陈纭老师芳酸类非甾体抗炎药物的分析课件.ppt

安徽医科大学陈纭老师,第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析,安徽医科大学 陈纭 QQ：29583133 电话：13856020743,安徽医科大学陈纭老师,羧酸,芳酸,安徽医科大学陈纭老师,胺,芳胺 芳伯氨基,安徽医科大学陈纭老师,常见的芳酸类非甾体抗炎药物,水杨酸类,安徽医科大学陈纭老师,安徽医科大学陈纭老师,安徽医科大学陈纭老师,贝诺酯,安徽医科大学陈纭老师,邻氨基苯甲酸类,甲芬那酸(mefenamic acid),安徽医科大学陈纭老师,双氯芬酸钠,邻氨基苯乙酸类,安徽医科大学陈纭老师,布洛芬,芳基丙酸类,安徽医科大学陈纭老师,酮洛芬,安徽医科大学陈纭老师,萘普生,安徽医科大学陈纭老师,吲哚乙酸类,吲哚美辛,安徽医科大学陈纭老师,苯并噻嗪甲酸类,吡罗昔康,安徽医科大学陈纭老师,美洛昔康,安徽医科大学陈纭老师,其他非甾体抗炎药物,对乙酰氨基酚,安徽医科大学陈纭老师,第一节 结构与性质,一、结构分析,包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐,共同点：苯环、羧基,不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基、杂环等）,安徽医科大学陈纭老师,二、性质,（一）物理性质,（1）固体 具有一定的熔点,（2）溶解性 游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。,安徽医科大学陈纭老师,（二）化学性质,1. 芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在36之间，属中等强度的酸或弱酸；,X、NO2、OH等吸电子取代基存在使酸性增强,安徽医科大学陈纭老师,CH3、NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱,邻位取代间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强,安徽医科大学陈纭老师,2. 酯键、酰胺键可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。,3. UV,安徽医科大学陈纭老师,4. IR,5. 取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具芳伯氨基的药物可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。,6. 色谱法制剂分析,安徽医科大学陈纭老师,第二节 鉴别试验,一、FeCl3反应,具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物,安徽医科大学陈纭老师,直接：水杨酸、双水杨酯、对乙酰氨基酚,水杨酸 ChP（2010） 鉴别 （1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,安徽医科大学陈纭老师,间接：阿司匹林、贝诺酯,阿司匹林 ChP（2010） 鉴别 （1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,安徽医科大学陈纭老师,二 缩合反应,安徽医科大学陈纭老师,安徽医科大学陈纭老师,三、芳伯氨基反应 重氮化偶合反应,具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 ，如对乙酰氨基酚,安徽医科大学陈纭老师,四、氧化反应,安徽医科大学陈纭老师,五、水解反应 乙醇和硫酸 （ 香味）,安徽医科大学陈纭老师,1. 测定max ；min。 例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制备0.25mg/ml； max ； 265nm, 273nm; min。245nm, 271nm。 2. 测定max 例如：双氯芬酸钠，20g/ml max =276nm; 3. 在max 处测定一定浓度供试液的吸收度A 。 例如： 20g/ml甲酚钠酸甲醇液在max =279nm，A=0.690.74； 在max =350nm，A=0.560.60。,紫外吸收光谱法,安徽医科大学陈纭老师,4. 在规定的波长测定吸收度比值（即双波长吸收度 比值法） 例如：对氨基水杨酸钠10g/ml; A265/A299 = 1.561.56 再例如：二氟尼柳20g/ml（盐酸乙醇液）; A251/A315 = 4.24.6,安徽医科大学陈纭老师,红外吸收光谱法,水杨酸的红外吸收图谱,33002500cm-1,O-H,1660cm-1,C=O,1610,1570 1480,1440,苯环C=C,775cm-1,Ar-H,安徽医科大学陈纭老师,返 回,37002900cm-1,N-H、 O-H,1640cm-1,N-H,1580cm-1 1500cm-1,C=C,1300cm-1,C-N,1188cm-1,C-O,对氨基水杨酸钠的红外吸收图谱,安徽医科大学陈纭老师,八、色谱法,安徽医科大学陈纭老师,一、阿司匹林 （一）溶液的澄清度,限制无羧基的杂质,检查原理 阿司匹林可溶于碳酸钠 无羧基杂质不溶于碳酸钠,第三节 特殊杂质检查,安徽医科大学陈纭老师,（二）、阿司匹林中水杨酸的检查,1. 杂质来源 原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）,安徽医科大学陈纭老师,2. 检查方法 ChP(2005): 对照法 反应原理 三氯化铁反应 限量 原料：0.1%； 阿司匹林片：0.3%； 阿司匹林肠溶片：1.5%； 阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）,安徽医科大学陈纭老师,ChP(2010): HPLC法 色谱柱：ODS 流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70) 供试品溶液：10mg/L的1%冰醋酸甲醇溶液 检测波长：303nm 外标法以峰面积计，游离水杨酸0.1%,安徽医科大学陈纭老师,有关物质：乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA） ChP：HPLC法，ODS柱， 流动相A: 同游离水杨酸检查；流动相B：乙腈，梯度洗脱 检测波长：276nm，供试液稀释液（0.5%）为对照，杂质峰（除水杨酸外）面积和对照液主峰面积。,安徽医科大学陈纭老师,二、双水杨酯中有关物质的检查 水杨酸：杂质对照品法 ChP(2010) 有关物质： BP（2005）TLC，高低浓度对比法,安徽医科大学陈纭老师,甲芬那酸是以邻-氯苯甲酸和2，3-二甲基苯胺在Cu的催化下 缩合而成，因此成品药物中要检查铜盐及有关物质。 分光光度法：利用Cu 2+与Na-DDC呈色后测定A 1. 铜盐检查法 原子吸收分光光度法：BP（2000） 2. 有关物质的检查 主要检查的是酰胺、二甲基苯胺和邻氯苯甲 酸各国药典均采用HPLC法中的自身高低浓度对照法。,三、甲芬那酸中特殊杂质的检查,安徽医科大学陈纭老师,第四节 含量测定,一、中和法,1. 直接滴定法 pKa36,安徽医科大学陈纭老师,阿司匹林 ChP（2010） 取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,安徽医科大学陈纭老师,安徽医科大学陈纭老师,（1）测定方法及计算 Ka=3.27×10-4 反应摩尔比为11,（2）讨论 中性乙醇 溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言,安徽医科大学陈纭老师, 优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸） 适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定,安徽医科大学陈纭老师,2. 剩余滴定法,美洛昔康含量测定ChP（2010）：供试品加25ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）25ml，采用溴麝香草酚蓝指示液，盐酸滴定液（0.1mol/l）回滴。,安徽医科大学陈纭老师,3. 水解后剩余滴定法 酯的一般含量测定方法,阿司匹林,安徽医科大学陈纭老师,USP（32）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。,安徽医科大学陈纭老师,2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O,剩余滴定：,水解：,安徽医科大学陈纭老师,反应摩尔比为12 优点：消除了酯键水解的干扰 缺点：酸性杂质干扰,安徽医科大学陈纭老师,4. 两步滴定法 阿司匹林片、阿司匹林肠溶片（ChP2005采用，2010改用HPLC法）,如阿司匹林片的测定：,安徽医科大学陈纭老师,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,安徽医科大学陈纭老师,第一步 中和,安徽医科大学陈纭老师,第二步 水解后剩余滴定,水解：,安徽医科大学陈纭老师,2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O 反应摩尔比为11 本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰,剩余滴定：,安徽医科大学陈纭老师,片剂含量测定结果的计算,安徽医科大学陈纭老师,5. 非水碱量法 如吡罗昔康 冰醋酸作溶剂 高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂 结晶紫作指示剂指示终点 或电位法指示终点,安徽医科大学陈纭老师,二、紫外分光光度法 1. 直接紫外分光光度法 二氟尼柳、美洛昔康、尼美舒利、对乙酰氨基酚制剂. ChP（2010）,安徽医科大学陈纭老师,精密量取本品适量（约相当于二氟尼柳0.1g），置100ml量瓶中，用0.1mol/l盐酸乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5m1，置100ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀。在1cm吸收池中，以溶剂为空白，于315nm的波长处测定吸收度，按对照法计算含量。,安徽医科大学陈纭老师,安徽医科大学陈纭老师,2. 柱分配色谱紫外分光光度法 USP（32）阿司匹林胶囊 可同时定量测定阿司匹林和水杨酸 （1）水杨酸的限量测定 固定相：FeCl3 SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量 （2）含量测定 固定相：NaHCO3 AAS、SA保留 冰醋酸洗脱，280nm测AAS量,安徽医科大学陈纭老师,供试品液：CHCl3液,洗脱液1：CHCl3 洗脱液2：HAC- 乙醚,硅藻土，FeCl3-尿素,玻璃棉,硅藻土，NaHCO3,供试品液：CHCl3-HCl液,洗脱液1：HAC-CHCl3 (1:10) 10ml 洗脱液2：HAC- CHCl3 (1:100) 85ml,1-杂质先洗脱 2-SA后洗脱,max=306nm AuAs,1-杂质先洗脱 2-ASA后洗脱,max=280nm ASA(mg)=C(Au/As),安徽医科大学陈纭老师,三、HPLC 阿司匹林栓剂 ChP（2010） 离子抑制RP色谱法 外标法定量,流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70) 检测波长：276nm,安徽医科大学陈纭老师,安徽医科大学陈纭老师,安徽医科大学陈纭老师,例1鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是 A. 碘化钾 B. 碘化汞钾 C. 三氯化铁 D. 硫酸亚铁 E. 亚铁氰化钾,安徽医科大学陈纭老师,例2. 乙酰水杨酸片剂可采用的测定方法为 A. 非水滴定法 B. 水解后剩余滴定法 C. 两步滴定法 D. 柱色谱法 E. 双相滴定法,安徽医科大学陈纭老师,例3测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是 A. 重量法 B. 酸碱滴定法 C. 高效液相色谱法 D. 络合滴定法 E. 高锰酸钾法,安徽医科大学陈纭老师,例4. 两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量=180.16）的量是 A. 18.02mg B. 180.2mg C. 90.08mg D. 45.04mg E. 450.0mg,安徽医科大学陈纭老师,反应摩尔比为11,T滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数 c滴定液浓度，mol/L M被测物的摩尔质量，g/mol n1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比为1n,安徽医科大学陈纭老师,例5. 阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是 A. 苯酚 B. 乙酰水杨酸 C. 水杨酸 D. 醋酸钠 E. 醋酸苯酯,安徽医科大学陈纭老师,例6. 水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是 A. pH10.0 B. pH2.0 C. pH78 D. pH46 E. pH2.0±0.1,安徽医科大学陈纭老师,例7. 两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是 A. 测定阿司匹林含量 B. 消除共存酸性物质的干扰 C. 使阿司匹林反应完全 D. 便于观测终点 E. 有利于第二步滴定,安徽医科大学陈纭老师,例8. 采用双步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与标准溶液的反应摩尔比为 A. 2:1 B. 1:2 C. 1:1 D. 3:1 E. 以上都不对,安徽医科大学陈纭老师,例9. 阿司匹林中含量最高的杂质为 A. 乙酰水杨酸酐 B. 乙酰水杨酸水杨酸 C. 水杨酸 D. 水杨酰水杨酸 E. 以上都不对,安徽医科大学陈纭老师,例10. 用直接滴定法测定阿司匹林含量 A. 反应摩尔比为1：1 B. 在中性乙醇溶液中滴定 C. 用盐酸滴定液滴定 D. 以中性红为指示剂 E. 滴定时应在不断振摇下稍快进行,安徽医科大学陈纭老师,3. 按规定对药品检验完毕后，应对检查结果进行 A、与标准比较 B、校正 C、核对 D、复核 E、妥善保存,安徽医科大学陈纭老师,6. 药品的含量测定是指 A、用法定方法测定有效成份的含量 B、用规定方法测定药物的含量 C、用法定方法测定药物中组分的含量 D、测定药物的含量 E、测定药品含量,安徽医科大学陈纭老师,9. 药物的检查项下应包括 A、均一性 B、有效性 C、安全性 D、纯度要求 E、杂质检查,安徽医科大学陈纭老师,10.研究化学结构已经明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量，包括 A 进行药物结构分析 B 药物成品的化学检验工作 C 药物生产过程的质量控制 D 药物储存过程的质量考察 E 药物销售过程分析,安徽医科大学陈纭老师,11.药品质量标准的主要内容包括 A 名称 B 性状 C 鉴别与检查 D 含量测定 E 类别与贮藏,安徽医科大学陈纭老师,12.测定物质的物理化学性质与温度关系的一类仪器分析方法称为 A、温度测定法 B、温控法 C、热分析法 D、热导法 E、仪器分析法,安徽医科大学陈纭老师,14.有机卤素药物常用的测定方法有 A 直接回流后测定法 B 碱性还原后测定法 C 氧瓶燃烧分解后测定法 D 直接络合滴定法 E 硝酸银标准液直接滴定法,安徽医科大学陈纭老师,15.在药物生产过程中引入杂质的途径为 A 原料不纯或部分未反应完全的原料造成 B 合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成 C 需加入的各种试剂产生吸附。共沉淀生成混晶等造成 D 所用金属器皿及装置等引入杂质 E 由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质,安徽医科大学陈纭老师,16.药物分析的任务是 A 常规药品检验 B 制订药品标准 C 参与临床药学研究 D 药物研制过程中的分析监控 E 药理动物模型研究,