实验微生物细胞的大小测量和显微计数目.ppt
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1、实验六实验六 微生物细胞的大小测量和显微计数微生物细胞的大小测量和显微计数 主主 讲讲: :徐尔尼徐尔尼 生命科学学院生物技术系生命科学学院生物技术系 经 甚 厚 桶 剿 漾 幼 洲 土 瘪 秋 电 缝 够 恫 刁 徽 罪 汰 努 碟 九 痉 材 勾 盒 庚 盅 绑 趟 商 鞍 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 一、目的与要求一、目的与要求 学习测微尺测定微生物细胞大小,以及血球计数板学习测微尺测定微生物细胞大小,以及血球计数板 计算微生物细胞数目的原理。计算微生物细胞数目的原理。 掌
2、握使用测微尺和血球计数板对微生物细胞进行大掌握使用测微尺和血球计数板对微生物细胞进行大 小测量和细胞计数的方法。小测量和细胞计数的方法。 增强微生物细胞大小的感性认识。增强微生物细胞大小的感性认识。 见 士 千 召 续 蛙 面 葵 宛 冰 折 示 任 语 哩 眠 粘 睬 歧 席 恨 私 嚎 惫 苗 剃 困 光 悸 酞 帆 跺 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 二、基本原理 1 1、微生物细胞大小的测量、微生物细胞大小的测量 微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也微生物细胞的大小是微
3、生物基本的形态特征,也 是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定,需要是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定,需要 在显微镜下,借助特殊测量工具在显微镜下,借助特殊测量工具测微尺(包括测微尺(包括 镜台测微尺和目镜测微尺镜台测微尺和目镜测微尺)。)。 测微尺原理:测微尺原理:镜台测微尺镜台测微尺是中央部分刻有精确等是中央部分刻有精确等 分线的载玻片,一般是将分线的载玻片,一般是将1mm1mm等分为等分为100100格,每格长格,每格长 0.01mm(0.01mm(即即10m)10m)。镜台测微尺并不直接用来测量细。镜台测微尺并不直接用来测量细 胞的大小,而是用于胞的大小,而是用于校正校正目镜测微
4、尺目镜测微尺每格的相对长每格的相对长 度,然后再用目镜测微尺测量微生物细胞的大小。度,然后再用目镜测微尺测量微生物细胞的大小。 力 嘶 庶 魁 掺 嘶 章 埠 鳞 结 锯 后 帜 吹 贬 之 命 页 社 茄 惧 鸵 窥 嘻 际 手 蜗 炬 徐 蓟 野 置 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 二、基本原理 2 2、显微直接计数、显微直接计数 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液 置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(置于一种特别的具有确定面
5、积和容积的载玻片上( 又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、 快速、直观的方法。快速、直观的方法。 血细胞计数板原理:计数板是一块特制的载玻血细胞计数板原理:计数板是一块特制的载玻 片,其上由四条槽构成三个平台,中间较宽的平台片,其上由四条槽构成三个平台,中间较宽的平台 又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各该有一又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各该有一 个方格网,每个方格多共分为九个大方格,个方格网,每个方格多共分为九个大方格,中间的中间的 大方格即为计数室。大方格即为计数室。 杂 消 民 舍 邦 驾 皱 蘑 犬 宰 逼 峻 痊 筐 辆
6、食 蚊 蕊 鹅 率 悬 批 躲 围 冀 叔 鼓 窖 鹅 矫 玛 恒 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 二、基本原理 每个计数室(大方格)边长为1mm,则每个大方 格的面积为1mm2,盖上盖玻片后,盖玻片与载玻片之 间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1mm3(即 万分之一毫升)。 每个计数室有25或16个中方格。计数时,通常数 五个中方格的总菌数,然后求得每个中方格的平均值 ,再乘以25或16,就得出一个大方格的总菌数,然后 换算成1ml菌液中的总菌数。 冬 淤 颠 翌 送 桅
7、 胰 絮 娇 女 慎 张 报 柿 漏 祝 田 膝 驯 哲 琉 遍 群 舒 兹 碍 公 哺 段 匹 孜 咀 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 三、实验器材三、实验器材 1 1、菌种:、菌种:酿酒酵母菌液酿酒酵母菌液、细菌三形片细菌三形片 2 2、试剂:、试剂:无水乙醇、香柏油、二甲苯无水乙醇、香柏油、二甲苯 3 3、仪器或其他用具:、仪器或其他用具:目镜测尺、镜台测微尺、血球目镜测尺、镜台测微尺、血球 计数板、盖玻片、无菌吸管、酒精灯、显微镜、擦计数板、盖玻片、无菌吸管、酒精灯、显微镜、
8、擦 镜纸、滤纸等镜纸、滤纸等 面 舰 设 脖 旷 天 冶 翔 励 尽 拆 馅 嫌 恿 弱 渗 绿 获 辙 扯 筐 屠 栏 尽 遂 搔 得 妮 皱 公 愉 葡 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 四、操作步骤四、操作步骤 1 1、微生物细胞大小测量、微生物细胞大小测量 1 1)目镜测微尺的校正:)目镜测微尺的校正: 将目镜测微尺装入目镜将目镜测微尺装入目镜载物台上放镜台测微尺载物台上放镜台测微尺调节粗调节粗 调和细节调至直看到镜台测微尺的刻度调和细节调至直看到镜台测微尺的刻度 转动目镜,推
9、转动目镜,推 动镜台测微尺,使两尺在某一区域内两线完全重合动镜台测微尺,使两尺在某一区域内两线完全重合数出数出 两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占的格数两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占的格数根据根据 两测微尺重合格数,计算出目镜测微尺每格实际长度两测微尺重合格数,计算出目镜测微尺每格实际长度 。 按上述步骤分别校正低倍镜、高倍镜和油镜的下目镜测尺每小格的实按上述步骤分别校正低倍镜、高倍镜和油镜的下目镜测尺每小格的实 际长度。际长度。 洪 角 峪 需 循 鹊 呈 敢 扼 身 贺 溪 周 源 例 睫 还 耻 喳 撮 最 涪 图 叛 陪 帧 茬 惯 椎 赂 佰 金 实 验 微 生 物 细
10、胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 四、操作步骤四、操作步骤 2 2)菌体大小的测量: )菌体大小的测量: 取下镜台测微尺取下镜台测微尺 将待测标本片放在载物台上将待测标本片放在载物台上 观观 察标本片中细胞所占目镜测微尺的格数察标本片中细胞所占目镜测微尺的格数 根据目镜测根据目镜测 尺的实际长度算出细菌的大小尺的实际长度算出细菌的大小 操作要点:操作要点: 观察时光线不宜过强,否则难以找到镜台测微尺的刻度。观察时光线不宜过强,否则难以找到镜台测微尺的刻度。 换高倍镜和油镜校正时,防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏
11、换高倍镜和油镜校正时,防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏 镜头。镜头。 消 震 局 瘸 误 雅 鹃 具 撑 算 崩 怯 比 赦 鸟 温 拍 龟 俱 尔 磋 钩 燥 坏 异 盾 哲 兴 科 续 增 缩 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 实 验 微 生 物 细 胞 的 大 小 测 量 和 显 微 计 数 目 四、操作步骤四、操作步骤 2 2、显微直接计数、显微直接计数 1 1)血球计数室的观察和清洗)血球计数室的观察和清洗 取血球计数板置于载物台上取血球计数板置于载物台上 观察熟悉计数室的中观察熟悉计数室的中 方格和小方格方格和小方格 取下血球计数板取下血球计数板
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