食品中维生素C的检测方法.doc

食品中维生素C的检测方法维生素C是机体正常生命活动所必需的有机化合物，作为一种理想的保健食品功能因子，被添加于各种保健食品及饮料中，因此对维生素C含量测定方法的研究也较多。目前常规的维生素C含量测定方法有紫外分光光度法、碘量法等，但是维生素C具有较强的还原性，在中性和碱性环境下不稳定，遇热迅速分解，检测方法操作步骤复杂，具有试剂和试样溶液不稳定、灵敏度低、费时等缺点，尤其是有颜色的试样，其溶液颜色背景干扰大，对最终数据有影响。高效液相色谱法具有高效、快速、稳定、灵敏度高的特点，能在较短时间内完成测定。一、实验目的和要求1、学习高效液相色谱外标法定量定性分析方法；2、熟悉高效液相色谱的分析操作规程；3、学习高效液相色谱检测食品中的维生素C的方法。二、实验原理在以维生素C标准品保留时间定性，采用外标法定量维生素C含量。X=(A2×C)/A1（X为样品中维生素C的含量单位为ug/mL，单位；A1为标样维生素C的峰面积；A2为样品中维生素C峰面积；C为维生素C标准液质量浓度。）三、仪器、试剂1、仪器：岛津高效液相色谱仪、超声波清洗仪、超纯水制备仪、千分之一天平、离心机2、试剂：维生素C标准品、醋酸、超纯水、橙汁四、实验步骤1、标准液的制备：维生素C标准溶液配制:准确称取0.1219g维生素C，用0.1%醋酸溶液溶解，超声波振荡5min，再用0.1%醋酸定容至50mL，为标准溶液。分别吸取标准溶液0.05，0.10，0.50，1.00，2.00，3.00mL于10mL容量瓶中，用0.1%醋酸溶液定容，进样测定。2、样品的前处理：试样处理试样为液体时，吸取适量体积试样原液用20mL0.5%醋酸溶液作为稀释液，再用水定容至100mL;试样为固体时，称取试样1g用0.1%醋酸溶液溶解(按照试样液中维生素C含量0.5700mg/L换算)，超声波振荡5min，再用0.1%醋酸定容至100mL，过滤，用0.45m滤膜过滤，进样。3、实验条件的选择(1)色谱柱C18(250mm*4.6mm)(2)流动相含甲醇：含0.1%醋酸的水（10：90），流量1mL·min-1(3)检测器紫外检测器，262nm(4)进样量20µL4、测定(1)将配制好的流动相甲醇、0.1%醋酸的水置于超声波发生器上脱气20min。(2)根据实验条件，将高效液相色谱仪按照操作步骤调节至进样状态，待仪器液路和电路系统达到平衡时即可进样。(3)依次分别吸取20µL的标准混合使用液和未知试液进样，记录各色谱图。五数据处理及分析（1）定性分析（2）定量分析及计算回收率