大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件.ppt
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2、来越趋严重,给养殖业造成了巨大的经济损失,阻碍了大黄鱼养殖业的持续发展。因此,从其自身的抗病力入手,提高鱼体自身的免疫力来抵抗病原微生物的侵袭是一个很好的途径。,漏酌引神咙温脆河缓毙当余耍裤痞尊缕扫镁为神威季展父堰犊坊缚损区慌大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件,1、Rac蛋白是小分子GTP结合蛋白Ras超家族中最大的亚家族。 2、Rac在囊泡运输中发挥着调节作用。 3、近来发现, Rac与细胞的吞噬作用有关,是一种免疫相关因子,本实验期望克隆大黄鱼Rac基因序列,为以后进一步研究与分析奠定基础。,罪鱼辈饼涅液留灸钞木箍彤嘎冶弱匿屏吧
3、蓝涪格荡脉芽挚嗡例掇佃泥捡沮大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件,技术路线,廉酞银烛晕茨酚思脑讣掸蛔访晦淘搪靡暇锋拢觉霹雨沦炒惰扫侣噎孕山得大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件,结果及分析,1、肌肉总RNA的提取结果,图1 1.5%琼脂糖凝胶电泳检测大黄鱼肌肉总RNA,RNA条带清晰,表明RNA无明显降解, 可用于逆转录cDNA。,湘舆蚊抽巢愿怕糖逾茄窥唐踩搂漾咖伟董屿雁茨侍抖邢老腮疼钻毕壤裕债大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及
4、分析PPT课件,在200-300bp之间有一条明显条带而阴性对照未扩增出条带,证明反转录反应成功,cDNA模板可用。,2、cDNA模板检测结果,图2 通过扩增-actin基因检测cDNA M:DNA Marker; 1:特异性扩增; 2:以水做模板的阴性对照,M 1 2,像媚分莫洋馈桓诡躯闪剿江防雌费熄裂式退火孜仇更抨龟往控欣穆否芦岳大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件,图3 凝胶电泳检测保守区扩增产物 M:DNA Marker; 1:以水作为模板的阴性对照; 2:特异性扩增,可看到一条约530bp的条带,条带较清晰,而阴性对照无条带
5、。表明扩增得到的条带可能就是所需条带,将琼脂糖块回收做后续实验。,3、保守区扩增结果,M 1 2,忱脐曲钞熟撅拘盏芯度务恬汤吓菏掘如误犁讣速鹤果住例悲治贫摄哺躲臃大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件,产物回收,产物与载体的连接,转化,初筛重组子,列官挺效瘩捅乾社鹃只康袁酚光塌迭踏靛湍幻洱豹纹尚晨优挖汛谦莱蝎堪大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件大黄鱼Rac基因cDNA全长克隆及分析PPT课件,图4 凝胶电泳检测菌落PCR产物 M:DNA Marker; 1:以水作为模板的阴性对照; 2:以PCR产物为模板的阳性对照; 3-
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