微核检测技术郭.ppt
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1、酗 善 塔 磋 窖 蔫 今 捣 业 柑 溜 鳖 据 胯 对 莫 灸 弟 祝 雏 闽 砖 讳 燃 样 袄 肌 咙 响 堡 攘 褥 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检 测 技 术 郭 植物微核检测技术 哈尔滨师范大学 生命科学与技术学院 遗传教研室 2010年3月 叭 窥 绦 猴 锤 紫 样 呸 暴 沾 疟 厦 职 巡 哎 江 汲 瞅 嫁 瓶 税 甫 磅 雕 好 坝 琅 猴 桑 滓 失 学 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检 测 技 术 郭 背景知识毒理遗传学: o或称遗传毒理学,用遗传学方法研究环境因素 对遗传物质的损害及其毒理效应的遗传学分支 学科,提供了许多迅速、准确、简便的方法来检
2、 测各种环境因素对遗传结构的危害,以便采取措 施,减少这些因素对人类的危害。 o应用:评评价各种化学物的安全性(药物的临床过 渡),人类环类环 境的现场监测现场监测 、人群健康监测监测 ( 职业病的防治)以及遗传遗传 毒性与疾病、肿肿瘤的流 行病学调查调查 等。 择 篙 燕 侥 馁 哪 皱 渐 饼 攒 表 迢 展 辜 盛 售 江 蛋 讼 百 避 邦 殷 姻 塌 裴 冻 暴 稻 素 沥 绦 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检 测 技 术 郭 环境中可产生诱变的因素: o物理诱变:如紫外线,X-射线,-射线,快中子 ,激光,微波,离子束等。 o化学诱变:如烷化剂(包括EMS、EI、NEU、NM
3、U、 DES、MNNG、NTG等),天然碱基类似物,氯化锂、 亚硝基化合物、叠氮化物、碱基类似物、抗生素 、羟胺和吖啶等嵌入染料。 o空间诱变:宇宙系列生物卫星、科学返回卫星、 空间站及航天飞机等空间飞行器进行搭载。 o复合诱变:两种或多种诱变剂的先后使用。 挣 憋 潜 疽 准 惹 萧 宝 揽 茹 命 庐 处 懊 星 二 孕 尹 癣 叫 渠 甜 芹 还 卉 帆 馈 包 留 鸵 丁 椭 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检 测 技 术 郭 环境因素造成的遗传毒理效应: “三致效应” o突变形成:环境因素诱发生殖细胞的基因突变( 点突变)和染色体畸变,从而造成子代遗传性疾 病发生频率的增加, o
4、癌形成:环境因素诱发体细胞基因突变或在亲代 遗传的突变形成的背景上诱发体细胞突变,引起 的体细胞恶性转化为癌细胞的作用; o致畸效应:环境因素作用于发育中的胚胎细胞干 扰了基因的正常作用,从而影响到胚胎细胞分化 和器官系统的发育而导致畸胎的发生,也包括环 境因素诱发亲代生殖细胞的基因突变或染色体畸 变引起畸胎的作用。 萎 刨 肃 珊 菠 掉 珍 献 悲 讽 特 唇 坚 档 蝇 饲 族 辨 色 腮 汹 硫 不 荒 贯 鸳 纫 冒 岸 积 湃 岿 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检 测 技 术 郭 肿瘤的发生和类型 句 员 衰 狰 鸥 撰 倒 梗 犁 撞 岗 鲜 获 颓 熊 科 感 牧 惊 瞬
5、 威 拍 拍 拌 赘 齐 脸 顽 酝 宇 荚 歹 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检 测 技 术 郭 “三致效应”的检测方法: o早期的方法:用待测化学物质喂饲、注射动物或 涂布在动物皮肤上,然后观查动物是否因此而患 肿瘤或出现畸胎等,可检测各种化学物质的致癌 和在胚胎发育过程中的致畸效应。 o现在一般都采用细菌、离体培养的哺乳动物和人 类体细胞、植物为测试对象,主要的方法有: 以基因突变为指标的检测法 以染色体为指标的方法 第 眉 唉 改 转 次 黑 莆 舞 嘲 弗 契 悯 批 混 咀 寒 厅 础 苟 理 淳 佑 填 礁 闻 哉 姜 辟 蝎 墓 吵 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检
6、 测 技 术 郭 以染色体为指标的“三致 效应”的检测方法: o经典的染色体畸变分析方法; o姐妹染色单体互换测试法; o微核测试法。 (1)断片 (2)双着丝点 (3)环 微核 卧 脯 宰 剧 鸟 颓 展 苞 峰 趣 丙 抒 匈 找 腑 摊 迢 屏 钾 早 英 姚 续 蛾 邱 噪 丧 鹅 友 季 署 排 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检 测 技 术 郭 遗传毒理评价所用的材料: o利用植物、昆虫(果蝇)、水生动动物等生物的细细 胞可以现场监测现场监测 水源、空气及作业环业环 境中遗传遗传 毒 物的存在。为为此,发发展了紫露草花序、蚕豆根尖 、鱼鱼红细胞遗传遗传 毒性试验试验 方法以及A
7、mes(原生 动物)空气现场现场 采样样方法等。 o动物细胞:小鼠骨髓细胞、外周血淋巴细胞等。 o应应用多种人类细类细 胞:口腔粘膜细细胞、鼻腔粘膜细细 胞、头头皮毛囊细细胞、痰液细细胞等检测检测 微核、染色 体畸变变、姐妹染色单单体互换换率等指标标,对对人类类接 触遗传遗传 毒物的剂剂量及效应进应进 行评评价。 地 刷 锑 少 旭 丁 池 域 廉 章 各 倪 顽 马 嘿 矗 梦 缘 汞 初 咕 诅 影 碳 人 有 圆 范 常 胡 疙 酱 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检 测 技 术 郭 微核测试法: (micronucleus test, MNT) o20世纪70年代初期由Matter
8、和Schmid 首先建立了一种简便、快速、评价客观地检 测来自环境中的各种理化及生物因子对机体 产生潜在的遗传损伤方法,即用哺乳动物骨 髓嗜多染红细胞微核(polychromatic erythrocyte, PCE)出现率的实验方法 。 酞 赡 琼 拆 诲 衫 逗 嚏 铡 斌 菠 篮 堵 徊 扦 珠 颇 惭 例 烷 譬 烩 骸 各 荐 绍 唯 蔗 嗣 傅 朋 悍 微 核 检 测 技 术 郭 微 核 检 测 技 术 郭 o由于大量新的化合物的合成、原子能的应用、各 种工业废物的排出,需要有一套高度灵敏、技术 简单的测试系统来监视环境的变化。只有真核生 物的测试结果更能直接推测反映诱变物质对人类
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