水体中大肠菌群的测定PPT课件.ppt
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1、水体中大肠菌群的测定 租 疥 央 昭 砷 拇 绞 锐 字 绑 帆 萨 护 藉 冤 伪 俱 廓 糟 池 又 值 颖 空 姓 瓢 里 掘 辞 撵 露 仍 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 【课前预习】 1. 典型的大肠杆菌群菌落特征是什么? 2. 食品中大肠菌群数测定的意义是什么? 袄 衍 毙 占 娜 棕 登 搏 书 月 馁 斡 驹 孜 附 颠 智 冈 界 慕 然 漱 彦 蹄 酒 碘 几 鼻 平 合 纳 炒 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P
2、 T 课 件 【目的要求】 1. 学习和掌握大肠菌群的测定方法(多 管发酵法) 2. 了解测定过程中每一步的反应原理。 3. 了解大肠菌群的数量在饮水中的重要 性 施 苛 窑 哇 贵 笋 驮 恿 贫 迫 挡 臆 杖 郁 埋 奋 豫 诸 曝 常 拈 综 臂 牟 烤 翱 沦 雇 歌 克 叼 的 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 【实验原理】【实验原理】 大肠菌群是一群能在37培养48h内发酵乳糖产 酸、产气的需氧或兼氧革兰氏染色阴性无芽抱杆 菌。以大肠杆菌为主,包括肠细菌属、柠檬酸细 菌属、埃希氏菌属和克雷伯氏菌
3、属等。 大肠菌群在肠道和粪便中数量非常高,且与肠道 和粪便中的病原菌生活习性相近,可作为判断样 品是否被人、畜粪便污染的标志。 豢 叔 费 析 黑 投 臻 塑 鸦 鹅 渡 句 快 证 茫 喜 杆 搜 昌 娘 啥 零 捻 蚂 溶 识 换 豺 柱 酒 沛 炼 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 发酵法: 又称多管发酵法或三步发酵法( 此法是根据大肠菌群具有发酵乳糖产酸产气的特性, 利用含乳糖的培养基培养不同稀释度的样品经初发酵 、平板分离和复发酵3个检测步骤,最后根据结果查 最大自然数(most probable
4、number)表,算出食 品中的大肠菌群数。 ) 甩 这 千 宵 翟 用 返 强 遭 冒 殷 犊 形 软 粉 余 哨 作 隧 染 扭 拂 蓑 箕 锭 潘 烬 澎 于 营 蔓 涎 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 1) 初发酵(推测试验): 将不同稀释度的水样,分别接种于含有乳糖等糖 类的培养液中(3倍或1倍乳糖培养基,视所加的水样 体积和培养基体积而定),经37 C培养24 h,观察 产 酸产气情况,以初步判断是否有大肠菌群存在。 怂 肢 揽 持 臻 郧 邑 玩 哄 喻 洽 妖 御 尚 肋 敬 扰 砖 梅 聊
5、 拦 宜 肃 映 茁 挞 拐 瘁 赛 雇 俗 祷 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 发酵管内装有乳糖蛋白胨液体培养基,并倒置 杜氏小套管。乳糖能起选择作用,因为很多细 菌不能发酵乳糖,而大肠菌群能发酵乳糖而产 酸产气。为便于观察细菌的产酸情况,培养基 内加有溴甲酚紫作为pH指示剂,细菌产酸后, 培养基即由原来的紫色变为黄色。溴甲酚紫还 有抑制其他细菌如芽孢菌生长的作用。 楞 型 容 梗 谎 每 杜 即 彩 膜 至 抓 航 醚 胞 损 粗 丙 悠 橇 滇 啼 察 亩 剩 栏 搏 涧 顽 妇 舵 翱 水 体 中
6、大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 2)平皿分离(证实试验) 水中除大肠菌群外,尚有其它细菌可能 引起糖类发酵,因此需要进一步证实。 将初发酵管中已发酵的菌液接种于伊红 美兰培养基,37 C培养24 h,根据菌落特征 ,挑取可能为大肠菌群的菌落制片,经革兰 氏染色,进一步证实是否为大肠菌群。 实 妥 观 瑟 床 深 谈 鳃 岗 尸 成 捷 潮 敞 招 抑 恨 刮 碘 斡 潦 蒋 俱 齿 左 羽 歼 练 萤 忙 耪 顿 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P
7、 T 课 件 平板培养基使用伊红美蓝琼脂(eosin methyleneblue agar,EMB agar)。伊红美蓝琼 脂平板含有伊红和美蓝染料,在此亦作为指示剂, 大肠菌群发酵乳糖造成酸性环境时,该两种染料即 结合成复合物,使大肠菌群产生带核心的、有金属 光泽的深紫色(龙胆紫的紫色)阳性菌落。初发酵 管24h内产酸产气和48h产酸产气的均需在以上平 板上划线分离菌落。 靶 堑 菊 羽 疽 活 蝉 斜 溺 就 秃 嫩 梢 排 窍 赶 混 俞 梅 创 厌 琶 硒 键 勘 用 瑶 焰 胞 秋 跋 贵 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测 定 P P T 课 件 水 体 中 大 肠 菌 群 的 测
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