血常规检查 (2).ppt

血常规检查,指对外周血中红细胞和白细胞及血小板数量和质量的化验检查，包括RBC计数及其平均值测定、Hb测定、WBC计数及其分类计数（DC）、血小板计数及其均值测定，同时注意观察血涂片中红细胞及白细胞、血小板形态有无异常，某些情况下应注意观察有无异常细胞或寄生虫等。,血常规检查 （blood routine examination）,人体血液的组成,一、红细胞检查 常用的红细胞检查包括红细胞计数（RBC），血红蛋白测定（Hb），红细胞形态观察，红细胞平均指数计算，网织红细胞计数（Ret），嗜碱性点彩红细胞计数，红细胞沉降率测定（ESR）等。,红细胞的生理特性和功能,生理特性： 可塑变形性 悬浮稳定性 渗透脆性 生理功能： 运输功能 调节酸碱度 免疫功能 C3b受体,红细胞计数,检测原理 1）显微镜计数法：用等渗稀释液将血标本稀释一定倍数，滴入血细胞计数池中，显微镜下计数一定区域内的红细胞数，经换算得每升血液中红细胞数量。 2）血液分析仪法：多采用电阻抗法，也有采用流式细胞术激光检测法。,电阻抗法原理,血细胞是不良导体，当悬浮在电解质溶液中的血细胞通过计数小孔时，小孔感应区内电阻增加，引起电压变化产生了脉冲信号，脉冲的大小与细胞体积有关，细胞体积大，脉冲也大。脉冲数量代表细胞数量不同细胞体积不同，因此根据脉冲的大小和数量进行血细胞计数。,血细胞,激光流式细胞技术,当一定量的血细胞被吸入并经过特殊定量的试剂作用后，血样经喷嘴注入充满稀释液的圆锥形流动室中。在稀释液形成的鞘液包裹下，细胞单个排列成行地穿过流动室的中央。当悬浮在鞘液中的血细胞经过二次加速后通过激光检测区时，血细胞受到激光束的照射，产生的散射光性质与细胞大小、细胞膜和细胞内部结构的折射率有关。低角前向散射光反映了细胞的大小，高角前向散射光则反映细胞的内部精细结构和颗粒物质。光电二极管接收这些散射光信号并将其转化为电脉冲，根据采集到的这些电脉冲数据，可以得到血细胞大小及细胞内部信息的二维分布图，称为散点图，横坐标反映细胞的内部复杂度信息，纵坐标反映细胞的体积。,红细胞数 成年男性（4.05.5)×1012/L 成年女性（3.55.0)×1012/L 新生儿 （6.07.0)×1012/L,正常参考值,生理性变化,新生儿，男性，高原居民，精神紧张，剧烈运动后红细胞和血红蛋白均增加。 妊娠中、晚期孕妇和老年人红细胞数量和血红蛋白均减少。,病理学变化,增高：真性红细胞增多症，慢性心肺疾病，异常血红蛋白病，肾上腺皮质机能亢进，呕吐、高热、多尿、腹泻、多汗、大面积烧伤等因素造成的暂时性血液浓缩。 减少：各种原因引起的贫血,二 血红蛋白测定(Hb),Hb是在人体有核红细胞和网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质，由四条珠蛋白肽链每条可结合一个亚铁血红素形成的四聚体，可结合氧和二氧化碳。每克血红蛋白可携带1.34ml氧。,测定方法： 1、全血铁法 2、比重法、折射仪法 3、血气分析法 4、比色法,常用的比色法：,氰化高铁血红蛋白检测法（HiCN） 十二烷基硫酸钠血红蛋白 (SDS-Hb) 碱羟血红蛋白测定法 （AHD575） 叠氮高铁血红蛋白测定法（HiN3),氰化高铁血红蛋白检测原理 （HiCN）,除SHb外，Hb被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再与CN-结合，生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白HiCN，吸收峰为540nm。毫摩尔消光系数为44 L·mmol-1 ·cm -1 。因此根据标本的吸光度，即可 求得血红蛋白总量(不含SHb)。,血液分析仪法 ： 两种稀释液 改良氰化高铁血红蛋白法 非氰化高铁血红蛋白法 如SLS-Hb,参考值：,成年男性 120 160g/L 成年女性 110 150g/L 新生儿 170 200g/L,临床意义：,与红细胞计数相似，判断贫血程度优于红细胞计数。 1、在某些贫血，红细胞和血红蛋白减少程度可不一致，同时测定红细胞数和血红蛋白量以作比较，对诊断更有意义。 2、影响检测结果因素：血液总容量改变 全身血浆容量改变,临床上根据Hb程度将贫血分为,轻度 Hb低限90g/L 中度 90-60g/L 重度 60-30g/L 极重度 30g/L,红细胞形态检查,贫血导致红细胞发生形态学变化：细胞大小、形状、染色性质和内含物的异常。 方法：显微镜分析法 计算机图像分析 血液分析仪法 临床意义：正常红细胞形态 双凹圆盘形，大小均一，平均直径7.2微米，中央部位为生理性淡染区。 异常红细胞形态 大小、形状、血红蛋白含量，结构和排列异常。,1）大小异常 小红细胞10um 巨幼贫 、红细胞生成加速 溶贫、肝病、脾切除 巨红细胞15um巨幼贫、肝病 细胞大小不均 直径相差一倍以上，巨幼 贫,2）形状异常 球形、椭圆形、靶形、口形 镰形、棘形、锯齿、泪滴形 3）Hb含量异常 低色素性 缺铁贫 高色素性 巨幼贫、溶贫 嗜多色性 各种增生性贫血 细胞着色不一 铁粒幼红细胞 4）红细胞异常结构 豪-焦小体： 脾切除、巨幼贫、溶贫 卡波环 ： 恶贫 白血病脾切除、巨幼 贫、溶贫 嗜碱性点彩红细胞 铅中毒 缗钱状 MM,红细胞比容测定（HCT）,定义:一定体积的全血中红细胞所占容积的相对比例。高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关，主要用于贫血、真性红细胞增多症的诊断、血液稀释和浓缩变化的测定。 检测方法：1）离心沉淀法 微量法和温氏法 血浆，血小板，白细胞，有核红细胞，还原红细胞和氧和红细胞 。,2）血液分析仪法 HCT=RBC×MCV 参考值：男性 0.38-0.50 女性 0.35-0.45 主要应用价值 1）临床补液量的参考 2）真红的诊断指标 0.7 3)红细胞平均指数计算基础 MCV MCHC 贫血形态学诊断,红细胞平均指数,红细胞平均体积 MCV 红细胞平均血红蛋白量 MCH 平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC 检测原理 ： 1）手工法 MCV=HCT/RBC ×1O15 fl MCH=Hb/RBC ×1012 pg MCHC=Hb/HCT g/L 2)血液分析仪法 MCV直接测定导出 MCH=Hb/RBC MCHC=Hb/(RBC×MCV ),参考值 MCV ( fl) MCH ( Pg) MCHC (g/L) 成人 80-100 26-34 320-360 1-3岁 79-104 25-32 280-350 新生儿 86-120 27-36 250-370 贫血形态学分类，提示贫血可能原因 正常细胞 正常 正常 正常 大细胞 增高 增高 正常 单纯小细胞 降低 降低 正常 小细胞低色素 降低 降低 降低,网址红细胞计数：手工法，血液分析仪法 参考值 0.005-0.025 绝对数（24-84） ×109/L 临床意义 反映骨髓造血功能重要指标 增高：增生性贫血 溶贫 减少：再障 用于贫血疗效，骨髓移植监测等,红细胞沉降率测定 (ESR),魏氏法 将枸橼酸钠抗凝血置于特制刻度血沉管内，垂直立于室温1h后，读取上层血浆的高度。(1:4) 自动血沉仪法： 1)红细胞缗钱样聚集期 10min 2)红细胞快速沉降期 40min 3)细胞堆积期 10min,参考值 男性15mm/h 女性20mm/h 对疾病的鉴别和动态观察有一定意义 病理性血沉增快 ：组织损伤，恶性肿瘤，风湿活动，结核活动，MM, SLE，巨球蛋白血症，高胆固醇血症等,白细胞检查,白细胞计数，白细胞分类计数，嗜酸性粒 胞计数，白细胞形态学检查,粒细胞（75%） 单核细胞（5%） 淋巴细胞（25%） 嗜中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 经过瑞氏染色后的各种白细胞,白细胞的组成,一、 白细胞计数 1）显微镜法 白细胞计数稀释液（冰乙酸）将全血稀释一定倍数，同时破坏红细胞和固定白细胞，冲入计数池，低倍镜下计数一定体积的数量，换算成每升数量。 2）血液分析仪法,白细胞的参考范围,正常参考值范围: 成人4.010×109个/L新生儿15.0-20.0,白细胞功能 保护肌体免受外来侵略(感染),白细胞分类计数 1）显微镜分类计数法 瑞氏染色血涂片在显微镜下，逐个分类计数，并观察白细胞的形态，计算各白细胞所占百分比。 目的：观察白细胞增多症，减少症，感染，中毒，恶性肿瘤，白血病和其他血液疾病的白细胞形态。 2）血细胞分析仪法 三分类、五分类,三分类 电阻抗原理 第一群：小细胞区主要为淋巴细胞 第二群：中间细胞区或单个核细胞区 只要包括幼稚细胞、单核细 胞、嗜酸、嗜碱粒细胞 第三群：大细胞区主要是中性粒细胞 五分类： 流式细胞术 VCS法（V：电阻抗原理测细胞体积，C：电导性技术，高频电磁探针测内部结构，S；光散射技术，鉴别细胞的颗粒（区分N、E、B、),成人白细胞分类计数参考值 中性粒细胞 （N） 0.50-0.70 嗜酸性粒细胞 (E) 0.005-0.05 嗜碱性粒细胞 (B) 0-0.01 淋巴细胞 (L) 0.20-0.40 单核细胞 (M) 0.03-0.08,1.1、中性粒细胞增多,1）生理性N增多：饱餐、激动、剧烈运动、高温、严寒可使N暂时性 新生儿、月经期、妊娠5个月以上可增高，生理性增多都是过性的，不伴有白细胞质量变化 2）病理性N： 原因很多，大致归为反应性增多和异常增生性增多两大类：反应性增多是机体对各种病因刺激的应激反应，动员骨髓贮存池中的粒C释放或边缘池粒C进入血循环。因此，增多的粒C大多为成熟的分叶核粒C或较成熟的杆状核粒C，而异常增生性增多为造血组织中原始或幼稚粒C大量增生，释放至外周血中的主要是病理性粒C。,1、中性粒细胞（Neutrophil）,N是从骨髓中造血干细胞增殖分化而产生的，它的生成受多种因素调控,反应性增多：,急性感染或炎症：N最多见原因，尤其化脓性球菌引起的局部炎症或全身性感染，此外，大肠杆菌绿脓杆菌、真菌等，病毒如流行性出血热，乙脑、狂犬病，立克次体如斑诊伤寒，螺旋体如钩体病，梅毒、寄生虫如肺吸虫。 增高程度与病原体种类，感染部位和程度以及机体的反应性有关。 广泛的组织损伤或坏死，严重外伤、手术、大面积烧伤、心梗、肺梗 急性溶血 RBC大量破坏导致相对缺氧，以及RBC破坏后的分解产物刺激骨髓贮存池中的粒C释放,急性失血，可能与大出血所致的缺氧和机体的应激反应，动员骨髓贮存池中的血细胞释放有关。 急性中毒 恶性肿瘤 非造血系统恶性肿瘤有时可出现持续性WBC增高，以N为主，可能的机制为： a. 肿瘤组织坏死的分解产物刺激骨髓中的粒细胞释放 b. 某些肿瘤如肝Ca、肾Ca等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成因子 c. 恶性肿瘤骨髓转移破坏骨髓对粒细胞释放的调控作用。,异常增生性增多：见于粒C白血病如AML、CML ，骨髓增殖性疾病。,1.2、中性粒细胞减少,N1.5×109/L称粒C； N 0.5×109/L称粒缺 感染性疾病 病毒感染：流感、麻诊、风诊、肝炎 细菌：伤寒，严重的细菌感染 年老：慢性消耗疾病或晚期恶性肿瘤伴感染预后差 血液系统疾病 非白血性白血病 恶性贫血 物理 化学因素、放射线、核素、毒物、药物 单核-巨噬C系统功能亢进，脾亢 其它 过敏性休克,2、嗜酸性粒细胞（Eosinophil）,CFU-SCFUEoEosinophil E增殖和成熟程序与N相似，成熟的E在外周血中很少，占全身E总数1%左右，大部在于BM和组织中 生理功能主要为吞噬作用，趋化作用,2.1、嗜酸性粒细胞增多,变态反应性疾病 哮喘 荨麻诊 药物过敏 寄生虫病 血吸虫、丝虫、囊虫 皮肤病：湿诊 剥脱性皮、银屑病 血液病：CML、 E白血病 某些急性肿瘤：肿瘤转移或有坏死灶的恶性肿瘤 某些传染病，传染病感染期，E常 唯有猩红热急性期E 其它，风湿性疾病，垂体前叶功能减退，肾上腺皮质功能减退 高E综合征，少见，这组疾病包括肺浸润和E，过敏性肉芽肿，E心内膜炎,2.2、嗜酸性粒细胞减少,临床意义较小，长期应用皮质激素后,3、嗜碱性粒细胞-Basophil,也是由骨髓干细胞产生，突出的生理功能为参与超敏反应 B表面有IgE的Fc受体，与IgE结合即被致敏，再受相应抗原攻击引起颗粒释放反应，颗粒中多种活性物质组胺、肝素、慢反应物质、E趋化因子，pt活化因子等 B CML、骨纤、慢性溶血、切脾、B白血病、过敏性疾病、转移癌、糖尿病、某些传染病。 B 无临床意义,4、淋巴细胞-Lymphocyte,L来源于骨髓造血干C，是人体重要的免疫活性C ，它具有与抗原起特异性反应能力。 T 胸腺依赖淋巴C ，前体C依赖胸腺发育成熟为有功能活性的T细胞，参与细胞免疫功能，占血液中LC 50-70%，寿命长，数月至数年。 B 骨髓依赖淋巴C，前体C通过BM发育成熟，参与体液免疫功能，占15-30%，寿命短4-5天，抗原激活后转化为浆C。,4.1、淋巴细胞增多,生理性：儿童，出生4-6天的可达50%，4-6岁后逐渐 病理性： 感染性疾病，病毒、麻诊、风诊、肝炎、传单 淋巴细胞白血病、淋巴瘤 急性传染病恢复期 组织移植的排斥反应 GVHD：移植物抗宿主反应,4.2、淋巴细胞减少,应用肾上腺皮质激素、烷化剂、ATG、放射线、免疫缺陷病等 4.3、异型淋巴细胞 外周血有时可见到一种形态变异的不典型淋巴C，正常偶见，2%，可能由T受抗原刺激转化而来 增高：病毒感染，如传单 药物过敏 输血、血透后 其它免疫性疾病，放疗后,成熟的单核C在血液中仅逗留1-3天即逸出血管进入组织或体腔内，转变为巨噬C，形成单核巨噬细胞系统，血液中的单核C在功能上还不成熟，进入组织转变为巨噬细胞，在功能上才趋于成熟，单核巨噬C系统在功能上主要有以下几个方面： 诱导免疫反应：吞饮或吞噬可溶性和颗粒性抗原，抗原递呈 吞噬和杀灭某些病原体，如病毒、结核菌、病原虫 吞噬红细胞和清除损伤组织及死亡细胞：处理衰老及异常RBC、清理炎症反应 抗肿瘤活性：激活的巨噬细胞在体外对肿瘤细胞生长有抑制作用 对白细胞生成的调节：单核细胞和巨噬细胞可产生集落刺激因子（CSF）,5、单核细胞 Monocyte,1、单核细胞增多 生理性增多：儿童、新生儿可，达0.09-0.15或更多 病理增多 （1）某些感染，如疟疾、黑热病、结核病、亚细 （2）血液病：单核细胞白血病、粒缺恢复期，恶组，淋巴瘤，MDS等 （3）急性传染病或急性感染的恢复期 2、单核细胞减少：一般无重要临床意义,单核细胞增多与减少的临床意义如下：,三 嗜酸性粒细胞计数 显微镜计数 伊红-丙酮稀释液 血液分析仪法 五分类分析仪,四 白细胞形态检查,正常白细胞形态，异常白细胞形态,正常白细胞,异常白细胞形态： 1、中性粒细胞毒性变化 严重的化脓性感染、败血症，恶性肿瘤，急性中毒、大面积烧伤等 1）大小不均 2）中毒颗粒 3)空泡形成 4）杜勒小体 5）退行性变 2、棒状小体 Auer body 主要见于急性粒细胞白血病 3、中性粒细胞核象变化 核左移、核右移（五叶核3%）见于巨幼细胞性贫血，感染，尿毒症，内因子缺乏的恶性贫血。,4、中性粒细胞和形态异常 多分叶、巨杆状核、双核 5、淋巴细胞形态异常 异型淋巴细胞 传染性单核细胞增多症 病毒性肝炎 、流行性出血热等 I型 （空泡型）又称泡沫型或浆细胞型 II型（不规则型）又称单核细胞型 III型（幼稚型）又称未成熟细胞型或幼淋巴细胞型,核左移,核左移,三、血小板,血小板计数,血小板计数(platelet count,PC) 是计数单位容积（L） 周围血液中血小板的数量，可以采用镜下目视法，目 前多用自动化血细胞分析仪检测。,参考值：(100-300)X 109/L,临床意义,（一） 血小板减少,PC 100x109/L 称为血小板减少。,1. 血小板生成减少或障碍：见于再障、巨幼贫、急性白 血病、放射性损伤、骨髓纤维化晚期等 2. 血小板破坏或消耗增多：见于ITP 、SLE 、恶性淋巴瘤、 上呼吸道感染、风疹、新生儿血小板减少症、输血后血小 板减少症、 DIC 、 TTP、先天性血小板减少症 3.血小板分布异常：见于脾肿大、血液被稀释（输入大量库 存血或大量血浆）等,（二）血小板增多,血小板计数400x109/L 为血小板增多,1. 原发性增多：见于骨髓增殖性疾病，如真性红细胞增多症和原发性血小板增多症、骨髓纤维化早期及慢性粒细胞白血病等 2. 反应性增多：见于急性感染、急性溶血、某些癌症患者，这种增多是轻度的， 常500x109/L.,血小板的作用,血小板的作用是参与止血和凝血。 在正常的血液循环中，血小板并不与内皮细胞表面或其他细胞发生作用，而是沿着毛细血管内壁排列，维持其完整性； 当血管局部受损伤时，血小板的止血兼有机械性的堵塞伤口和生物化学性粘附聚集作用。,血小板的参考范围,正常参考值范围: 100300×109个/L,血小板的功能 参与止血,正常血小板,血小板聚集 大血小板,血小板卫星现象,异常血小板,实验结果与分析,1、实验结果,2、实验分析,3、临床意义,实验过程,静脉采血2ml；,静脉采血过程,采血部位： 通常采用肘静脉，当肘静脉不明显时，可采用手背部、手腕、腘窝部和外踝部静脉。 采血步骤： 采血者取卧位或坐位，手臂伸直平放在台面枕垫上，暴露穿刺部位，找好采血静脉后，先用碘酊棉签从内向外顺时针方向消毒刺穿皮肤，稍等片刻再用75%的乙醇棉签以同样方式消毒并擦去碘迹。有采血部位的上方扎上压脉带，紧握拳头，使静脉显露。如静脉仍不太明显时，可嘱患者反复伸握拳数次，促使静脉怒张。操作者以左手拇指固定静脉穿刺部位的下端，右手持注射器，使针头斜面和针筒刻度向上，先以皮肤成30°的位置迅速刺破皮肤，然后适当降低角度穿破静脉壁进入静脉腔中，见回血后，将针头顺势深入少许，以免采血时针头滑出，但不可用力深刺，以免穿破静脉造成血肿；用右手示指将针头固定，左手缓缓抽动注射器内芯，至所需血量后，解开压脉带，嘱患者松拳，用无菌干棉签压住伤口，拔出针头，取下针头，将血液沿瓶壁缓缓注入事先准备好的抗凝瓶中，轻轻混匀，防止凝固，即为抗凝全血；,复习内容,血液生理、血液标本类型 、血液标本的采集方法、常用抗凝剂机制及用途、血涂片的制备与染色、 瑞氏染色原理、红细胞的生理特性和功能、红细胞计数、电阻抗原理（库尔特）、流式细胞术、红细胞计数意义、血红蛋白组成、氰化高铁血红蛋白测定原理、红细胞形态检查、异常红细胞形态（大小，形状，血红蛋白含量，结构和排列异常），红细胞比容、HCT的主要应用、红细胞平均指数、平均指数用于贫血的形态学分类、网织红细胞计数及临床意义、嗜碱性点彩红细胞计数及意义、红细胞沉降率影响因素及临床意义、白细胞计数、白细胞分类计数及临床意义、中性粒细胞毒性变化、核左移、核右移、异型淋巴细胞（3型）血小板计数临床意义、,