亮氨酸氨基肽酶检测.ppt

1,亮氨酸氨基肽酶检测,2,亮氨酸氨基肽酶,LAP是一种蛋白酶，LAP广泛分布于人体各组织，以肝、胆、肾、小肠以及子宫肌层内含量最多。肝内外胆淤时，LAP活力显著增高，尤其在恶性胆淤时，其活力随病情进展而持续增高。对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。 【检测方法】 一般采用L-Leucine-p-nitroanilide作为底物通过LAP水解，通过检测P-nitroaniline来测定LAP的活性，此方法在六十年代即为推荐方法。 【原理】 L-亮氨酸p-硝基苯胺被标本中的LAP分解，游离出L-亮氨酸p-硝基胺，在405nm处检测吸光度变化率，测得LAP活性值。,3,亮氨酸氨基肽酶,【试剂】 Tris缓冲液 100 mmol/L L-亮氨酸p-硝基苯胺 2mmol/L 【操作参数】 主波长 405nm 副波长 505nm 温度 37 分析类型 速率法 样本/试剂 10/300 延迟时间/检测时间 3/2 在检测时间内读取两次不同时间的吸光度用其差值进行计算。,4,亮氨酸氨基肽酶,【计算因子说明】 A/min-每分钟吸光度变化率 e- 摩尔消光系数 Vt-反应液总体积 (ml) Vs- 标本体积 (ml) 1000-变化因数 d- 1比色杯光径 (cm) F*- 3100 理论因数 【正常值】 血清LAP活性单位：2060U/L,【计算】,5,亮氨酸氨基肽酶,【临床意义】 LAP是一种蛋白酶，肝内含量很丰富。肝内外胆淤时，LAP活力显著增高，尤其在恶性胆淤时，其活力随病情进展而持续增高。试剂对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。肝坏疽、肝肿瘤、肝炎、乳腺癌、 肝癌、胆道癌、胰腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌明显增高。肝硬化、传染性肝炎可中度增高，常为参考值的2-4倍。阻塞性黄疸明显增高，常达参考值5倍以上，并出现在胆红素或ALP上升之前。 不像其他肝功的酶，只能检测血液样本，LAP还可以检测尿液。在一些病例中可以检测尿液中LAP的变化，而不必采血。亮氨酸氨基肽酶（LAP）LAP在人体各组织中广泛存在，在毒性物质或疾病影响到富含LAP的近端小管时，尿LAP活性最高。肾小球基底膜通透性增高、肾小管上皮细胞损害、药物致中毒性肾损害和肾肿瘤时LAP增高。肿瘤治疗后尿LAP增高提示肿瘤复发。对各种肾脏病例进行分析，发现LAP阳性率最高。,6,Thank you！,end,