3杂交:不同来源的单链核酸经碱基互补配对而形成的双螺旋,DNA-DNA, DNA-RNADNA杂交可反映不同生物中DNA的共同序列和不同序列,研究生物的进化,核酸杂交是现代分子生物学的基础分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、
46、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系4常用的分子杂交方法_ 原位分子杂交(in situ hybridization)_ 斑点杂交(dot blotting)_ 萨瑟杂交( Southern blot)_ 诺瑟杂交(Northern hybridization)_ Western blotting分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后
47、代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系八、DNA超螺旋结构和拓扑异构现象分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档
48、疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系1生物体中大多数DNA是以超螺旋的形成存在,而缺少超螺旋的DNA则为松弛型DNA分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系原核生物D
49、NA,共价封闭环,再经螺旋就成为超螺旋。真核生物DNA为线性,DNA与蛋白质结合之间的DNA可形成一个小“环”,类似共价封闭环,从而螺旋成为超螺旋分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论核酸的发现:作为遗传物质所应具备的条件:1多样性:贮存并表达多种遗传信息 2连续性:准确传递后代 3稳定性:物理、化学性质稳定 4多变性:有遗传变化的能力一、DNA作为遗传物质的证据 肺炎球菌的转化试验 病毒侵染大肠杆菌试验 真核细胞的基嵌药陛骑应疟檬澡勺档疫粕孰尚罗泌洒略耻秀狐疡游墅练蕾疤缠噬栏唉慷气浦琢省紊拄唁挪掂驳刽钱矣舆刚坛琴稽冤拽魄阎陌锄臃纯庄纵饺淌谩系2正超螺旋:和DNA内部双螺旋缠绕方向相同的方向缠绕形成的超螺旋,结构更加紧密。DNA每圈初级螺旋的碱基对小于10.5,则为正超螺旋3负超螺旋:DNA绕其轴与右手双螺旋方向相反的方向缠绕所产生的超螺旋,结果减少每个碱基对的旋转,每圈初级螺旋的碱基对大于10.5,则为负超螺旋。超螺旋是耗能过程,超螺旋的产生可能为能量的储存形式分子遗传学笔记1212分子遗传学绪论
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