观察DNA和RNA在细胞中的分布实验及检测组织中的化合物实验.ppt
实验 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,还原糖+斐林试剂 _ 苏丹染液 橘黄色 苏丹染液 _ 蛋白质+双缩脲试剂 _,50 65 温水浴,砖红色沉淀,脂肪+,红色,紫色,1.还原糖的检测 选材:含糖量较高、_的植物组织 结论:组织样液中含有_,白色或近于白色,可溶性还原糖,砖红色沉淀,现配现用,2.脂肪的检测 方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹染液_ 方法二: 取材:花生种子(浸泡,去掉种皮),将子叶切成薄片 制片 观察:先在_下寻找已着色颗粒,再用高倍显微镜观察 结论:圆形小颗粒呈_,说明有脂肪存在,取最薄的切片，放在载玻片中央 滴23滴_染液(染色3 min) 去浮色 制成临时装片(滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片),橘黄色,苏丹,低倍显微镜,橘黄色,(12滴体积分数为50%的酒精溶液),3.蛋白质的检测 选材与制备:蛋清稀释液或豆浆滤液 结论:组织样液中存在_,4滴,紫色,蛋白质,双缩脲试剂：甲液：0.1g/ml的NaOH溶液 乙液：0.01g/m的CuSO4溶液,1.蔗糖溶液中加入斐林试剂后呈现什么颜色? 提示:蔗糖属于非还原糖,不与斐林试剂发生反应。观察到的现象不是无色,而是浅蓝色Cu(OH)2的颜色。 2.还原糖、蛋白质的鉴定实验中,在加相应试剂鉴定之前,为什么要留出一部分组织样液? 提示:留出一部分组织样液的目的是与鉴定后的样液颜色作对比,以增强实验的说服力。,3.斐林试剂与双缩脲试剂成分相同,但在使用时,斐林试剂甲液与乙液必须混合使用,而双缩脲试剂则先加A液,再滴加B液,请分析原因。 提示:鉴定还原糖的原理是新制Cu(OH)2与还原糖反应,Cu(OH)2被还原为Cu2O(砖红色);检测蛋白质的原理是肽键在碱性环境中与Cu2+反应产生紫色络合物,所以先滴加双缩脲试剂A液的目的是制造碱性环境。 4.用蛋清稀释液作为实验材料鉴定蛋白质,为什么一定要稀释到一定程度? 提示:如果不充分稀释蛋清液,与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不容易洗刷干净。,5.双缩脲试剂与斐林试剂有何异同? 提示:,甲液和乙液混合均匀后方可使用,且现配现用,使用时先加A液,再加B液,需水浴加热,不需加热,还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被还原为Cu2O,具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物,砖红色,紫色,乙液CuSO4溶液浓度为 0.05 g/mL,B液CuSO4溶液浓度为 0.01 g/mL,都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH溶液浓度都是0.1 g/mL,1.(2013·泉州模拟)在还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,最佳的一组实验材料是( ) 甜菜的块根 油菜籽 花生种子 甘蔗的茎 梨 蛋清液 豆浆 A. B. C. D. 【解析】选D。甜菜的块根和甘蔗的茎中含有的是蔗糖,不是还原糖,而梨中含有较多的葡萄糖和果糖,均为还原糖;油菜籽和花生中均含有较多的脂肪,但是油菜籽不易操作;蛋清液和豆浆均可做鉴定蛋白质的材料,因蛋清液无色,更易观察颜色变化。,2.(2013·福建联考)小李在进行生物组织中化合物的鉴定时,向待测样液中滴加3滴苏丹染液。结果样液被染成橘黄色,说明样液中存在( ) A.葡萄糖 B.脂肪 C.蛋白质 D.DNA 【解析】选B。苏丹染液将脂肪染成橘黄色,斐林试剂与葡萄糖反应生成砖红色沉淀,双缩脲试剂与蛋白质呈紫色反应,甲基绿将DNA染成绿色。,3.(2013·信阳模拟)收集健康人的4种液体,分别用斐林试剂鉴定。鉴定方法、液体和现象相匹配的一组是( ) A.不加热、尿液、不变色 B.隔水加热、血清、砖红色沉淀 C.酒精灯直接加热、唾液、不变色 D.不加热、胃液、蓝色,B,4.小麦种子萌发时产生淀粉酶,将淀粉水解为麦芽糖、葡萄糖等,小麦种子萌发的最适温度为30左右。取适量小麦种子在20和30培养箱中培养4天后,做如下处理:在3支试管中加入等量斐林试剂,并加热至50左右,摇匀后观察试管中的颜色。结果是( ),A.甲呈蓝色,乙呈砖红色,丙呈无色 B.甲呈无色,乙呈砖红色,丙呈蓝色 C.甲、乙皆呈蓝色,丙呈砖红色 D.甲呈浅砖红色,乙呈砖红色,丙呈蓝色,D,5.将发芽后的玉米种子研磨成匀浆、过滤,得到提取液,并按下表步骤操作:,经上述处理后,各试管分别加入斐林试剂1 mL,并置于5065水浴中2 min,试管中液体呈砖红色且颜色由浅到深依次是( ) A.甲、乙、丙 B.丙、甲、乙 C.甲、乙 D.乙、甲,C,观察DNA和RNA在细胞中的分布实验分析 1.实验原理 (1)DNA主要分布在 中,RNA大部分存在于 中。 (2)甲基绿和吡罗红对DNA、RNA的亲和力不同。 利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。 (3)盐酸能够改变 ,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的 分离,有利于DNA与染色剂结合。,细胞核,细胞质,细胞膜的通透性,DNA与蛋白质,2.实验流程 (1)制片:,(2)水解 (3)冲洗 (4)染色,(5)观察 先用低倍镜,再用高倍镜 (6)结果 细胞核部分被染成绿色,细胞质部分被染成红色 (7)结论 DNA主要分布在细胞核中,RNA主要分布在细胞质中,3.试剂及作用,使DNA呈现绿色,使RNA呈现红色,保持口腔上皮细胞的正常形态,改变细胞膜的通透性 使染色质中DNA与蛋白质分开,配制染色剂;冲洗载玻片,4.材料的选择 (1)人的口腔上皮细胞:取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质。 (2)哺乳动物成熟红细胞由于没有细胞核,不能做观察DNA和RNA分布的实验材料。,【思维拓展】 生物实验中需现用现配的试剂 (1)“观察DNA和RNA在细胞中的分布”时使用的吡罗红甲基绿染色剂。 (2)鉴定还原糖时使用的斐林试剂。 (3)“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”时染色体染色使用的醋酸洋红液。,1.可选用植物的叶肉细胞作为观察DNA和RNA在细胞中分布的实验材料。( ) 【分析】叶肉细胞中含有的叶绿体呈现绿色,会干扰实验中颜色的观察。 2.(2009广东T6和2009江苏T21A)淀粉可以用斐林试剂鉴定并呈现蓝色。水浴加热条件下,蔗糖与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀。( ) 【分析】淀粉和蔗糖是非还原糖,不与斐林试剂发生反应,但是淀粉可以用碘液鉴定并呈现蓝色。,×,×,【典例3】“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中,下列操 作正确的是( ) A.染色时先用甲基绿染液染色,再滴加吡罗红染液 B.将载玻片用质量分数为8%的盐酸处理后即用染色剂染色 C.观察时应选择染色均匀、细胞质色泽较深的区域 D.冲洗载玻片时,要用蒸馏水的缓水流冲洗,D,【互动探究】 (1)本实验能否选用紫色洋葱鳞片叶外表皮做材料? 提示:不能。因为紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞的液泡中含有紫色物质,会干扰实验的结果观察。 (2)将口腔上皮细胞置入质量分数为8%的盐酸溶液的最主要目的是什么? 提示:用盐酸改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞。,【变式训练】下列关于“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验的说法,正确的是( ) A.甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同,实验中应分别加入甲基绿和吡罗红 B.盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞 C.该实验用口腔上皮细胞而不用叶肉细胞,是因为叶肉细胞不含RNA D.盐酸有利于染色质中DNA与蛋白质分离,不利于DNA与染色剂结合,B,4.下列关于“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验正确的是 ( ) A.实验步骤为:制作装片水解染色观察 B.可以用紫色洋葱鳞片叶细胞替代人口腔上皮细胞 C.使用盐酸只是为了杀死细胞 D.甲基绿使DNA呈绿色,吡罗红使RNA呈红色,D,
