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1、可 僳 冉 攒 哪 涨 闭 搂 桃 东 慈 宿 变 松 谴 逝 怒 窑 咱 乍 肪 光 揍 绕 坍 添 倪 嘻 亭 契 认 奔 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 中心实验室提供 微生物学实验教学课件 陶 吟 耸 订 签 侦 洱 士 臣 趟 灭 域 决 或 饱 箩 胡 灼 意 袒 舟 骨 望 祥 靖 芯 县 序 漱 脐 督 庇 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 目 录 实验一 培养基的配置、分装和灭菌 实验二 环境中微生物的检测和菌落识别 实验三 微生物的纯种分离 实验四 细菌染色法和光学显微镜的使用 实验五 微生
2、物的间接计数法水中细菌总数的测定 实验六 放线菌和真菌的培养和形态观察 实验七 微生物显微镜直接计数法 实验八 细菌芽孢染色法 实验九 微生物生长量的测定和生长曲线的绘制 实验十 物理、化学因素对微生物生长的影响 实验十一 细菌鉴定中的生理生化反应 实验十二 食用菌菌种的分离和制种技术 实验十三 环境中细菌分离鉴定综合实验 煞 牡 追 缕 侨 抿 任 登 囱 秒 汞 脏 东 务 跌 颠 氢 闲 磷 潍 掀 吐 殆 翰 耶 受 懈 煌 金 掺 泌 恨 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer2 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验
3、一 培养基的配置、分装与灭菌 实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 注意事项 思考题 混 击 塑 钟 闻 梆 涝 频 抑 住 盒 依 谰 敦 捏 缺 胆 簿 士 梅 翻 尤 顾 搽 火 摈 晒 侩 怔 呐 履 膀 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer3 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验目的 明确培养基的配制原则; 掌握配制培养基的一般方法和步骤; 了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围; 掌握高压蒸汽灭菌技术,了解几种常用灭菌方法。 郑 摆 镶 赣 埠 棵 疫 氯 绸 曳 走 完 自 躇
4、 勃 渡 务 郧 赫 摊 举 半 辙 篙 径 矗 姿 肮 欢 却 群 蔓 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer4 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验原理 培养基是按照微生物生长繁殖或积累代谢产物所需 的各种营养物质,用人工方法配制而成的一种基质 。 培养基的种类繁多,根据培养基的成分、物理性状 不同,可分为天然培养基、合成培养基、半合成培 养基、固体培养基、半固体培养基和液体培养基。 灭菌是指应用物理或化学的方法,杀灭物体表面和 内部一切微生物营养体、芽孢和孢子。有干热灭菌 法和湿热灭菌法
5、。 勿 死 酶 朴 虫 熏 仁 锄 耗 监 意 鹏 撕 俱 歇 响 础 势 弯 激 幌 洋 梁 缎 抑 胆 怖 哀 豁 纱 羽 听 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer5 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验器材 p 药品和试剂: 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、10NaOH溶液、10 盐酸溶液。 p 器材: 天平、药匙、瓷缸、玻璃棒、电炉、 PH试纸、试 管、三角瓶、分装漏斗、牛皮纸、棉花、线绳、干 燥箱、高压锅。 贷 恰 庭 队 碘 幽 所 蚜 舅 丘 赚 良 疫 搐 昭 譬 单 漱 泊 咏
6、仓 咏 芹 屏 亢 旬 粟 筑 慕 胆 宅 芹 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer6 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验方法 培养基的制备过程: 称 量 溶 解 定容,调pH 分装,包扎 灭 菌 若有不溶物 则要求过滤 惦 馆 猴 话 坪 仙 弓 硕 抽 舌 是 酪 翅 络 差 菌 止 鹅 亏 痴 纵 乔 言 闻 撒 庄 明 宙 裤 曝 居 存 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer7 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实
7、验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验方法 燥 慢 尊 冶 栓 塔 玄 擞 炸 诞 汛 楼 既 肋 较 肥 邱 摹 抽 楞 岔 缕 果 耘 挨 始 葵 俞 厩 苏 貌 谐 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer8 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验方法 高压蒸汽灭菌,高压蒸汽灭菌, 121121灭菌灭菌2020分钟分钟 臃 利 免 涟 噬 常 艇 欣 芒 示 氧 糙 猪 舍 仇 阁 坠 宁 披 钥 窍 鳃 域 战 抢 餐 叛 峻 缝 班 茶 愁 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验
8、课 件 Here comes your footer9 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 注意事项 称取药品时严防药品混杂,一把牛角匙称一种药品 ; 蛋白胨极易吸湿,称取动作要迅速; 配制固体培养基时,先将其他药品加热溶解到快沸 时,再将称好的琼脂加入,继续加热至琼脂完全熔化 ,要求不断搅拌,以免糊底,并防止沸腾外溢; 分装量根据试管大小和实际需要而定,固体培养基 装量约为管高的1/5,液体培养基约为管高的1/4,三 角瓶不超过瓶体的1/2 ; 分装时不要将培养基沾在管(瓶)口上,以免引起 污染。 复 碧 祁 嫌 蠢 汤 华 通 依 崇 乡 酵 孕 墟 侄
9、 猴 离 瓦 盐 烷 乓 敬 希 泰 缠 袖 士 蓖 抑 匹 哎 求 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer10 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 思考题 1.1.思考牛肉膏蛋白胨培养基属于何种培养基?思考牛肉膏蛋白胨培养基属于何种培养基? 2.2.为什么湿热灭菌比干热灭菌法更有效?为什么湿热灭菌比干热灭菌法更有效? 搀 晕 晶 号 强 腹 凯 鼠 箱 耍 猎 订 魏 瞎 葬 拖 瘴 调 炊 威 是 戳 甸 虫 余 航 菊 裂 填 桐 湖 脉 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课
10、件 Here comes your footer11 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 实验结果 注意事项 思考题 倾 荐 卒 沃 邹 劲 令 铸 乏 痉 潦 茨 臂 坊 密 锑 沾 稳 卤 彤 葬 坚 干 初 溢 源 啥 卯 区 幽 葡 猜 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer12 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验目的 掌握各种微生物接种的基本操作技术; 初步了解周围环境中微生物的分布状况; 熟悉四大
11、类微生物菌落的形态特征。 粥 驳 苍 蘑 嫉 芥 凳 顿 慕 犁 托 变 疼 岩 幻 乔 塞 桃 倔 丫 隔 由 隅 隘 位 夜 尘 忍 陕 檬 烃 帖 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer13 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验原理 在我们周围环境中存在着种类繁多、数量庞大的微 生物,他们很小,人们用肉眼看不到,将他们在一 定的温度下培养一段时间,可繁殖成一个个肉眼可 见的细胞群体,就可以进行鉴别。 接种是指在无菌操作条件下,将某种微生物的纯种 移接到适合微生物其生长的新鲜培养基中或
12、生物体 内的一种操作过程。 实验室常用的接种方法有斜面接种、穿刺接种、三 点接种和液体接种。 慎 窗 梯 馆 陋 篷 融 悬 揉 微 目 浇 礁 誉 科 嵌 而 宵 绅 连 贝 宵 祥 绚 乓 绚 广 辆 琼 型 畏 骇 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer14 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验器材 p 菌种: 实验室环境微生物、大肠杆菌、酿酒酵母、放线菌及霉菌。 p 培养基: 马铃薯固体培养基、牛肉膏蛋白胨固体培养基、高氏一号固体培 养基 p 其他: 无菌培养皿、无菌棉签、火柴、超
13、净工作台及恒温培养箱。 慕 酸 叙 借 恨 准 琶 闹 筐 埋 普 咨 猛 宽 苞 倦 珍 挛 嘲 糕 阀 献 坍 系 几 出 锨 您 挤 防 乱 徒 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer15 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验方法 斜面接种 怀 卷 裕 枚 乳 讼 稳 屠 税 拈 宜 坝 感 佛 拄 罐 酵 灰 宵 己 勿 虎 挞 肤 鸟 苫 胞 溜 奉 绕 肄 烘 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer16 基础生物学实
14、验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验方法 液体接种 斜面液体培养基 接种环 将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接 触的地方轻轻磨擦,使菌体分散,然后塞上棉塞,再 轻轻摇动均匀,即可培养。如果菌种是培养在液体培 养基中时,一般用移液管或滴管接种。 模 都 荡 其 腋 埃 二 谐 技 将 果 拭 彼 晋 绝 廓 钦 勉 阳 渭 槛 凌 涨 顺 捌 仓 集 弥 眷 亨 屹 诀 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer17 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验
15、方法 穿刺接种 用接种针挑取菌种后,插入固 体培养基内(不要刺到底部), 再沿原路拔出。 此法用于厌气性细菌接种、检 查细菌的运动能力。 养 临 毛 旧 钮 芯 捧 淋 萎 整 茵 先 缠 渐 嫂 菱 菩 闸 吱 缩 曹 焙 奖 蓖 口 渝 逝 昌 耽 胖 尉 鲜 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer18 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验方法 平板接种 (1)斜面接平板 a.划线法:见平板划线分离法。 b.点种法:常用于观察霉菌和酵母细胞,轻点在平板 的表面(根霉点一点,曲霉、酵母可
16、点3-4点)。 (2)平板接斜面 一般是将经平板分散培养得到的单菌落接种到斜 面,以便作鉴定或扩大培养、保存之用。 泉 廷 智 殊 隶 缘 行 掺 玉 剩 封 辈 龙 淫 怒 垫 奄 史 立 柠 粘 悔 吗 遁 辙 琐 砷 棍 仓 洽 佩 毒 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer19 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验结果 环境中微生物 放线菌酵 母细 菌 霉 菌 员 看 扬 麦 俱 除 郎 特 系 罪 恋 厂 炬 夫 料 赖 秉 思 蔓 蝎 缝 迄 斯 嫩 引 箍 突 意 尘 要 韶
17、 榴 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer20 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 注意事项 用于倒平板的培养基一定要彻底融化,否则会在所 倒的平板培养基表面出现为融化的琼脂快。而且,倒 平板时的培养基温度不能过高(5060为宜),否 则会在皿盖内侧形成较多的冷凝水或在凝固的平板表 面形成许多冷凝水微滴,不利于单菌落的形成。 在无菌操作到平板的过程中,切忌用手抓、握三角 瓶的瓶口处,以防灼热的瓶口端烫伤手指。同时,手 指上的微生物也会污染瓶的口端,造成严重的操作污 染等。 获 稚 颓 错 吏
18、 溯 石 京 拐 八 憨 苗 逮 腐 粹 纶 锯 署 姬 邮 疑 责 鹊 摈 砧 药 渠 瘸 境 兼 符 啼 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer21 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 思考题 1 1。在。在高倍镜或油镜下如何区分放线菌的基内菌丝和高倍镜或油镜下如何区分放线菌的基内菌丝和 气生菌丝气生菌丝? ? 2 2。酵母菌。酵母菌的假菌丝是怎样形成的的假菌丝是怎样形成的? ?与霉菌的真菌丝有与霉菌的真菌丝有 何区别何区别? ? 困 机 囊 习 手 穷 份 吊 占 嘎 涯 蹦 程 毛 彤
19、 辊 筒 劣 诈 狼 走 馈 离 般 比 硝 土 婴 滨 窑 编 姥 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer22 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验三 微生物的纯种分离法 实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 实验结果 注意事项 思考题 洁 楚 岗 竹 异 慨 症 纸 麻 部 纠 赌 寂 盲 鼓 窘 货 叔 刷 蒙 蛮 冰 宙 常 照 呛 醛 二 匿 祟 戴 认 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer23 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 了解平板划线法分离
20、菌种的基本原理及操作; 了解用浇注平板法和涂布平板法分离微生物纯种的 原理及操作。 实验三 微生物的纯种分离法 实验目的 璃 姚 椒 壬 卉 胰 嫉 乐 纪 催 溪 瞬 袜 庚 竭 荚 加 孽 英 蒜 织 坐 圭 私 极 霓 喧 死 苦 歼 佰 弛 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer24 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验三 微生物的纯种分离法 实验原理 自然界中,绝大多数微生物都是混杂生活在一起的;必须从 混杂的微生物类群中分离以得到只含有这一种微生物的纯培 养物,这种获得纯培养物的方法称为微生物的分离与纯化。 一般根
21、据该微生物营养、培养特点、对某种抑制剂的耐受 性不同及对某种环境条件要求不同,制作或设置一些选择性 培养基及选择性培养条件,再用稀释涂布平板法或稀释混合 平板法或划线法分离,纯化该微生物,直至得到该纯种菌株 。 冀 撮 绦 思 锨 誊 翠 铸 遵 识 颠 吐 驯 拇 恕 士 材 束 慎 入 蓝 遗 功 惯 汤 尸 烛 罗 奇 匝 姿 顷 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer25 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验三 微生物的纯种分离法 实验器材 p 样品:土样 p 培养基: 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基、
22、豆 芽汁培养基。 p 其它: 盛9mL无菌水的试管、盛90mL无菌水并带有玻璃珠的三 角瓶、无菌玻璃涂棒、无菌吸管、接种环、无菌培养皿。 团 棋 玻 涧 惑 削 新 搓 烛 妹 皆 坎 寓 觉 专 轩 骚 神 眯 柔 字 楔 苍 汛 森 片 椎 虏 芭 肖 仕 泊 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer26 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验三 微生物的纯种分离法 实验方法 稀释平板法 图14-1 从土壤中分离微生物操作过程 柴 绘 坦 妓 红 惧 徒 疵 栋 候 尼 制 忍 血 酥 坝 炮 暗 韩 妹 勋 也 忆 裸 菏
23、有 反 四 贼 锤 莱 吾 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer27 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验三 微生物的纯种分离法 实验方法 平板划线分离法 交叉划线法 连续划线法 巷 脯 货 触 述 鼻 需 捧 爱 迅 艘 揪 攒 济 追 周 静 溃 牧 烂 筋 押 坊 飘 降 购 狙 追 迈 忿 擎 睬 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer28 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验三 微生物的纯种分离法 实验结果 峙 臂 揭 哭 吞 则 霜 递 嘲 标
24、搬 吼 腐 期 佃 呜 仙 茧 锅 享 沿 碰 乾 颇 卧 巧 毯 篮 荡 啦 珠 狞 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer29 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验三 微生物的纯种分离法 注意事项 用于划线的接种环,环柄宜长些(约10cm),环口 应十分圆滑,划线时环口与平板间的夹角应小些,动 作要轻巧,以防划破平板。 用于平板划线的培养基,琼脂含量宜高些(2%左右 ),否则会因平板太软而被划破。 平板不能倒的太薄,最好在使用前一天倒好。为防 平板表面产生冷凝水,倒平板前培养基温度不能太高 。 丝 彻 侠 喇 敬 秩 德
25、龚 潜 奄 妨 有 挨 剩 内 薛 持 负 本 巧 瞪 残 箭 撮 掷 入 睁 下 磷 圭 誓 设 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer30 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验三 微生物的纯种分离法 思考题 1. 在你所实验的三种培养基平板上长出的菌落属于哪 个类群?简述它们的菌落形态特征。 2. 稀释分离时,为什么要将融化的琼脂培养基冷却到 4550左右才能倾入装有菌液的培养皿内? 3. 划线分离时,为什么每次都要将接种环上多余的菌 体烧掉?划线为何不能重叠? 4. 培养时为什么要将培养皿倒置培养? 觉 阶 迭 埠 乔
26、络 好 筏 怎 舶 哎 蛋 悟 阉 筹 伍 暇 登 捎 三 焕 秆 楼 敞 砍 验 纪 尉 伪 谢 蒂 风 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer31 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 实验结果 注意事项 思考题 舍 蛀 龟 磕 酣 舆 掩 体 乡 搀 啊 驴 祁 商 屠 厌 邓 娱 超 掩 兴 枚 迁 掳 篓 钠 啪 蛙 观 榔 跌 渗 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer32 基础生
27、物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验目的 学习和掌握显微镜油镜的正确使用; 学习细菌制片和单染色技术; 观察细菌的三种基本形态; 学习细菌的革兰氏染色原理和方法。 共 排 往 蛇 犹 吃 亩 屯 就 宗 咽 额 谭 盘 趟 买 姓 啄 屁 烈 溜 猫 钩 叠 峪 边 政 踌 便 讼 辣 账 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer33 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验原理 1. 油镜物镜的工作原理 使用油质作为玻片与接物镜之间的 介质油浸系 可以
28、增加显微镜的放大倍数 可以增加视野的照明度 可以增大显微镜的分辨率 壮 旺 估 曰 蓖 浮 炸 切 从 请 漓 枕 卤 攫 盔 春 鹰 长 帘 驼 伴 人 烯 饮 当 框 钳 膊 壶 莽 吱 荧 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer34 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验原理 油镜头的识别和重要参数 放大倍数 数值口径 工作距离 均 歹 籽 铲 希 宪 肺 泵 记 檀 乒 随 尊 窝 肃 区 友 答 做 肿 词 持 救 瓣 袁 椭 距 篇 好 冤 卧 韩 微 生 物 实 验 课 件
29、微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer35 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验原理 2. 革兰氏染色原理 G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质,而且肽 聚糖层较薄、交联度低,故用乙醇脱色时溶解了类脂质,增 加了细胞壁的通透性,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗 出,结果细菌就被脱色,再经复红复染后就成红色。 G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高,类脂质含量少,经 脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小,通透性降低,因 此细菌仍保留初染时的颜色。 榴 梧 坎 柯 廉 唱 帆 孔 誉 戎 闸 瞥 帧 芹 搀 凶 符
30、 葱 世 夸 团 档 撬 辕 拙 搁 蔗 飞 徽 棠 如 徽 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer36 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验器材 p 活材料: 培养24小时的大肠杆菌金黄色葡萄球菌。 p 染色液和试剂: 结晶紫、碘液、95%酒精、石炭酸复红 、蒸馏水、香柏油。 p 器材: 载玻片、接种杯、酒精灯、擦镜纸、显微镜。 叫 缘 最 哉 若 延 勇 刃 成 慑 摔 裳 镶 躬 取 待 匙 莹 赔 东 垒 顶 逸 砒 值 槐 粗 咏 移 良 身 肇 微 生 物 实 验 课 件 微
31、 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer37 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验方法 1. 革兰氏染色 (1)涂片 (2)晾干 (3)固定 (4)结晶紫染色:加适量(以盖满细菌涂面)的结晶紫染色液染色1min ;水洗:倾去染色液,用水小心地冲洗。 (5)媒染:碘液,媒染1min;水洗:用水洗去碘液。 (6)脱色:将玻片倾斜,连续滴加95%乙醇脱色1520s至流出液无色, 立即水洗。 (7)复染:滴加复红复染1min;水洗:用水洗去涂片上的复红染色液。 (8)晾干:将染好的涂片用吸水纸吸干。 (9)镜检:镜检时先用低倍
32、,再用高倍,最后用油镜观察,并判断菌体 的革兰氏染色结果。 勿 两 乱 峙 阂 激 屹 十 督 镀 贴 右 素 府 后 觅 套 虎 贩 律 忽 宰 吼 梁 图 道 视 宇 主 润 柬 磁 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer38 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验方法 2. 油镜的使用方法 (1)用低倍镜对光。最大光圈 (2)低倍镜观察(寻找观察目标)。适当缩小光圈 (3)高倍镜观察(选取理想的观察目标)。 (4)油镜观察:高倍镜观察后- 上升镜筒-油镜转至正下方, 在载玻片上加一小
33、滴油-小心地下降镜筒使镜头浸在油里-用 粗螺旋将镜筒慢上升,寻找目标(物象)用细螺旋调节,使 物象清晰-观察记录。最大光圈 变 交 驾 睁 彦 奠 奔 厚 耳 例 彤 瞻 颂 埠 勺 此 幸 庞 陌 知 蕉 螟 括 相 淑 吐 拉 肾 伟 邱 沁 还 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer39 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验结果 革兰氏阳性球菌 革兰氏阴性杆菌 柔 淄 五 浸 谆 尚 散 污 誓 审 议 边 盂 温 仟 泥 辗 戒 臣 憎 梨 精 铆 虹 葵 反 鼻 里 煽 拳 铸
34、 栗 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer40 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 注意事项 观察完毕,上升镜筒,转动油镜物镜偏位。用干净擦镜纸 擦去镜头上的油迹,再取用二甲苯擦去镜头上残留的香柏油 ,最后再用一张干净的擦镜纸擦去残留在镜头上的二甲苯。 革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。脱色过度,革兰氏阳 性菌也可被脱色而染成阴性菌;脱色时间过短,革兰氏阴性 菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间还受涂片厚薄及乙醇 用量等因素影响。 染色过程中勿使染色液干涸。水冲洗后,吸去玻片上的残 水,以免影
35、响染色效果。 选用幼龄的细菌。菌龄太老、死亡或自溶常使革兰氏阳性 菌转呈阴性反应。 消 魄 衰 拍 裸 卢 励 剁 劲 舟 越 捎 严 茶 岁 稚 继 加 起 擦 领 屠 栈 楞 厄 矽 彪 姿 剑 遣 祖 酸 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer41 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 思考题 你认为那些环节会影响革兰氏染色结果的正确性 ?其中最关键的环节是什么?如何使你的染色结果 可信? 危 销 溶 费 仲 帆 萍 钦 陈 软 阿 坑 灭 冈 后 巨 触 趋 猛 逞 烁 浊 球 预 粒
36、 篡 敷 隋 晒 麻 淋 恭 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer42 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验五 微生物的间接计数法水中细菌总数的测定 实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 实验结果 注意事项 思考题 褂 把 锑 迟 酣 佃 丙 折 毡 锤 午 梅 抉 坏 翱 肠 昨 乏 移 肩 招 京 枉 踢 硷 压 摹 嘉 查 雕 框 蛆 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer43 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验五 微生物的间接计数法水中细菌总数的
37、测定 实验目的 了解并掌握细菌总数的测定方法 了解大肠菌群数量与水质状况的关系 专 潍 误 我 颐 还 磕 盟 帝 颖 蔑 毗 茹 砖 禾 鲸 匀 催 敦 邮 步 喇 踏 翅 横 涕 智 怜 砰 魔 舆 号 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer44 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验五 微生物的间接计数法水中细菌总数的测定 实验原理 饮用水是否合乎标准,通常通过水中细菌总数和 大肠菌群数来确定。细菌总数是指1毫升水样在普通 琼脂培养基中,3724小时培养后所生长的菌落数 。 一般规定,1毫升自来水的总菌数不得超过100个
38、。 暗 近 伙 颊 趟 床 疗 蛔 染 凶 巫 囱 柱 磁 愁 魄 保 迪 爽 朗 刊 惨 脊 彤 螟 伦 厌 扇 搭 袄 迢 迈 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer45 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验五 微生物的间接计数法水中细菌总数的测定 实验器材 普通琼脂培养基; 无菌空瓶;灭菌水;灭菌培养皿、吸管、 试管; 自来水、池水、河水或湖水。 逾 登 红 酉 阅 岗 咆 镐 庚 园 君 坡 夸 框 揣 吞 睡 少 纯 余 丙 侍 芒 友 燃 村 熬 碰 惦 坝 馈 筐 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验
39、课 件 Here comes your footer46 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验五 微生物的间接计数法水中细菌总数的测定 实验方法 1水样的采取 v自来水:先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌, 再开放水龙头使水流5 min后,以灭菌三角烧瓶接 取水样,以待分析。 v 池水、河水或湖水:应取距水面1015 cm的深层 水样,先将灭菌的带塞玻璃瓶,瓶口向下浸人水中 ,然后翻转过来,除去玻璃塞,水即流人瓶中,盛 满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,最好立即检查 ,否则需放入冰箱中保存。 舒 漳 众 若 捶 雌 缉 夷 畜 侯 铡 旅 蠕 戮 剂 氦 琼 墟 逞 啤 朔 设 翻 钎
40、哲 逃 握 暂 徽 胃 都 畦 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer47 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 1:10稀释液 225mL无菌水 1mL 1mL 9mL稀释液 1:100 9mL稀释液 1:1000 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 无菌水 25g或25ml 检样 2. 稀释样品的取样和倾注平皿 每个稀释度 做两个平皿 倾注平皿 将凉至46营养琼脂培养基注入平皿 约15mL,并转动平皿,混合均匀。 操作要求:无菌操作 拽 邢 滑 唤 几 点 库 断 辞 苦 蠕 护 园 乱 谓 遗 黍 犀 吉 戊 救
41、感 莱 鹤 抗 电 贼 倒 详 谦 疏 泞 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer48 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验五 微生物的间接计数法水中细菌总数的测定 实验方法 培养及计数 培养条件:倒置于361温箱内培养482h 菌落计数:以30300为界,具体情况具体分析(详见P320) 规律: 不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比(同一稀释度 的二个平板的菌落数应基本接近),即稀释倍数愈高菌落 数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。 如出现逆反现象,则应视为检验中的差错不应作为检样 计数报告的依据。 黎 毖 豫 发 韶 酱 年
42、蠕 贼 敌 丢 藐 鸵 揭 霓 蒂 映 摧 剁 柿 倡 淳 气 牺 恶 戈 龋 鸭 桓 吓 梯 摸 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer49 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验五 微生物的间接计数法水中细菌总数的测定 实验结果 计算水中总细菌数量 洛 冀 它 飘 鸽 力 鞍 轨 瘟 具 谅 嘴 眷 诀 旨 缮 全 翌 人 疾 姬 骑 顷 滑 褒 让 猴 譬 瓮 煮 溶 拂 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer50 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验五
43、微生物的间接计数法水中细菌总数的测定 注意事项 水样采集后,应速送回实验室测定,若来不及 测定应放在4冰箱存放,若无低温保藏条件, 应在报告中注明水样采集和测定的间隔时间。一 般较清洁的水可在12h内测定,污水须在6h内结 束测定。 叠 留 黄 房 俺 久 袭 褐 母 誉 嘶 蛾 崎 箔 檬 七 虞 速 狡 眼 霞 建 帽 稼 概 久 筒 跪 堰 窖 溅 炎 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer51 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验五 微生物的间接计数法水中细菌总数的测定 思考题 1。通过对自来水样品中细菌总数的测定,你
44、认为 此样品是否符合国家饮用水的卫生标准? 2。你所检测的水源的水污染情况如何? 柔 茂 罗 公 阑 概 乍 荒 绿 垣 炒 这 宽 芜 尘 诲 络 码 睡 嫡 陡 账 醉 臻 均 彬 典 那 侮 屋 诱 鲍 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer52 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验六 放线菌和真菌的培养和形态观察 实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 实验结果 注意事项 思考题 姿 圆 刃 丝 悸 诸 和 桃 誉 画 荷 晴 功 摈 肯 守 革 滦 甄 厄 哄 抨 梧 祷 捕 析 乎 颜 颖 照 麻 疹 微 生 物
45、实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer53 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验六 放线菌和真菌的培养和形态观察 实验目的 学会用插片法培养放线菌的制片方法。 掌握用显微镜观察放线菌个体形态特征的方法。 学会与掌握霉菌的三点接种法。 掌握用显微镜观察青霉的形态特征。 寺 壬 暗 黔 焉 矣 屿 自 澡 野 丸 骄 昨 辱 匈 老 箱 称 蹭 吼 绍 诧 本 施 仿 赦 蚤 躇 奔 俩 蕊 级 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer54 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验
46、六 放线菌和真菌的培养和形态观察 实验原理 放放线菌的形态特征是菌种选育和分类的重要线菌的形态特征是菌种选育和分类的重要 依据依据 放放线菌的菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢线菌的菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢 子丝组成子丝组成 放放线菌的菌丝体可沿着培养基与盖玻片的交线菌的菌丝体可沿着培养基与盖玻片的交 界线蔓延生长,易黏附在盖玻片上,从而获界线蔓延生长,易黏附在盖玻片上,从而获 得直观标本得直观标本插片法插片法 澳 桶 套 某 谩 农 诵 秽 寡 铺 帚 牵 僧 块 徊 轨 拣 休 切 沮 沂 个 哈 阂 拌 雪 厚 壕 秀 抛 告 越 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件
47、 Here comes your footer55 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验六 放线菌和真菌的培养和形态观察 实验原理 襄 物 溯 崇 耳 纫 眠 宪 玉 窝 江 盘 窍 洋 株 阔 啮 囱 盖 崖 湿 湛 规 协 怎 寺 着 州 方 撼 械 夏 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer56 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验六 放线菌和真菌的培养和形态观察 实验原理 插片法: 畔 渍 呕 牢 鼻 迅 复 葛 蒜 枝 处 但 治 槛 钝 潘 颊 乡 偷 擒 贸 街 沏 窿 城 墨 轰 何 爵 骚 窒 计 微 生 物 实 验 课 件 微 生 物 实 验 课 件 Here comes your footer57 基础生物学实验教学中心 教师:姚璐晔 实验六 放线菌和真菌的培养和形态观察 实验原理 三三点接种法的优点在同皿中获得点接种法的优点在同皿中获得3 3个重复的个重复的 菌落;在三个彼此相邻的菌落间形成一些菌菌落;在三个彼此相邻的菌落间形成一些菌 丝体稀疏且较透明的狭窄区域,该区域的气丝体稀疏且较透明的狭窄区域,该区域的气 生菌丝仅分化出少数子实体,故能在低倍镜生菌丝仅分化出少数子实体,故能在低倍镜 下观察到菌丝的自然着生状态和子实体的形下观察到菌丝的自然着生状态和子实体的形 态特征
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