甲状腺自身抗体.ppt

甲状腺自身抗体n自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid diseases，AITD)存在多种甲状腺自身抗体，这些抗体在AITD 的发生、发展中起重要作用。最主要的是抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibody，TGAb)和抗甲状腺过氧化物酶抗体(anti-thyroperoxdase，TPOAb)，促甲状腺素受体抗体(TRAb)，抗钠碘同向转运体抗体(anti-NIS)。近来又发现一些新的甲状腺自身抗体如抗GP330抗体、抗Gal抗体等。Contents目录01020304生物学性状致病机制检测适应征临床意义 抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)n 抗甲状腺球蛋白抗体（TGAb）分IgG1、IgG2、lgG3、IgG4 4个亚类，以IgG1和IgG4占优势，但以IgG2功能活性最高。TGAb的靶抗原是甲状腺球蛋白，甲状腺球蛋白是甲状腺组织的主要蛋白成分，占总蛋白7O%8O%。部分健康人血清中的抗甲状腺球蛋白抗体为针对甲状腺球蛋白自然表位的多克隆抗体，而AITD 患者体内的抗体为针对甲状腺球蛋白某一个特殊表位的特异性抗体。抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)n抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）属IgG 类免疫球蛋白，以IgG1及IgG4亚类为主。TPOAb的靶抗原是人甲状腺过氧化物酶(hTPO)。TPO是甲状腺激素合成过程中重要的酶，它可以催化碘的氧化，甲状腺球蛋白上酪氨酸的偶联直至最终生成甲状腺激素T3和 T4。除了具有重要的生理学功能外，hTPO 还有着重要的免疫学特性。TPO有一定的种属和器官非特异性，人的抗TPO可与猪的TPO反应。促甲状腺素受体抗体（TRAbs）n促甲状腺素受体抗体（TRAbs）亦称TSH结合抑制免疫球蛋白(TBII)。在临床实践中，GD患者血清中检出的TRAbs一律视为甲状腺刺激抗体(TSAb)，其合理性尚值得商榷。TRAbs阳性提示存在针对促甲状腺素受体（TSHR）的自身抗体。但无法说明该抗体具有的功能。事实上，TRAbs有TSAb和甲状腺刺激阻断抗体(TSBAb)2种亚型。TSAb具有刺激TSHR、促进甲状腺滤泡分泌、致甲状腺毒症的功能，是GD的致病性抗体。越来越多的证据表明TSAb通过活化TSHR而介导GD患者甲状腺激素的过量分泌。TSBAb对TSHR具有一定的亲和力。可占据TSHR，并阻断TSH与TSHR结合从而导致甲减也是部分自身免疫性甲状腺炎患者发生甲减的致病因素。TGAb致病机制n 体外实验证实TGAb也在ADCC中起一定作用。TGAb与甲状腺球蛋白(TG)结合后，可以通过Fc受体与结合抗体的相互作用激活自然杀伤(NK)细胞而攻击靶细胞，导致甲状腺细胞破坏。血中TG的减少可以降低机体免疫系统对TG的暴露，因而对TG 的自体免疫反应减弱。另一方面，由于甲状腺激素合成依赖TPO对天然TG的识别，因此TG减少必然导致T3、T4合成减少。值得注意的是，分泌TGAb的B淋巴细胞主要存在于甲状腺内，当甲状腺内TGAb积累至一定浓度时，不仅TG分解增加，也可导致其他与TG无关的蛋白发生水解，从而可能造成全身性的蛋白分解作用增强及组织损害。TPOAb的致病机制n TPOAb的致病作用有抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。由于TPO 被隔绝于甲状腺细胞滤泡腔的边缘即甲状腺细胞顶部，因此，在TPOAb(也包括TGAb)参与ADCC之前，抗体为了接近甲状腺抗原并与之结合可能需要依赖某些类型的甲状腺细胞损伤，如T细胞介导的细胞损伤。甲状腺细胞发生破裂、极性倒置或B淋巴细胞可以进入甲状腺滤泡及血清蛋白到达甲状腺滤泡里的胶质，所以抗体介导的ADCC对甲状腺细胞损伤作用发生的前提是甲状腺细胞结构的破坏。nTPOAb可以结合补体，在AITD的甲状腺里存在丰富的激活补体，补体激活产物如膜攻击复合物(MAC)可以引起甲状腺细胞损伤。同时，甲状腺细胞可以通过表达CD59及MAC抑制蛋白而对抗补体介导的细胞溶解，这些表面蛋白可以防止终末补体产物插人甲状腺细胞膜，而该功能又可被细胞因子上调，所以补体引起的甲状腺细胞杀伤是MAC形成的必然的最终结果。TGAb的检测n TGAb的检测 最初用琼脂扩散法，后用对流免疫电泳法，此法简便易行，但敏感性不高。后来建立了间接血凝技术、间接荧光抗体技术，这些技术只能进行定性或半定量检查。所以，20世纪70年代逐渐建立了放射免疫分析(RIA)、E1ISA、化学发光、电化学发光等技术，这些技术成为常用的检测方法。其检测的原理及方法与TPOAb类似。TPOAb的检测n TPOAb的检测 主要是双抗液相放免法和TPO单抗固相放免法。另外EIISA法是以TPO为抗原包被酶标板，与人血清抗hTPO抗体特异结合，在加入碱性磷酸酶标记的羊抗人IgG抗体，进行二次抗原抗体反应，再加入显色底物pNPP充分显色后，在酶标仪上用波长405 nm 滤光片测定OD值。还有化学发光免疫分析方法，如酶促化学发光、吖啶酯标记物直接发光，电化学发光。其中微粒子酶免疫分析(MEIA)方法集抗原抗体反应的特异性和荧光反应的敏感性于一体，减少了非特异性干扰，化学反应简单、快速、灵敏度高，且具有很好的重复性。n1974年，Rees Smith通过用125 I标记TSH竞争性抑制TSHR与TRAbs的结合。开创了TRAbs的放射免疫测定法，这也是目前在临床实践中被广为采用的检测方法。n此后，3种主要的TRAbs测定方法相继问世。n竞争测定法：通过被标记的牛TSH或单克隆TSAb对结合位点的竞争测定TRAbs，即TBII；n生物测定法：通过计数自身抗体与TSHR结合后产生的环磷酸腺苷(cAMP)量来鉴别TRAbs的亚型(TSAb)，目前仅用于科研；n直接结合测定法：即测定TRAb和TSHR抗原抗体复合物的总量。但由于TSHR结构复杂以及结合位点的异质性，该方法相对繁琐。竞争测定法以其敏感性高、试剂价格低廉以及报告迅速(45 h)等优势，正逐步取代生物测定法。临床意义n1、Graves病(GD)人体内也可出现少量的TGAb、TPOAb，随着年龄的增长，抗体的滴度也逐渐升高。但这部分抗体是多克隆的，而自身免疫性甲状腺疾病患者体内的抗体足大量的某一种单克隆抗体。GD又称毒性弥漫性甲状腺肿，和突眼性甲状腺肿是甲状腺功能亢进(甲亢)的最常见类型，约占全部甲亢的90%左右，这类患者体内的TGAb的阳性率可达63%，TPOAb的阳性率为42.2%。有研究发现，TPOAb与甲亢患者的临床转归之间存在密切关系，甲状腺功能明显改善组，抗体滴度不高，而甲状腺功能无明显改善组，抗体显著增高。n2、桥本甲状腺炎 该病90%为女性，好发年龄为3050岁，患者血中多可测出高滴度的抗甲状腺抗体，其亲属中的检出率也可达50%左右。该病患者血清内主要为TPOAb、TGAb等破坏性抗体。TGAb的检出率为809%，TPOAb为77.7%。鉴别诊断 n 由缺碘等原因所致的代偿性甲状腺肿大的患者进行检测显示，其TGAb、TPOAb等抗体含量都在正常范围内，可见TGAb和TPOAb在鉴别诊断AITD和非AITD中具有重要的临床价值。除甲状腺疾病外，在其他一些自身免疫性疾病，如1型糖尿病、慢性肾上腺皮质功能减退、干燥综合征、恶性贫血及系统性红斑狼疮等疾病患者的体内也可出现TGAb、TPOAb等抗体。结 语n 甲状腺自身抗体对临床疾病诊断的作用越来越得到大家的认可。虽说如今的检测方法敏感度和特异性都有了很大的提高，但还没有统一标准，还不能检测到亚型。所以说甲状腺自身抗体的研究有待进一步深入。甲状腺过氧化物酶抗体（甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAbTPOAb）甲状腺球蛋白抗体（甲状腺球蛋白抗体（TGAb）检测适应症检测适应症：-未知病因的未知病因的TSHTSH升高、甲状腺肿大、甲亢升高、甲状腺肿大、甲亢-可疑多腺体自身免疫性疾病可疑多腺体自身免疫性疾病-自身免疫性甲状腺疾病的家族性评价自身免疫性甲状腺疾病的家族性评价-对干扰甲状腺合成或免疫的因素评估对干扰甲状腺合成或免疫的因素评估-产后甲状腺炎（孕期或产后）危险评估产后甲状腺炎（孕期或产后）危险评估 在自身免疫性甲状腺疾病中在自身免疫性甲状腺疾病中TGAbTGAb价值小于价值小于TPOAbTPOAb 阳性率及滴度：阳性率及滴度：桥本氏甲状腺炎、产后甲状腺炎桥本氏甲状腺炎、产后甲状腺炎Graves Graves 病病 促甲状腺激素受体抗体（促甲状腺激素受体抗体（TRAb）多克隆抗体多克隆抗体(包括包括)-促甲状腺素受体刺激抗体促甲状腺素受体刺激抗体(TSAb)-促甲状腺素受体阻断抗体促甲状腺素受体阻断抗体(TSBAb)-甲状腺生长刺激免疫球蛋白甲状腺生长刺激免疫球蛋白 (TGI)-促甲状腺素结合促甲状腺素结合-抑制免疫球蛋白（抑制免疫球蛋白（TBII）TSAb+TSH受体 甲状腺细胞增生 TSBAbTSH受体 甲状腺激素合成及分 泌增加 TGITSH受体 甲状腺激素合成及分 泌下降TRAb检测适应症：检测适应症：-甲亢、甲减和其它甲状腺功能障碍病因鉴别甲亢、甲减和其它甲状腺功能障碍病因鉴别-甲状腺相关性眼病评估甲状腺相关性眼病评估-孕妇合并孕妇合并Graves 甲亢随访（包括新生儿）甲亢随访（包括新生儿）-Graves 甲亢随访甲亢随访价值：价值：GravesGraves病病 桥本氏甲状腺炎、产后甲状腺炎桥本氏甲状腺炎、产后甲状腺炎谢 谢