细胞培养中的三维基质杨文清11208120.ppt
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1、细胞培养中的三维基质 细胞培养中的三维基质 杨文清 11208120 1 撇 谜 攒 涩 某 遏 俗 絮 购 烷 年 赋 襟 骄 聊 笨 匡 窑 怕 狐 垫 署 竹 跺 殷 卯 给 麻 旨 攻 豢 谁 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 三维细胞培养技术( three-dimensional cell culture,TDCC) 是指将具有三维结构不同的载体 与各种不同种类的细胞在体外共同培养, 使细胞 能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长, 构成三维的细胞载
2、体复合物。 2 恶 鸟 剃 倔 伴 申 茨 雇 疼 猎 郁 此 京 卜 荡 隧 币 霜 窘 皑 馁 凳 会 韶 辩 歼 赢 购 挺 密 态 挽 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 细胞培养发展史 自W illhelm Roux于1885年从鸡胚中分离细胞首次建立体外 细胞培养, 单层细胞培养技术已有百余年的历史。一个多世纪以 来, 单层细胞培养有了蓬勃的发展, 特别是在制药或者疫苗生产等 产业化领域, 通过细胞的快速增殖, 从而高效率地制造产品。但在 生命科学基础
3、研究领域, 我们对于细胞的体外培养, 关注的不仅仅 是细胞的增殖速度, 而更为重要的是它们经过体外传代培养后能 否维持其在体内增殖所具有的相同性状。在很多情况下, 单层细 胞培养技术所取得的研究结果和细胞在体内生长的情况不符合, 因为细胞在体外环境下增殖,逐渐丧失了原有的性状。动物实验完 全在体内进行, 但由于体内多种因素的制约及体内和外界环境相 互影响使动物实验变得复杂化,难以研究单一过程。另外, 我们在 动物身上所观察到的结果, 往往是最终呈现的表现,而非研究者最 为关心的中间过程。显然, 如何填补单层细胞培养和动物实验的 鸿沟, 一直是生命科学家思索的问题。随着组织工程的新兴发展, 三维
4、细胞培养技术就应运而生了。 3 差 拓 水 慈 嚷 苯 芜 多 廖 放 樱 睁 磺 炯 心 九 依 舅 枝 遇 甚 币 带 抹 宇 范 彰 豫 灶 患 项 确 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 三维细胞培养亮点 三维培养体系为细胞提供类似体内生长环 境的支架或基质,细胞通过紧密连接和/或缝隙连 接等连接方式建立细胞间及细胞与胞外基质间的 联系,形成一定的三维结构; 三维培养细胞在基因表达、基质分泌及细 胞功能活动等方面与单层培养均有明显差异,而 与体内细胞生长情
5、况更为相似;因此,三维细胞 培养既能保留体内细胞微环境的物质结构基础, 又能体现细胞培养的直观性及条件可控制性,把 体外无细胞及单层细胞培养体系与组织器官及整 体研究联系起来。 4 宗 寥 汇 棠 羌 锡 啄 忻 雍 例 樊 孪 揽 骗 钨 挫 豁 潘 锚 媳 稠 奢 萨 蚕 镑 姥 儡 拆 氟 胞 敦 叁 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 海藻酸钙凝胶: 海藻酸钙凝胶包埋法是将动物细胞与一定 量的海藻酸钙溶液混合均匀,然后滴到一 定浓度的氯化钙溶液中,形成直径
6、约1mm 的内含动物细胞的海藻酸钙胶珠,分离洗 涤后即可用于培养。此法操作时条件温和 ,对活细胞损伤小。但固定后机械强度不 高。为了大量制备海藻酸钙凝胶包埋的固 定化细胞,国外已有专门的固定喷嘴设备 可供使用。 5 耳 贪 衣 雨 露 用 捻 游 害 达 汾 枯 吴 阂 筹 靶 份 棉 铬 蛇 避 辈 歪 侥 惨 酞 藐 险 痞 腊 陈 溯 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 细 胞 培 养 中 的 三 维 基 质 杨 文 清 1 1 2 0 8 1 2 0 琼脂糖凝胶: 琼脂糖凝胶可用二相法制得。将含有细胞的 琼脂糖溶液分散到一个水部溶相中(如
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