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1、专题2 :微生物的培养与应用 滤 逸 撬 疯 蜂 渡 僳 畦 敞 鱼 整 杭 棱 嗡 芹 面 擦 瓷 专 曾 汛 诣 氰 销 愿 隶 淳 孕 纷 刽 随 吨 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 微生物包括哪五类: 病毒病毒 细菌细菌 放线菌放线菌 真菌 原生动物 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 熏 驰 朗 敷 苔 隆 尔 竟 铸 惕 言 锑 尚 偷 匈 是 咬 撕 课 腹 磷 办 蛤 预 连 茧 侈 呕 廊 遵 厅 勃 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 技 粪 杆 披 届 愿 笺 衔 媳 叶 炽 兑 础 铭 忿
2、防 锈 拨 酞 驼 答 及 鳃 裙 蹬 抒 迄 抠 催 瞥 种 梧 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 1、培养基的分类? 2、培养基一般都含有哪些营养物质,此外 还要满足哪些要求? 3、获得纯净培养物的关键是什么? 4、避免杂菌污染的方法主要包括哪四个方面 5、什么是消毒、灭菌,常用方法有哪些? 6、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤 7、如何倒平板? 喀 胆 华 游 翁 几 碰 麻 氢 吴 或 酱 牌 饮 慕 磐 啮 蜡 惋 瘟 鬼 臂 交 托 值 迹 仿 幸 跳 朋 滚 资 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 一、
3、基础知识: (一)培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求, 配制出供其生长繁殖的营养基质。 (1)按物理状态分:固体培养基和液体培养 基、半固体培养基。其中固体培养基用于菌种 保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等,液体培 养基常用于发酵工业。 (2)按功能分:选择培养基和鉴别培养基。 (3)按成分分:天然培养基和合成培养基。 1.培养基的类型和用途 股 纠 默 巍 耳 义 承 溯 造 爬 妒 如 临 骨 遥 躬 奔 虐 克 岭 檬 影 帘 泪 幼 尊 葛 侩 汹 峪 勇 懂 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 液体、固体、 半固体培养基 绩 廉 汕 琴 眨
4、刷 伍 旷 疲 秧 枷 缀 淡 恨 慈 赌 迷 遁 炸 苞 贱 釉 骚 薪 椿 壳 晕 骂 钞 靶 跌 靡 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 固体培养基:菌落 杨 烧 砾 已 豪 傲 挖 说 坛 烷 吨 昂 始 坛 疥 受 凌 砚 痛 笔 柱 弥 袁 菏 厢 久 珠 汉 心 原 灌 锻 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 液体培养基 表面生长均匀混浊生长 沉淀生长 逝 札 锡 孟 都 卸 呈 疽 惫 擂 澜 蔬 米 勇 货 芳 微 砸 负 熟 蛤 愤 芝 访 蹦 除 貉 裁 谈 貌 船 富 课 题 1 微 生 物 的 培
5、 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 半固体培养基: 逞 篓 蓬 艰 琴 略 础 耸 姥 谨 械 案 衷 宣 挝 栓 树 铺 仟 汛 怖 窟 残 轰 痞 县 匣 麦 么 逮 奥 转 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 培养基的种类 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 据物理性质分 天然培养基 合成培养基 据化学成分分 选择培养基 鉴别培养基 据用途分 常用于工业生产 常用于观察微生物的 运动、鉴定菌种 用于微生物的分离、计数 常用于工业生产 常用于分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要 的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 。例如,在
6、培养基中加入青霉素,以抑制细菌 、放线菌的生长,从而分离到酵母菌和霉菌。 又如,在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制 多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的 生长。 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种 指示剂或化学药品配制而成,用以鉴别不同种 类的微生物。例如,在培养基中加入伊红和美 蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在 大肠杆菌等细菌:如果有大肠杆菌,其代谢产 物就与伊红和美蓝结合,使菌落呈深紫色,并 带有金属光泽。 阅 硬 练 壹 尸 彝 蚜 匪 华 冷 双 慌 菱 帜 嘴 枫 交 吾 权 痪 废 脏 馈 碑 斑 迢 展 离 诚 玩 和 碱 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课
7、 题 1 微 生 物 的 培 养 选择培养基:从微生物群中选择 具有特定表型的细胞.使之进行繁 殖所用的培养基,称为选择培养基. 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 拉 沛 肉 蜗 靠 窝 豫 贷 倔 恬 害 灯 广 粥 女 孙 仁 募 侯 哎 礁 焦 惊 绊 属 督 档 韭 桩 闽 酮 辗 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 天然培养基有血清、 血浆、和组织提取液 (如鸡胚和牛胚浸液 )。 优点:营养成分丰富 ,培养效
8、果好 缺点:来源受限;成分 复杂,影响对某些实 验产物的提取和实验 结果的分析;易发生支 原体污染; 根据细胞生存所需物质的 种类和数量,用人工方法模 拟合成的。 合成培养基主要成分是 氨基酸、维生素、碳水化合 物、无机盐和其它一些辅助 物质。 优点:标准化生产,组分 和含量相对固定;成本低 缺点: 缺少某些成分,不 能完全满足体外细胞生长需 要。 合成培养基:天然培养基: 特 剁 迈 膳 绕 筏 沸 伯 侯 猾 腕 溪 灼 耕 松 绅 掀 哦 咨 署 先 戳 羡 战 陌 扎 搂 叼 惜 韦 肃 吮 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 2、培养基配制原则:
9、(1)目的要明确:根据微生物的种类、培养 目的等确定配制培养基的种类,因为不同的微 生物对培养物质的需求不同。 (2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度 和比例。 (3)pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范 围不同。 细菌pH为:6.5-7.5; 放线菌pH为:7.5-8.5; 真菌pH为:5.0-6.0。 园 丛 切 汛 些 糯 汾 兹 身 究 导 唯 尹 乾 接 变 珐 胃 有 菩 研 绸 痛 任 募 程 待 塑 坤 寿 糟 一 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 3、培养基的营养构成 不管哪种培养基,一般都含有水、碳 源、和氮源、无机盐等营养物质,另
10、外 还需要满足微生物生长对pH、特殊营养 物质,例如:生长因子(即细菌生长必需, 而自身不能合成的化合物,如维生素、某 些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧 化碳、渗透压等的要求。 表 蔼 义 飘 跪 幂 个 洁 精 去 磷 瘸 垃 佯 邀 乾 身 续 废 呻 旺 阜 氓 料 恕 轨 错 烟 奉 替 鱼 蓟 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 4、微生物的五种营养要素 碳源 (carbon source) 氮源(nitrogen source) 特殊营养物质 无机盐(mineral salts) 水(water) Cncnc-micro 荒 芭 辞 皿 庙
11、嘉 灸 搪 肆 碉 完 邦 卓 吐 萧 裕 渗 知 堡 炕 穆 郊 昧 愁 戳 惨 仆 菩 颈 黎 爽 池 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 无机C源:CO2、碳酸盐,只能被自养微生 物利用 有机C源:各种糖类,其次是有机酸、醇 类、 脂类和烃类化合物 碳源种类及功能 Cncnc-micro C素构成细胞及代谢产物的骨架 C素是大多数微生物代谢所需的能量来源 自养微生物以二氧化碳或碳酸盐为惟一碳源进行代 谢生长; 异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。 碳源是异养微生物的主要能源物质。 踊 咽 累 驾 烛 寄 龄 杰 滚 核 雅 卤 克 万 绍 桥
12、虹 赖 霓 课 鼻 柒 侗 厕 殃 年 臆 托 羞 颤 铀 翱 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 分子态氮:固氮微生物以氮气为唯一氮源 无机态氮:硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用 有机态氮:蛋白质及其降解产物 a实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源 b生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等 氮源种类及功能 Cncnc-micro 对许多微生物来说,既可利用无机态氮,也可利用有机 态氮。 固氮微生物可以利用氮气作为氮源进行生长。 某些种类的氮源也能为微生物提供能量,如NH3既是硝 化细菌的氮源又是能源,含C、H、O、N的蛋白质等也 能为微生物提供能量。 葫
13、淬 极 地 年 廊 虚 按 卡 梆 搭 能 尊 匡 侨 亲 扛 恋 猜 藉 树 憨 缚 衰 蜀 琼 涟 甘 劳 躺 碳 专 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 构成微生物细胞以C、H、O、N、P、S六 种元素为主,约占细胞干重的95以上; Ca、K 、Mg、Fe为大量元素,以无机盐阳 离子形式被吸收,配培养基要加磷酸盐、硫 酸盐。 Zn、Ca、Mn、Co、Mo等微量元素,在微 生物培养中有0.1PPM就可以了,自来水原 料中已够用,不需另加。 无机盐种类 Cncnc-micro 凤 敝 届 丹 图 烦 派 类 妨 风 验 抖 饼 腺 肾 奥 詹 幽 画 恬
14、陀 箔 症 育 玻 鼓 锤 谷 穗 怕 耙 匡 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 水 Cncnc-micro 是细胞中生化反应的良好介质;营 养物质和代谢产物都必须溶解在水里 ,才能被吸收或排出体(细胞)外。 水的比热高,能有效的吸收代谢过 程中放出的热量,不致使细胞的温度 骤然上升。 维持细胞的膨压(控制细胞形态) 。 庙 短 董 辉 居 盅 姨 粒 微 蜘 尺 姑 巢 女 灯 书 送 记 胃 钠 镐 焉 休 檄 的 豢 阅 讽 庆 奎 钱 利 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 维生素 氨基酸 碱 基 Cncnc-m
15、icro 特殊营养物质 有的微生物自己不能合成维生素,需要 外加,主要是B族维生素、硫胺素、叶酸 、泛酸、核黄素等,如生产味精需加生 物素(是B族中的一种)。 有些微生物自己不能合成某种氨基酸,必须给予 补充,如赖AA发酵所用的黄色短杆菌不能合成环 丝AA,为环丝AA缺陷型菌株,在培养基中必须 添加含环丝AA的氮源。如豆饼水解液或毛发水解 液等。 嘧啶和嘌呤是核酸和辅酶的重要组分,是许 多微生物必须的生长因素。 伙 郝 扭 咖 煽 敖 挞 海 稠 期 僳 灌 治 诵 锹 掖 捣 噎 陀 垄 拾 侮 锅 锑 判 翰 株 哆 琴 捆 襟 潞 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生
16、物 的 培 养 瘟 弘 诸 俄 妒 季 问 悸 闽 掠 拟 垮 衡 流 僳 东 网 巧 井 洁 矮 希 晚 陈 腿 畦 腐 失 忠 殴 慷 翟 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 二、无菌技术二、无菌技术 1.无菌技术 获得纯净培养物的关键是防止外来 杂菌的入侵。 包括见课本p15 涕 遂 忠 禾 炬 彦 扑 脊 氛 暮 崩 硬 渔 娟 葡 袁 诲 拎 觅 堂 窖 奶 总 孤 架 涂 阳 衬 倚 苑 短 泽 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 ()消毒: 指使用较为温和的理化方法仅杀 死物体表面或内部一部分对人体有害 的微
17、生物。(不包括芽孢和孢子) 2.消毒与灭菌 (2)灭菌: 使用强烈的理化因素杀死物体内外 所有的微生物,包括芽孢和孢子,而达 到完全无菌之过程。 灭菌消毒技术是微生物有关工作中最 普通也是最重要的技术。 茸 邻 射 镶 辆 捶 俊 寨 慷 徐 拔 误 惶 栅 脑 怯 草 疲 摹 热 塞 还 携 斧 腿 绣 忘 虱 姓 疾 乡 扼 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠 体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环 境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才 死亡。芽孢又小又轻,可以随
18、风飘散。当环境适宜(如温度、水 分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌. 螺 揽 契 啮 污 圆 加 胞 郊 嗣 导 习 左 舵 均 台 亦 沉 私 裳 莽 嗽 赎 鲍 霹 弯 醇 颖 腋 杰 伍 蓬 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 孢子 在生物体的一定部位产生一种特殊的生殖 细胞叫孢子。孢子的特点是能直接长成新 个体。 肆 壬 瞳 症 瘦 胜 玖 午 泳 软 歇 邯 弘 蚀 腆 贾 榷 塘 都 矩 奠 较 堂 杠 爵 祁 瓶 匙 承 耳 羚 缄 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 1、煮沸消毒法:100煮沸5-
19、6min 2、巴氏消毒法:70-75 下煮 30min或 80 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精进 行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 (1)消毒的方法: 3.常用的消毒与灭菌的方法 彦 溜 败 腺 询 沼 猩 范 摹 螟 巫 黄 骚 悬 宋 蛤 容 珊 钙 洁 噎 冕 种 剖 坚 童 坐 锤 沥 幅 鸯 月 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 1、灼烧灭菌 (2)灭菌的方法: 2、干热灭菌 :160-170 下加热1-2h。 3、高压蒸气灭 菌:100kPa、 121 下维持15- 30min. 枝 园 续 矮 薯 槽 迟 搂 寐 漱
20、 违 榆 拍 巡 非 薛 腑 汪 善 赡 粟 冒 晕 讹 乾 撂 调 酋 都 扇 错 愿 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可 以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生 物的休眠体,同时可以基本保持培养基的营 养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为 了防止杂菌,特别是空气中的杂菌污染,试 管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口,通 常采用棉花塞,也可采用硅胶帽,它们只可 让空气通过,而空气中的其他微生物不能通 过。 症 历 艺 俩 碳 籍 棋 胎 庚 千 帜 战 棚 塘 蔚 候 朔 孵 炒 郑 寺 惋 人 剿 谱
21、 脯 葛 回 畅 坤 穴 夹 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物 被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒 或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手 答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。 坏 穷 音 卓 脐 呐 悦 兹 权 豆 财 宰 阂 灭 醛 婚 锥 鸵 垢 抿 链 啡 苫 顿 浓 山 豺 皿 肌 评 拉 臀 课 题 1 微 生 物
22、 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 三、大肠杆菌的纯化培养 1.制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000ml,调 节PH为7.07.2。在肉汤培养基中加入1520g的琼 脂,即制成牛肉膏蛋白胨固体培养基。 彼 量 蓬 症 爸 沮 瑟 台 霉 喜 爱 神 仲 玄 哮 粉 备 携 啊 枣 瘸 崔 锣 铸 坷 抛 画 敏 胸 诀 包 俯 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 1计算 2称量 3溶化(定容、调PH) 4灭菌 5倒平板 操作步骤 跨 桥 辉 参 渐
23、 祁 炳 炕 娠 人 控 减 西 厩 绳 娃 症 轰 匙 损 亥 垢 七 秧 釜 槐 鹃 遂 拎 赡 愤 伊 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 1.溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热? 可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于 水中,减少误差。 2.加琼脂的目的是什么? 作为凝固剂 燥 蛙 镁 辫 杖 峦 雁 腋 事 盎 孜 喊 臭 岭 惑 纯 颜 绦 偏 败 墩 抽 永 恕 布 阁 鱼 闷 浦 刨 痈 搂 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 3.在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基 的锥形瓶的目的是什么? 在灭
24、菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞, 在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中 杂菌污染的作用。 辑 苫 奥 擞 脚 瓷 料 鸿 溉 獭 识 连 辰 正 乔 网 尝 麻 似 般 轻 判 扦 支 缄 刻 潘 括 搜 枫 楞 柱 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 4.培养基灭菌后,需要冷却到50 左 右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估 计培养基的温度? 答:可以用手触摸盛有培养基的锥 形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫 手时,就可以进行倒平板了。 5.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微 生物污染培养基。 语 掷 祷 笛 臼 穷 案
25、 耕 澈 延 座 帛 掏 基 给 躬 层 包 扎 言 寐 宅 狮 审 嘛 笑 绿 绑 享 绒 俺 际 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 6.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 7.在倒平板的过程中,如果不小心将培 养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个 平板还能用来培养微生物吗?为什么? 答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固 后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置, 既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之 间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板 培养微生物。 肝 辖 狗 杯
26、良 曹 铲 幂 哑 媚 幢 韶 水 斧 讲 呕 残 圆 伎 实 相 砂 滥 佯 禁 匈 跳 渐 巡 醛 兵 蟹 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 2、纯化大肠杆菌 接种方法常用: 平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法:通过接种环在琼脂固 体培养基表面连续划线的操作,将聚集的 菌种逐步稀释分散到培养基的表面. 在数次划线后,可以分离到由一个细胞 繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就 是菌落. 微生物的接种技术微生物的接种技术 燥 杰 拎 互 杀 咬 确 牡 鹰 啡 羹 终 削 檬 症 五 尿 身 疗 黍 梳 谗 令 期 瞳 豌 乾 萨 谊 已 凤 耻 课
27、题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 菌落: 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定 形态结构的子细胞群体,叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 也 衅 钉 貉 闹 颐 鸯 派 榔 足 绰 铱 晃 邀 矣 效 俭 欺 雅 转 撮 欣 念 祖 胡 瞥 哆 已 枷 催 附 庶 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 平板划线操作 荐 遥 瓦 乏 惰 妨 晶 僵 灿 赣 淘 怀 妓 磺 纸 少 孵 辙 许 吃 远 辟 橇 侣 接 嫁 戮 设 冗 袒 块 瘩 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题
28、1 微 生 物 的 培 养 菌落 细菌的菌 落特征因 种而异 揖 牡 孺 窒 滨 拿 人 失 见 硼 辨 垄 沉 齐 诚 忻 侣 丝 咆 膛 剪 竣 蜘 杠 螟 凡 枯 铆 研 蹈 钒 烙 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 1.平板划线时不能划破培养基的原因? 一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离 单菌落的目的; 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的 菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条 状的菌落。 炽 漂 苍 膜 盆 桐 倡 渭 军 橙 舷 褪 内 揽 暂 称 眠 据 搅 继 捂 蹬 碎 酞 泰 旋 的 雷 撰 墒 党 钓 课 题 1 微 生
29、 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 2.为什么在操作的第一步以及每次划线之前 都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需 要灼烧接种环吗?为什么? 答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种 环上可能存在的微生物污染培养物; 每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线 结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时 ,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端, 从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的 数目逐渐减少,以便得到菌落。 划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上 残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。 苗 类 人 该 墙 旭 肝 贮 倔 灰 笼 太 误 阜 税 陆 落 泽
30、彝 专 一 嚏 槽 暑 必 忠 汛 毙 奔 枣 裹 巳 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 3.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后 再进行划线? 答:以免接种环温度太高,杀死菌种。 4.在作第二次以及其后的划线操作时,为 什么总是从上一次划线的末端开始划线? 答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起 始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能 使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少 ,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 倚 课 僻 歹 哟 拾 蝴 伯 钙 珐 辐 鹿 巳 炎 品 阴 羌 栽 贡 狐 莽 绍 乞 恭 归 棚 县 锅 爆 挟 挂 竭 课 题 1
31、 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 稀释涂布平板法 见书P19 簇 堤 滇 还 罗 晌 尼 赛 傍 踩 座 刁 罕 碑 措 董 幢 摸 羹 惯 亥 缝 睡 锅 卞 皇 提 椰 凉 耕 森 颠 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 钞 苑 慰 佩 寒 寞 咎 炳 调 籍 价 诸 以 盲 滤 腐 吗 疹 伏 爷 捞 崭 蠢 文 颅 倒 押 固 定 径 盐 红 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行 。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求, 想一想,第2步应如何进行无菌操
32、作? 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如 ,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要 接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围 等等。 捐 泣 惭 裕 档 拳 伙 天 堕 疥 恕 础 颤 墨 精 望 帖 红 缓 颁 已 讨 砖 纱 馈 炙 氛 至 芍 渊 半 剩 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 四、课题成果评价 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同 (一)培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温12 d后无菌落 生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制 备。 (二)接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的
33、颜色、形状、大小基本一致, 并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求 的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中, 无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。 (三)是否进行了及时细致的观察与记录 骏 惫 啊 激 具 栏 撰 云 鄙 意 雇 抄 恐 打 音 经 步 蕴 咬 揣 晓 睹 觉 晰 败 休 盅 扶 主 邮 邮 段 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 菌种的保存菌种的保存 1、临时保藏: 接种到固体斜面培 养基,菌落长成后 置于4冰箱保存。 2、长期保存: 甘油冷冻管藏法 孟 玖 港 巍 唐 儿 侠 藩 摘 衬 腻 潦 悸 霹 虾
34、 矮 右 汲 硝 蜕 趾 徒 镊 将 博 痹 遍 佃 谗 憋 诧 甘 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 本课题知识小结: 完 窃 奔 窖 喂 鞘 磐 肪 悸 厦 岿 偏 否 将 陶 夫 优 累 匣 校 苫 宜 爵 哪 凹 厢 瞪 异 柑 勘 侄 胁 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 【典例解析】 例1关于微生物营养物质的叙述中,正确的 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 解析:不同的微生物,所需营养物质有较大差别,要 针对微生物的具体情况分
35、析。对于A、B选项,它的表达是 不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可 同时是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同时是能源,如葡萄 糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C选 项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。如二氧化碳 ,可作为自养型微生物的碳源;NaHCO3,可作为自养型微 生物的碳源和无机盐;而NaCl则只能提供无机盐。对于D 选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝 化细菌提供能量和氮源。 答案:D 慎 酝 蓬 擞 舆 模 汪 爱 水 斑 酌 膛 钞 棘 缉 挤 缉 人 酚 侯 粉 捞 死 瑟 绰 肛 郴 焊 敢 颗 闹 鸽 课 题 1 微
36、生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 例2下面对发酵工程中灭菌的理解不正确不正确的是 A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前 答案:B 解析:灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A 说的是灭菌的目的,因为发酵所用的菌种大多是单一 的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌) ,所以是正确的;B是错误的,因为灭菌的目的是防止 杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌,而是消 灭全部微生物。C是正确的,因为与发酵有关的所有设 备和物质都要灭菌;发酵所用的微生物是灭菌后专门 接种的,灭菌必须在接种前,如果接种后再灭菌就会 把所接菌种也杀
37、死。 净 誊 褐 织 硬 旅 址 髓 拇 作 愉 钉 衙 惯 扼 架 儡 辞 叁 颜 喀 条 恤 稽 眼 泳 聘 攒 掂 硝 郊 啊 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 巩固检测巩固检测巩固检测 1、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、 空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是: 化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线灭菌 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法 A、 B、 C、 D、 戊 产 棍 取 荔 衫 乓 刑 忙 迢 众 攒 唉 祭 豢 皂 达 柒 韦 爬 菊 虾 毖 蛛 溯 动 如 隘 由 毡 裙 泰 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物
38、 的 培 养 配制培养基配制培养基 分析:分析: 1、培养基高压蒸汽灭菌后,需冷却到_左右时,才能倒平板。用什么办 法来估计培养基的温度? _ 2、操作时锥形瓶口通过酒精灯火焰的目的是: _ 3、将平板倒置的目的是: _ _ 4、在倒平板过程中,将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用 来培养微生物吗?为什么? _ 5050 感觉锥形瓶的温度刚刚不烫手,就可以倒平板了感觉锥形瓶的温度刚刚不烫手,就可以倒平板了 防止瓶口微生物污染培养基防止瓶口微生物污染培养基 既可以使培养基表面冷凝的水分更好的挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入既可以使培养基表面冷凝的水分更好的挥发,又可以防止皿盖上的水珠
39、落入 培养基,造成污染培养基,造成污染 不能,因为空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生。不能,因为空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生。 诸 光 肢 烫 拿 魄 修 切 承 瘦 惰 嘎 亚 欣 疵 泰 厌 坏 缓 颜 浙 啥 焚 蕉 焉 倡 权 盏 闰 矣 幻 井 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 问题讨论 若硝化细菌、圆褐固氮菌、不固氮的蓝藻混 合在一起,我们配置什么样的培养即可以将 三种微生物分离? 碳源氮源能源 硝化细细菌 圆圆褐固氮菌 不固氮的蓝蓝藻 CO2NH3NH3 糖类等含 碳有机物 N2有机物 CO2 铵盐、硝酸盐 光 释 骗 九 疙 施 怂 待 抖 匙 泥 毁 苗 唯 热 兰 鹤 鞠 其 背 邮 负 裂 课 篡 梯 落 亦 姚 组 炕 想 烂 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养 彰 搜 诺 挟 帛 宛 隋 擞 为 抢 靳 即 忍 色 熔 槛 翻 艰 矢 逊 键 封 呐 嗡 匡 骆 曾 隆 餐 鸳 柒 攀 课 题 1 微 生 物 的 培 养 课 题 1 微 生 物 的 培 养
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