中国胃癌HER2检测-指南解读.ppt
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1、中国胃癌HER2检测指南解读(2011版),概述,本指南推荐IHC与FISH和(或)DSISH相结合的检测策略 胃癌有必要进行准确的HER2检测 HER2状态检测首先选用免疫组织化学法(IHC) IHC 3+的病例视为HER2阳性 IHC 2+的病例建议进一步行原位杂交(ISH:FISH和或DSISH)检测,IHC 2+/ISH+的病例视为HER2阳性 IHC 1+和IHC 0 病例,IHC 2+/ISH - 病例视为HER2阴性 胃癌HER2检测应在有能力的实验室进行 检测质量取决于标本的采集、处理过程、IHC/ISH 检测方法和评判标准的执行,.,3,问题一,1. 请问您所在的医院胃癌HE
2、R2检测是否属于常规检测项目? 是 否 不清楚,.,4,问题二,请问您所在的医院,由谁决定是否做胃癌HER2免疫组化检测? 病理科 外科 肿瘤内科 消化内镜室,.,5,问题三,请您对多学科合作对胃癌HER2检测的重要性打分(0-5重要性逐渐递增),请按投票器选择 0 1 2 3 4 5,胃癌HER2检测,切片,脱水 包埋,固定,HER2检测的相关流程,切片,检测,判读,标本 收取,.,8,问题四,贵单位胃癌手术标本送到病理科处理的时间? A 30分钟内 B 1小时内 C 2小时内 D 2小时 E 不清楚,.,9,问题五,贵单位手术标本固定时间? 不固定直接取材 固定时间在8小时内 固定时间在1
3、2小时左右(过夜) 固定时间12-24小时 不清楚,标本类型,原发病灶的手术切除标本 原发病灶的胃镜活检标本 建议取6-8块,以获得足够的样本组织,多点活检对准确的检测有必要 切除标本离体后2030分钟内进行标记、切开、固定等初步处理后,及时送病理科 活检标本的大小2x2x2mm3 原发灶活检组织、手术切除组织皆有的病例,建议使用手术切除组织进行检测,标本采集,.,11,问题六,贵单位送检标本采用何种固定液? 不用固定液,直接送病理科 10%福尔马林固定液(蒸馏水配) 10%福尔马林固定液(中性缓冲液配) 10%甲醛固定液 不清楚,标本固定,采用新鲜配制10%中性缓冲福尔马林作为固定液 固定液
4、的量应为组织的10倍 手术切除标本的固定时间为848h (至少1h/mm组织) 活检标本的固定时间不超过24h (至少1h/mm组织) 不宜使用其它固定液,非10%中性缓冲福尔马林制剂可能会妨碍IHC和ISH检测的可靠性 不宜用微波快速固定组织,规范的标本固定是HER2检测质量的保障;保存良好的组织形态,防止细胞内蛋白和核酸的丢失,标本准备,固定1小时,固定52小时,固定4小时,固定2周,固定时间影响HER2染色结果,固定22小时,图片由 of A Morey, St Vincents Hospital, NSW, Australia提供,固定较差示例:乳腺癌HER2 IHC检测,固定较差会导
5、致染色结果的异质性 胞质染色可能是由固定较差导致,图片由 W Hanna提供,固定较差示例:胃癌HER2 IHC检测,固定不完全会导致假阳性检查结果 胞质染色可能由于使用了不恰当的固定方式,图片由Targos Molecular Pathology.提供,固定较差示例:HER2 ISH检测,图片由 Abbott/Vysis.提供,固定不完全 - SISH,“空核”,固定不完全导致探针信号较弱或缺失,过度染色会导致持续性自发荧光 探针信号可能较弱或缺失,HER2检测,HER2过表达的检测,HER2扩增的检测,免疫组织化学染色方法(IHC) 自动化,原位杂交方法 (ISH) FISH Dual S
6、ISH,实验室总体要求,应当在有条件的实验室进行,拥有试验所需的仪器和设备及空间条件 实验室掌握包括标本的制备、抗体的选择、抗原修复方法及其它相关技术;探针的选择、检测预处理方法及其它相关技术 实验室经过严格的内部和外部质量控制程序验证,建立完善的实验室标准操作流程(SOP) 实验室技术员具备相关资质及经过合格培训,HER2检测-IHC,IHC方法 试验方法根据实验室条件可以选择手工染 色、半自动染色和全自动免疫组化染色 建议使用全自动染色方法,建议使用我国相关部门(SFDA)批准的试剂盒 自行组配和分装的抗体必须经过严格的内部和外部质 量控制程序验证,并与权威机构批准的检测试剂盒进 行比对,
7、以保证检测结果的可靠性,IHC抗体,结果判读和分析,普通光学显微镜,荧光显微镜,病理医生需要经过培训 IHC评分标准和乳腺癌有所不同 样本:活检组织和切除组织有所不同 观察:高异质性需要全面观察所有肿瘤组织 沟通:结果不确定时需要与肿瘤科医生沟通,IHC判读标准(参照ToGA经验,所有图片来自SCC),0 无反应或肿瘤细胞膜染色10%,1+ 10%肿瘤细胞微弱或隐约膜染色, 细胞膜仅部分区域着色,2+ 10%肿瘤细胞弱到中度的完全或 细胞基底部和两侧边膜染色,3+ 10%肿瘤细胞完全性或基底部和 两侧边膜强染色(对3+的病例同时 表明百分率,注明是否有异质性),IHC结果判读时应注意:细胞质着
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- 中国 胃癌 HER2 检测 指南 解读
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