江苏省启东市高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离第2课时血红蛋白的提取与分离实.doc

实验血红蛋白的提取与分离1 下列各组物质中，由相同种类元素组成的是 A胆固醇、脂肪酸、脂肪酶 B淀粉、半乳糖、糖原C氨基酸、核苷酸、丙酮酸D性激素、生长激素、胰岛素2 血红蛋白由条肽链组成（）A2 B.4 C.3 D.53 下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是( )A可采集猪血作为实验材料B用蒸馏水重复洗涤红细胞C血红蛋白释放后应低速短时间离心D洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液4 细胞破碎后，各种蛋白质就会被释放出来，再根据蛋白质的不同特性进行提取。下列关于蛋白质提取的措施中，不正确的是（）A酸性蛋白质可用稀碱性溶液提取B水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)提取C脂溶性蛋白质可用有机溶剂提取D碱性蛋白质可用强酸性溶液提取5 红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。请回答下列有关问题：(1)样品处理，它包括_、_、收集血红蛋白溶液。(2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中经过透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是_。透析的原理是_ _。(3)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是_ _。6 在PCR扩增实验中，加入一种模板DNA片断，但实验却得到了2种产物DNA，其原因可能是()A基因突变 BTaq DNA聚合酶发生变异C基因污染 D温度过高7 在制备样品处理液的操作中正确的叙述是（ ）A先加入氢氧化铝，再加入氢氧化钠，然后过滤B先加入氢氧化钠，再加入氢氧化铝，然后过滤C先加入氢氧化钠，过滤后再加入氢氧化铝，然后过滤D先加入氢氧化铝，过滤后再加入氢氧化钠，然后过滤8 下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是（）A红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心B血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌C分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心、过滤后，用分液漏斗分离D透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12h 9 下列对血红蛋白的提取和分离实验相关叙述，错误的是( )A该实验的材料必须选用鸡血B通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取C凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质D电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形状不同进行分离10 下列是在洗涤红细胞所采用的方法是()A低速长时间离心 B低速短时间离心C高速长时间离心 D高速短时间离心参考答案：1 答案： B解析： A选项中胆固醇属于脂质，主要含C、H、O三种元素，而脂肪酶的化学本质是蛋白质，至少C、H、O、N四种元素；B选项中三种物质均为糖类，均由C、H、O三种元素组成；C选项中氨基酸至少含有C、H、O、N四种元素，而核苷酸含有C、H、O、N、P五种元素；D选项中性激素属于脂质，主要含C、H、O三种元素，而胰岛素的化学本质是蛋白质，至少含有C、H、O、N四种元素。2 答案： B解析： 血红蛋白由四条肽链组成，即两条肽链和两条肽链。3 答案： A解析： 为防止细胞吸水涨破，洗涤时要用生理盐水；释放出血红蛋白后，以2000 r/min的高速离心；在分离时，要等到红色蛋白质接近色谱柱底端时开始收集流出液。4 答案： D解析： 提取蛋白质的基本原理是根据蛋白质的物理性质，加入不同的试剂，使蛋白质溶于试剂中而提取蛋白质。强酸、强碱都会使蛋白质变性而沉淀。5 答案： (1)红细胞的洗涤血红蛋白的释放(2)去除相对分子质量较小的杂质透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在透析袋内(3)通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去解析： 样品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液。透析的目的是除去相对分子质量较小的杂质；应用的原理是半透膜的选择透过性，具体说就是小分子能自由出入，大分子保留在袋中。纯化的目的是将分子质量大的杂质蛋白除去。6 答案： C解析： 此现象属PCR技术假阳性现象，其原因是靶细胞污染造成的。因此，在PCR实验中，一定要做到隔离操作区，分装试剂，简化操作程序，用一次性吸管等，以尽量避免基因污染。7 答案： C解析： 先加入氢氧化钠的目的是中和过多的乳酸，制造弱碱性环境；过滤后再加入氢氧化铝使滤液的色素脱色，经过滤后，滤液变得无色透明。8 答案： C解析： 解：A、红细胞洗涤过程中应该用生理盐水，不能用蒸馏水，A错误；B血红蛋白的释放应该加入蒸馏水，使红细胞吸水涨破，释放其中的血红蛋白，B错误；C将搅拌好的混合液通过离心、过滤后，用分液漏斗分离出血红蛋白溶液，C正确；D透析所用的磷酸缓冲液的PH为7，D错误故选：C9 答案： A解析： 该实验的材料不能选用鸡血，而应用哺乳动物成熟的红细胞，因为后者没有细胞核和各种细胞器，有利于得到较纯净的血红蛋白；透析袋可允许小分子自由进出，而大分子则保留在袋内，因此通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取；凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质；电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形状不同进行分离。10 答案： B解析： 高速或长时间离心，会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯净的红细胞，进而影响血红蛋白的提取纯度。3