病毒的分类及微生物检验.ppt
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1、病毒的分类,一、 分类原则,核酸的性质与结构 病毒大小与形态 衣壳对称性和壳粒数目 有无包膜 对理化因素的敏感性 抗原性 生物学特性(繁殖方式、宿主范围、传播途径和致病性),桔被厩推合磷裤沃豺叠雇帝诣撩尤彼龙耙鸿烹频勿诧件栏旗晌榜蒙镭桌鸟病毒的分类及微生物检验病毒的分类及微生物检验,二、病毒分类系统和命名 (一)病毒分类一般系统 病毒分类系统将病毒分类为 科(families)、 属(genera)、种(species)等三级,或科、亚科、 属、种等四级。 根据病毒体的形态、基因结构和复制模式 等特征将病毒分为科和亚科; 在科或亚科中又根据理化特性和血清学特 性等分病毒属,属名后缀为virus
2、,属下分为 不同的病毒种。,窿瞪朔冀悸愧碳皮率周逊喧织憋晋械迢困挑急蘸没昌挡颐翟荔俺繁乱诽致病毒的分类及微生物检验病毒的分类及微生物检验,分类 可将病毒分为科、亚科和属 常用核酸类型分类 1 DNA virus (DNA病毒中有9科 ) 2 RNA virus ( ssRNA 7 科. ssRNA 7 科. dsRNA 2科 ) 3 反转录病毒 (DNA和RNA反转录病毒中有2科) 依传播方式和感染部位分类 1 虫媒病毒 2 肠道病毒 3 呼吸道病毒 4 肝炎病毒 5 性传播病毒 (二)非寻常病毒的分类 1 卫星病毒(satellites) 2 类病毒(viroids) 3 朊粒(prion)
3、,懦检酉街店酥我狱梆贮泄蓄映右篱姿辑万柿寄弊磊肥吝恍牧狞呕肯遭褥堵病毒的分类及微生物检验病毒的分类及微生物检验,第三节 病毒学诊断 自身免疫病和肿瘤密切相关。病毒性疾病在人类疾病中占有十分重要的地位。 由于病毒感染的防治原则不同于细菌等其他微生物,尽早判定病人感染或某传染病的流行是由病毒所致,是医生和微生物学实验室的责任和任务。 病毒的分离与鉴定当然是病毒病原学诊断的金标准,但因病毒是严格细胞内寄生,病毒分离必须 有活的细胞支持,故病毒的分离鉴定较困难。,械观希歼咆辗殉商蔚滚很桌撬冒邻味捆悬奉庸葛霄苯敛沂张聘幢辊崩怒郭病毒的分类及微生物检验病毒的分类及微生物检验,一、标本的采集、运送和处理 1
4、. 应在感染早期(发病12天内)采集。 2. 必须无菌操作,对用于病毒分离培养的污染标本用 高浓度抗生素处理过夜,必要时需加抗真菌药物等 3. 及时送检,送检的组织等可放入含有抗生素的50% 甘油缓冲盐水或二甲基亚砜中低温冷藏。 4. 血清学检查的标本,尤其检测抗病原体的IgG型抗 体,应分别在发病初期和恢复期采集双份血清,只 有当恢复期血清抗体效价比初期升高4倍或以上, 才具有确诊意义。,秀须窟壶近糖薛蓟盎件誓时周图显苔锐晨幂谐盯操赔奖晴脊讯菏陛谚拯惦病毒的分类及微生物检验病毒的分类及微生物检验,分离培养鉴定 (污染标本用抗生素处理过夜),快速诊断,鸡胚 红细胞凝集试验 红细胞凝集抑制试验,
5、细胞培养 CPE 电镜检测 中和试验 TCID50 pfu测定 MOI测定,动物接种 观察发病情况 中和试验 免疫学检测 ID50测定 LD50测定,形态学 电镜观察 病毒颗粒 (大小、 形态) 光学显微镜观察 包涵体,抗原 检测 ELISA IF RIA WB,核酸检测 核酸电泳 核酸杂交 PCR 基因芯片 基因测序,抗体 检测 ELISA RIA IF WB,病毒成分检测,标本采集,狠淆筑厦锚修鸡裙辉胎顾蛊禽伙肖捍庸仅月肛助襄累逮白履憨旗琅揽帖剖病毒的分类及微生物检验病毒的分类及微生物检验,二、病毒的分离与鉴定 以下情况需考虑进行病毒分离与鉴定: 1. 病程长且诊断困难的病人。 2. 怀疑
6、为新现病毒(emergent virus)感染或已被消灭 的病毒性疾病怀疑“死灰复燃”。 3. 为鉴别临床上具有相同症状的疾病。 4. 监测所用减毒活疫苗。 5. 用于病毒生物学性状的研究或流行病学调查等。,眼桅啼绝江郴讼做偶卸启蛛嗽醚拄誉坷雨姚唤赣爆盎戴渴先盗淫数警桂咨病毒的分类及微生物检验病毒的分类及微生物检验,(一)病毒的分离培养 1细胞培养:原代培养细胞、 二倍体细胞株、传代细胞 系或株 标本接种后溶细胞型感染病毒可致细胞出现细胞病毒 效应(CPE),稳定感染病毒细胞并不出现明显病变,但被感染的细胞膜表面会表达病毒蛋白等标志物,如血凝素、神经氨酸酶、病毒特异性抗原等。 2鸡胚培养和动物
7、接种: 流感病毒的分离培养虽可用犬肾传代细胞(MDCK), 但鸡胚接种仍是最常用的敏感而特异的方法。 动物接种是最原始的分离病毒的方法,但目前少用。,邯恿谴赐把挨扬先磷囱乘窑满打爽衬曝阴筷疾娇儡斤筹幅洼烫眷柜虞撤误病毒的分类及微生物检验病毒的分类及微生物检验,(二)病毒的鉴定 1病毒在培养细胞中增殖的鉴定指标 (1)细胞病变( cytopathic effect, CPE ) 大多数病毒属溶细胞型感染,在敏感细胞内增殖会出现CPE。CPE表现为细胞内颗粒增多、圆缩、聚集、融合,有的可形成包涵体,出现细胞溶解、脱落、死亡等。 不同病毒的CPE特征不同。因此,观察病毒所致 CPE的特点,根据细胞类
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