黄连饮片分级方法研究-刘承凯.doc

药学院 2014 届本科生毕业设计（论文） 分类 炮制 年 级 2010 级 成成 都都 中中 医医 药药 大大 学学 药学院学士学位论文药学院学士学位论文 黄连饮片分级方法研究黄连饮片分级方法研究 刘承恺 指 导 教 师： 黄勤挽（副教授） 申请学位级别： 学 士 专业名称： 中药资源 2010 级 论文提交时间：2014 年 5 月 论文答辩时间：2014 年 6 月 学位授予单位：成都中医药大学 答辩委员会主席： 评阅人： 成都中医药大学药学院 2014 年 5 月 药学院 2014 届本科生毕业设计（论文） 目录目录 摘要摘要.III ABSTRACT .IV 前言前言1 一、材料一、材料 .1 1.黄连饮片的收集黄连饮片的收集1 2.2.仪器仪器.2 二、试验方法和结果二、试验方法和结果 .2 1.黄连饮片外观物性特征黄连饮片外观物性特征-大小测量大小测量.2 2.2.黄连饮片外观物性特征黄连饮片外观物性特征- -颜色测量颜色测量.3 3.3.黄连饮片外观物性特征黄连饮片外观物性特征- -药屑杂质测定药屑杂质测定.5 4.4.黄连饮片内在品质评价黄连饮片内在品质评价.7 5.5.黄连饮片分等研究黄连饮片分等研究.13 综述：中药黄连综合利用概况综述：中药黄连综合利用概况14 1.1.中药黄连的研究概述中药黄连的研究概述14 2.2.黄连须研究概述黄连须研究概述15 3.3.黄连叶研究概述黄连叶研究概述15 4.4.黄连渣的研究概述黄连渣的研究概述16 参考文献参考文献16 致致 谢谢17 药学院 2014 届本科生毕业设计（论文） I 黄连饮片分级方法研究黄连饮片分级方法研究 刘成恺刘成恺 摘要摘要 目的：目的：研究黄连饮片等级划分的方法。 方法：方法：采用外观物性特征量化和内在品质评价的综合方法研究 18 批黄连饮 片的质量。其中外观物性特征量化研究黄连饮片的大小、颜色、药屑杂质；内 在品质评价对黄连饮片的水分、总灰分、浸出物、薄层鉴别、含量测定进行了 研究。 结果：结果：18 批饮片长度为 18.3739.22mm，宽度为 5.267.35mm，厚度为 1.963.46mm，重量为 0.140.47g；其外部颜色和内部颜色可计算出总色值； 药屑杂质为 0.43%3.23%，水分为 7.34%10.51%，总灰分为 1.70%2.82%， 浸出物为 24.43%32.59%，其中长度、宽度、厚度、重量、药屑杂质、总灰分、 浸出物可作为分级依据；黄连饮片供试品色谱中，在与黄连对照药材色谱相应 的位置上，显 4 个以上相同颜色的荧光斑点（Rf 由大到小分别是黄连碱、表小 檗碱、小檗碱、巴马汀和药根碱） ，18 批黄连饮片薄层色谱指纹信息一致，不 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） I 作为分级依据；按干燥品计算，以盐酸小檗碱计，18 批黄连饮片含小檗碱为 4.40% 药学院 2014 届本科生毕业设计（论文） I II 6.33%，含表小檗碱、黄连碱和巴马汀的总量为 2.89%4.18%，其中 4 批 样品不合格，通过聚类分析可分为 2 类，可作为黄连饮片分级依据。 结论：结论：黄连饮片可以划分为 2 种等级，其中一级饮片呈不规则的薄片（片 长不得少于 2.0cm、片宽不得少于 0.5cm、片厚 0.10.3cm） ，外表皮灰黄色或 黄褐色，切面或碎断面鲜黄色或红黄色，药屑杂质不得过 1.0%，水分不得过 12.0%，总灰分不得过 2.5%，浸出物不得少于 25.0%，在紫外光灯（365nm）下 检视，在与黄连对照药材色谱相应的位置上，显 4 个以上相同颜色的荧光斑点， 与盐酸小檗碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，按干燥品计 算，以盐酸小檗碱计，含小檗碱不得少于 6.5%，含表小檗碱、黄连碱和巴马汀 的总量不得少于 4.0%；二级饮片呈不规则的片或碎块（对长、宽、片厚不做规 定） ，外表皮灰黄色或黄褐色，切面或碎断面鲜黄色或红黄色，药屑杂质不得过 4.0%，水分不得过 12.0%，总灰分不得过 3.5%，浸出物不得少于 15.0%，在紫 外光灯（365nm）下检视，在与黄连对照药材色谱相应的位置上，显 4 个以上相 同颜色的荧光斑点，与盐酸小檗碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧 光斑点，按干燥品计算，以盐酸小檗碱计，含小檗碱不得少于 5.0%，含表小檗 碱、黄连碱和巴马汀的总量不得少于 3.3%。 关键词关键词：黄连饮片 等级 一级饮片 二级饮片 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） Research classification method berberine Pieces LiuChengkai ABSTRACT Objective:Objective: Research berberine Pieces grading method. Methods:Methods: And integrated approach to the evaluation of the intrinsic quality of the quality of research grant berberine 18 Pieces quantified using physical characteristic appearance. Physical appearance characteristics which quantitative research berberine Pieces size, color, drug crumbs impurities; intrinsic quality evaluation of water berberine Pieces, total ash, extract, TLC, assay studied. Results:Results: 18 Pieces batch length 18.3739.22mm, width of 5.267.35mm, thickness 1.963.46mm, weighs 0.140.47g; its exterior color and interior color color calculate the total value; drug crumbs impurities 0.43%3.23%, a water content of 7.34%10.51%, total ash 1.70%2.82%, extract of 32.59%24.43%, wherein the length, width, thickness, weight, drug debris impurities, total ash extract as classification based; berberine tablets test products for chromatography, chromatography with the reference drug berberine corresponding position, which was four more of the same color fluorescent spots (Rf descending coptisine respectively, table berberine, berberine , THP and jatrorrhizine), 18 batches berberine tablets TLC fingerprint information is consistent, not as a basis for classification; calculated on dry goods, berberine meter, 18 batches berberine tablets containing 4.40% berberine 6.33%, with the total amount of berberine table, coptisine and THP is 2.89%4.18%, of which four batches of samples failed, cluster analysis can be divided into two categories, as berberine Pieces graded basis. Conclusion:Conclusion: Berberine Pieces can be divided into two kinds of levels, including an irregular flakes Pieces ( Duration of not less than 2.0cm, sheet width of not less than 0.5cm, slice thickness 0.1 0.3cm), pale yellow or brown outer skin , cut or broken section of bright yellow or red and yellow , medicine crumbs impurities not more than 1.0 %, moisture not more than 12.0% of the total ash content not 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） I more than 2.5% extract of not less than 25.0% , in UV light (365nm) , under review berberine reference drug chromatography with the corresponding position , which was 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） four more of the same color fluorescent spots , and berberine hydrochloride reference chromatogram corresponding position was the same color fluorescent spots , dry goods , hydrochloric acid Berberis meter base , containing not less than 6.5% berberine , berberine - containing sheet total THP coptisine and not less than 4.0% ; secondary pieces irregular pieces or fragments ( of length, width , slice thickness makes provisions ) , pale yellow or brown outer skin , cut or broken section of bright yellow or red and yellow , the drug should not exceed 4.0% of impurities crumbs , water not more than 12.0% , not more than 3.5% total ash , extract not less than 15.0% , in UV light (365nm) , under review , the reference drug chromatography with berberine corresponding position , which was four more of the same color fluorescent spots , and berberine hydrochloride reference substance corresponding position on the chromatogram , which was the same color fluorescent spots, dry goods , berberine dollars, with not less than 5.0% berberine , berberine - containing sheet total coptisine and THP shall not be less than 3.3%. Keywords:Keywords: Berberine Pieces；Grade；A pieces；Two pieces 药学院 2014 届本科生毕业设计（论文） 0 前言前言 自古以来，中药材有商品等级划分，而中药饮片规格缺乏科学合理的分类 分级方法及其质量评价标准。本课题来源于国家中医药管理局中医药科研行业 专项，以黄连饮片为研究对象，拟采用外观物性特征量化和内在品质评价结合 的方法综合评价，结合聚类分析建模，开展黄连饮片分级的探索性研究。 在饮片传统分级方法（片形大小、水分和杂质的含量）的基础上，分类对 饮片进行规格分级研究，并在各级饮片的质量评价标准中充实现代科学评价内 容（有效成分含量、浸出物重量及 TLC 特征图谱等） ，使饮片分级方法更为科学、 实用。 一、材料一、材料 1.1.黄连饮片的收集黄连饮片的收集 黄连饮片收集由课题组前期完成，共制备和收集 18 批，每批次 25kg，经 成都中医药大学中药标本中心卢先明教授鉴定为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch 的干燥根茎加工品（切片）。饮片厂主要分布在四川省、安 徽省、北京市、广东省，兼顾黄连的道地产区和非道地主产区，详见表 1。 表 1 黄连饮片一览表 饮片饮片 编号编号 等级等级生产厂家生产厂家批号批号 样品量样品量 (kg)(kg) YP-1 统货 四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工） 重庆市石柱县黄水镇枫木乡石印组（A 级）药材加工 120111017.24 YP-2 统货 四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工） 重庆市石柱县黄水镇枫木乡石印组（B 级）药材加工 120111028.35 YP-3 统货 四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工） 重庆市石柱县冷水乡八龙村双坝组（A 级）药材加工 120111037.39 YP-4 统货 四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工） 重庆市石柱县冷水乡八龙村双坝组（B 级）药材加工 120111047.74 YP-5 统货 四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工） 湖北省利川市汪营镇王家寨村八组药材加工 120111056.46 YP-6 统货 四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工） 四川省彭州市白鹿镇红花村十组药材加工 120111066.98 YP-7 统货四川新荷花中药饮片股份有限公司 11051145 YP-8 统货四川新荷花中药饮片股份有限公司 11060675 YP-9 统货四川省中药饮片有限责任公司 1106215 YP-10 统货成都真龙百信堂药业有限公司 1110012 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 1 YP-11 统货洪雅县瓦屋山药业有限公司 1205012 YP-12 统货广安福鼎中药饮片有限公司 1207012 YP-13 统货成都中医大惠康药业有限公司 1207012 YP-14 统货康美药业股份有限公司 1206022212 YP-15 统货北京盛世龙药业有限公司 12070742 YP-16 统货亳州市老益堂中药材销售有限公司 /2 YP-17 统货北京同仁堂（亳州）饮片有限责任公司 2010091022 YP-18 统货成都中医大惠康药业有限公司 1211012 注：YP-1YP-6 系委托加工饮片；YP-7YP-18 系购买饮片。 2.2.仪器仪器 游标卡尺（量程 0150 mm，精度 0.02 mm） （成都成量工具有限公司） ， BS200S 型精密电子天平（北京赛多利斯天平有限公司，d=0.001g，max 200g） ， CR-410 色彩色差计（日本柯尼卡美能达有限公司） ，FW135 型中草药粉碎机（天 津市泰斯特仪器有限公司） ，DRZ-4 型电阻炉温度控制器（沈阳市电炉厂） ， DZKW-4 型水浴锅（北京中兴伟业仪器有限公司） ，ZF-90 型紫外分析仪（温州奥 利生物医学仪器厂） ，Agilent 1200 高效液相色谱仪（含四元泵、DAD 检测器、 柱温箱、自动进样器） ，PHS-3C 型酸度计（上海日岛科学仪器有限公司） ，UPH- -10T 超纯水器（成都超纯科技有限公司） 。 二、试验方法和结果二、试验方法和结果 1.1.黄连饮片外观物性特征黄连饮片外观物性特征- -大小测量大小测量 1.11.1 试验方法试验方法 从每批黄连饮片中，随机抽取 50 个样本，用游标卡尺测量样本 的总长度、总宽度（样本平放投影至平面最宽处）、片厚（饮片最厚处），并 称取每 1 片片重。对总长度、总宽度、片厚数据进行标准化处理后聚类分析。 1.21.2 试验结果试验结果 计算平均值，数据用±s 形式表示，结果见表 2 和图 1。x 表 2 黄连饮片外观物性特征-大小测量( (±s，n=50)x 大小大小饮片饮片 编号编号长度（长度（mmmm）宽度（宽度（mmmm）厚度（厚度（mmmm）重量（重量（g g） YP-123.90±7.476.54±1.412.37±0.550.23±0.12 YP-221.86±8.115.87±1.302.57±0.680.18±0.09 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 2 YP-324.86±8.335.52±1.242.87±0.750.25±0.12 YP-420.84±6.455.26±0.762.85±0.900.19±0.11 YP-523.77±7.125.90±1.153.46±0.810.30±0.15 YP-624.21±7.707.13±1.242.24±0.780.24±0.12 YP-734.87±10.376.88±1.592.74±0.730.39±0.23 YP-827.62±7.476.41±2.462.62±0.890.29±0.22 YP-925.61±8.056.76±1.973.19±0.780.35±0.22 YP-1039.22±14.616.56±1.732.29±0.490.47±0.30 YP-1119.36±6.695.98±1.992.69±0.610.19±0.08 YP-1235.93±11.686.85±1.853.19±0.760.35±0.22 YP-1328.25±10.437.35±2.682.64±0.710.30±0.23 YP-1421.79±6.855.81±1.291.96±0.380.21±0.09 YP-1524.75±6.496.54±1.442.13±0.330.24±0.11 YP-1628.56±8.306.46±1.402.38±0.410.34±0.21 YP-1718.37±4.495.52±1.322.38±0.550.14±0.06 YP-1830.06±9.777.15±1.952.45±0.660.32±0.17 图 1 黄连饮片长、宽、厚数据聚类分析图 由图 1 可见，若将 18 批黄连饮片按大小聚类成 2 类，则 YP-2、YP- 11、YP-17、YP-3、YP-4、YP-14、YP-5、YP-9 是第 1 类；YP-13、YP-18、YP- 8、YP-16、YP-1、YP-15、YP-6、YP-7、YP-12、YP-10 是第 2 类。结合聚类分 析数据和生产实际，黄连饮片片厚、片型的均匀性是影响外观物性特征的最大 因素，暂定如下： 【黄连一级饮片】 本品呈不规则的薄片（片长不得少于 2.0cm、片宽不得 少于 0.5cm、片厚 0.10.3cm） 。 【黄连二级饮片】 本品呈不规则的片或碎块（对长、宽、片厚不做规定） 。 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 3 2.2.黄连饮片外观物性特征黄连饮片外观物性特征- -颜色测量颜色测量 2.12.1 试验方法试验方法 从每批黄连饮片中，随机抽取干燥样品数个，直接测定外部的 色度值；内部颜色是粉碎后 90%以上过 30 目筛，未过筛的与已过筛的粉末合并， 混合均匀，测定。仪器参数：光源D65，标准观察角度 2°，照明口径 Ø50 mm； 大于光源口径的烧杯装盛样品，样品装盛厚度不低于 2cm，室温下测定。数据 用L*a*b*色空间法表示，其中L*为亮度值，a* 红绿色度坐标，b*为黄蓝色度 坐标，E*ab为总色值，计算。以 a*值为 X 轴、 * *2 2 2 * ba L abE b*值为 Y 轴、L*值为 Z 轴，进行 Lab 色空间三维投影；并对L*a*b*值进行聚类 分析。 2.22.2 试验结果试验结果 结果见表 3 和图 2。 表 3 黄连饮片外观物性特征-颜色测量 外部颜色外部颜色内部颜色内部颜色 饮片饮片 编号编号 L*L*a*a*b*b* 总色值总色值 （E*abE*ab） L*L*a*a*b*b* 总色值总色值 （E*abE*ab） YP-1 40.4511.0932.5553.091450.159.5832.3960.4641 YP-2 48.6513.1336.1962.039850.659.3632.9561.1452 YP-3 49.6413.4238.9364.496348.579.7929.1857.5010 YP-4 44.0515.1335.0958.314949.90 10.0731.9860.1177 YP-5 44.1711.5534.2857.092153.619.6138.1966.5196 YP-6 41.9810.7432.8054.346252.449.7635.9264.3075 YP-7 41.419.9233.1453.957949.209.5429.9558.3837 YP-8 43.679.3431.3754.574548.347.4227.8456.2750 YP-9 35.746.8322.6742.871046.446.6724.4452.9006 YP-10 48.4710.3737.8562.365949.609.0130.7659.0552 YP-11 47.799.9532.0158.374047.106.6625.2753.8641 YP-12 33.057.3122.4940.639148.099.1028.9856.8797 YP-13 35.718.1826.6645.308652.129.8335.1363.6179 YP-14 60.9216.5957.3385.283150.6310.0633.3761.4667 YP-15 35.798.4326.4245.277052.129.8335.1363.6179 YP-16 61.9513.4052.2182.117349.519.3831.8159.5911 YP-17 41.1510.7529.1451.556044.888.5423.5751.4071 YP-18 38.5110.1430.5750.203247.889.2328.3656.4090 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 4 图2 黄连饮片外部、内部颜色总色值数据聚类分析图 由图 2 可见，若将 18 批黄连饮片按颜色聚类成 2 类，则 YP-14、YP-16 是 第 1 类；YP-8、YP-9、YP-11、YP-12、YP-17、YP-18、YP-1、YP-2、YP-3、YP- 4、YP-5、YP-6、YP-7、YP-10、YP-13、YP-15 是第 2 类。结合聚类分析数据和 黄连饮片饮片生产实际，黄连饮片的颜色有一定的差异，主要集中在饮片的干 燥环节，如果干燥时间过长，则颜色加深偏于棕褐色，总色值数值将减少。因 颜色大多仍是以描述性语言为主，本身存在一定的差异，故暂不从颜色上对黄 连饮片 2 个等级进行区别： 【黄连一级饮片】【黄连二级饮片】外表皮灰黄色或黄褐色；切面或碎断 面鲜黄色或红黄色。 3.3.黄连饮片外观物性特征黄连饮片外观物性特征- -药屑杂质测定药屑杂质测定 黄连饮片杂质的主要有 4 种类型：外源性杂质：泥沙、异物等；非药 用部位：脱落的残留须根；加工过程产生：碎屑（药材粉末）；存贮过程 产生：霉烂品、虫蛀品。必须对其饮片中混有的灰屑、药渣及可见异物进行测 定。 3.13.1 试验方法试验方法 每批次黄连饮片均匀取样，每次取样 100g，测定 6 次。通过捡 选、过二号筛后杂质称重方法，测定其中所含杂质量，进行聚类分析。 3.23.2 试验结果试验结果 结果见表 4 和图 3。 表 4 黄连饮片外观物性特征-灰屑、药渣及可见异物测定 饮片编号饮片编号药屑杂质药屑杂质(%)(%)(n=6)(n=6) YP-10.47 YP-20.43 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 5 YP-30.59 YP-42.26 YP-53.23 YP-60.39 YP-70.53 YP-81.47 YP-91.97 YP-101.20 YP-111.24 YP-121.50 YP-130.84 YP-140.68 YP-150.45 YP-161.39 YP-171.06 YP-180.51 由表 4 可见，黄连饮片中药屑杂质（可见异物+通过一号筛灰屑）量在 0.43%3.23%。 图3 黄连饮片药屑杂质量聚类分析图 由图 3 可见，若将 18 批黄连饮片按药屑杂质量聚类成 2 类，则 YP-4、YP- 5、YP-9 是第 1 类；YP-1、YP-2、YP-3、YP-6、YP-7、YP-13、YP-14、YP- 15、YP-18、YP-8、YP-10、YP-11、YP-12、YP-16、YP-17 是第 2 类。结合聚类 分析数据和生产实际，制定如下： 【黄连一级饮片】取样 100g 拣出杂质，过一号筛筛出药屑，合并称重计算。 不得过 1.0%。 【黄连二级饮片】取样 100g 拣出杂质，过一号筛筛出药屑，合并称重计算。 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 6 不得过 4.0%。 4.4.黄连饮片内在品质评价黄连饮片内在品质评价 4.14.1 水分测定水分测定 4.1.14.1.1 试验方法试验方法 参照 2010 版中国药典一部附录 H 第一法的测定方法： 取供试品 3g；将扁形称瓶干燥至恒重。厚度不超过 5mm，疏松供试品不超过 10mm，精密称定，打开瓶盖在 105干燥 5 小时，将瓶盖盖好,移置干燥器中， 冷却 30 分钟，精密称定重量。再在上述温度干燥 1 小时，冷却，称重。至连续 两次称重的差异不超过 5mg 为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量。 4.1.24.1.2 试验结果试验结果 数据进行聚类分析，结果见表 5 和图 4。 4.24.2 总灰分测定总灰分测定 4.2.14.2.1 试验方法试验方法 参照 2010 版中国药典一部附录 K 项下总灰分的测 定方法：测定用的供试品需粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后， 取供试 品 3g，置恒重坩埚中，称定重量（精确至 0.01g） ， 缓缓炽热，注意避免燃烧， 至完全炭化时，逐渐升高温度至 580，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量， 计算供试品中总灰分含量。 4.2.24.2.2 试验结果试验结果 数据进行聚类分析，结果见表 5 和图 5。 4.34.3 浸出物测定浸出物测定 4.3.14.3.1 试验方法试验方法 参照 2010 版中国药典一部附录A 项下醇溶性浸出物 的热浸法测定方法：供试品需粉碎，使能通过二号筛，并混合均匀。取供试 品约 3g，精密称定，置 250ml 的锥形瓶中，精密加稀乙醇 100ml，密塞， 称定重量，静置 1 小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用稀乙醇补足减失重量， 摇匀，冷浸，用干燥滤器迅速滤过，精密量取滤液25ml，置已干燥恒重的 蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于 105干燥 3h 后，置于干燥器中冷却 30 分 钟，迅速精密称定重量，计算浸出物的含量。 4.3.24.3.2 试验结果试验结果 数据进行聚类分析，结果见表 5 和图 6。 表 5 黄连饮片水分、总灰分、浸出物的测定(，n=3)x 饮片编号饮片编号水分（水分（% %）总灰分（总灰分（% %）浸出物（浸出物（% %） YP-18.712.2729.14 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 7 YP-29.412.1228.77 YP-38.962.2030.94 YP-49.411.9728.71 YP-59.512.3732.02 YP-610.151.7727.27 YP-79.462.3728.53 YP-89.252.3024.43 YP-99.262.5327.33 YP-1010.342.5729.56 YP-117.342.8232.59 YP-1210.542.5024.59 YP-1310.122.5725.70 YP-149.682.2028.66 YP-1510.292.4027.90 YP-168.872.3026.26 YP-1710.511.7028.33 YP-1810.282.4229.59 从表 5 可知，18 批黄连饮片水分为 7.34%10.51%，总灰分为 1.70%2.82%，浸出物为 24.43%32.59%。均符合中国药典2010 年版一部 增补版对黄连饮片的规定。 图4 黄连饮片水分含量聚类分析图 由图4可见，若将6批黄连饮片按水分含量聚类成2类，则YP-11是第1类； YP-6、YP-10、YP-12、YP-13、YP-15、YP-17、YP-18、YP-1、YP-2、YP-3、YP- 4、YP-5、YP-7、YP-8、YP-9、YP-14、YP-16是第2类。 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 8 图5 黄连饮片总灰分聚类分析图 由图5可见，若将18批黄连饮片按总灰分聚类成2类，则YP-6、YP-4、YP-17 是第1类；YP-1、YP-11、YP-2、YP-3、YP-5、YP-7、YP-8、YP-9、YP-10、YP- 12、YP-13、YP-14、YP-15、YP-16、YP-18是第2类。 图6 黄连饮片浸出物聚类分析图 由图6可见，若将18批黄连饮片按浸出物聚类成2类，则YP-3、YP-5、YP-11 是第1类；YP-8、YP-12、YP-13、YP-16、YP-1、YP-2、YP-4、YP-6、YP-7、YP- 9、YP-10、YP-14、YP-15、YP-17、YP-18是第2类。 结合聚类分析数据和生产实际，考虑到水分能通过干燥而控制，总灰分、 浸出物可反映黄连饮片内在性质，对 2 个等级区别如下： 【黄连一级饮片】水分不得过 12.0%；总灰分不得过 3.5%；用稀乙醇作溶 剂，热浸法测定醇溶性浸出物不得少于 25.0%。 【黄连二级饮片】水分不得过 12.0%；总灰分不得过 3.5%；用稀乙醇作溶 剂，热浸法测定醇溶性浸出物不得少于 15.0%。 4.44.4 薄层色谱鉴别薄层色谱鉴别 参考中国药典2010 年版一部增补版黄连饮片项下规定，进行供试品溶 液、对照药材溶液和对照品溶液的制备。 4.4.14.4.1 供试品溶液制备供试品溶液制备 取黄连饮片粉末（过二号筛）0.25g，加甲醇 25ml，超 声处理 30 分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 9 4.4.24.4.2 对照药材溶液配制对照药材溶液配制 取黄连对照药材 0.25g，同供试品溶液制备方法制成 对照药材溶液。 4.4.34.4.3 对照品溶液配制对照品溶液配制 取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每 lml 含 0.5mg 的 溶液，作为对照品溶液。 4.4.44.4.4 固定相固定相 高效硅胶 G 薄层板。 4.4.54.4.5 展开溶剂系统的选择展开溶剂系统的选择 展开系统（中国药典2010 年版）：环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲 醇-水-三乙胺（3:3.5:1:1.5:0.5:1) (对槽加等量氨水，预饱和 20min)。 展开系统（参考文献）：甲苯醋酸乙酯异丙醇甲醇水 (631.51.50.3) (对槽加等量氨水，预饱和 20min)。 4.4.64.4.6 黄连饮片薄层色谱鉴别黄连饮片薄层色谱鉴别 结果见图 7。 展开系统 118.黄连饮片 YP-1YP-18 19.黄连对照药材 20.盐酸小檗碱对照品 展开系统 118.黄连饮片 YP-1YP-18 19.黄连对照药材 20.盐酸小檗碱对照品 图 7 18 批黄连饮片薄层色谱图 由图 7 可知，在紫外光灯（365nm）下检视，18 批黄连饮片供试品色谱中， 在与黄连对照药材色谱相应的位置上，显 4 个以上相同颜色的荧光斑点（Rf 由 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 10 大到小分别是 a.黄连碱、b.表小檗碱、c.小檗碱、d.巴马汀、e.药根碱，其中 药根碱由于含量低，斑点 e 非常模糊） ；与盐酸小檗碱对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光斑点。说明 18 批黄连饮片薄层色谱指纹信息一致。 4.54.5 含量测定含量测定 参考中国药典2010 年版一部增补版黄连项下规定，采用一测多评法测 定各批次药材中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量。 4.5.14.5.1 色谱条件及系统适应性试验色谱条件及系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙 腈-0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液（50:50） （每 100ml 中加十二烷基硫酸钠 0.4g， 再以磷酸调节 pH 值为 4.0）为流动相；检测波长为 345nm。理论板数按盐酸小 檗碱峰计算应不低于 5000。结果见图 8图 11。 nm220240260280300320340360380 mAU 25 50 75 100 125 150 175 200 *DAD1, 24.412 (209 mAU, - ) 为 为 为 =23.919 & 25.239 为 001-0101.D 345nm 图 8 盐酸小檗碱对照品紫外吸收光谱图 图 9 盐酸小檗碱对照品液相色谱图 图 10 阴性样品液相色谱图 药学院 2013 届本科毕业设计（论文） 11 图 11 黄连饮片液相色谱图 4.5.24.5.2 对照品溶液的制备对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成 每 1ml 含 125g 的溶液，即得。 4.5.34.5.3 供供试品溶液的制备试品溶液的制备 精密称定黄连饮片的粉末（过二号筛） ，置具塞锥形 瓶中，分别精密加入甲醇-盐酸（100:1）的混合溶液 50ml，密塞，称定重量， 超声处理（功率 250W，频率 40kHz）30 分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足 减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 2ml，置 10ml 量瓶中，加甲醇至刻 度，摇匀，取续滤液，即得。 4.5.44.5.4 黄连饮片含量测定黄连饮片含量测定 取 18 批黄连饮片粉末（过二号筛） ，照 4.5.3 供试 品溶液制备项下制备，精密