微生物业务学习2013-02.ppt

临床微生物检验,仁和医院检验科 蒲燕·马世原,一·血液与骨髓标本的细菌培养,1·结果报告：当人体由于感染细菌或真菌播散到血液引起菌血症，如处理不及时就会发展为毒血症或败血症，其死亡率随不同程度而增加，因此微生物室应及时将血培养结果通知临床医生，为做到快速，可采取血培养分级报告制度。 （1）一级报告：血培养如在24h和48h内未生长，可发初步报告，报告血培养24h未生长或48h未生长。 （2）二级报告：将可疑生长的培养瓶内肉汤转种血平板及巧克力平板，并做直接非标准抗菌药敏实验，经68h培养后，将结果及时通知临床医生，主要报告高敏的抗菌药物。 （3）三级报告：传统方法培养7d，自动血培养仪培养5d，仍无细菌生长者，报告无细菌生长。上述转种平板上生长出单个菌落，应立即完成鉴定及标准化的药敏试验，并发出正式的细菌检验报告单，包括菌种名和药敏报告。此两种均为最终报告。,临床意义,随着医学技术的发展，广谱、超广谱抗生素的使用，耐药菌株显著增加，血培养中分离的各种微生物种类也显著增加，常见病原菌如下： （1）金黄色葡萄球菌：人类感染的最主要的葡萄球菌，金葡菌是该属产毒素和毒力最强的菌种。由于抗生素的大量使用导致耐甲氧西林或苯唑西林的金葡菌（MRSA）显著增多 （2）凝固酶阴性的葡萄球菌（CNS)：该菌为人类正常寄生菌 其中表皮葡萄球菌主要引发医源性感染。如关节术后，外科创伤， 泌尿道和静脉导管感染等。,（3）A群链球菌：该菌有较强的侵袭力，能产生多种外酶和外毒素，是引起化脓性感染的主要菌种，致病力强，也是引起败血症的主要菌株。 （4）B群链球菌：又称无乳链球菌。该菌是正常寄居于妇女阴道和人体肠道，带菌率高达30%左右，因此该菌是引起新生儿败血症的主要病原菌。 （5）肺炎链球菌：该菌存在于正常人群口腔、鼻咽部、 属正常菌群，带有荚膜的肺炎链球菌菌株在细菌的 侵袭力上起重要作用，当机体抵抗力下降，该菌 引起大叶性肺炎、支气管炎。 （6）草绿色链球菌：此类链球菌常定居 在扁桃体、鼻咽或牙龈中可发生局部感染， 该菌也是亚急性心内膜炎的主要病原菌。,肺炎链球菌及药敏,（7）肠球菌：近年来该菌是引起急性心内膜炎的主要病原菌之一，肠球菌的耐药性较高，特别是庆大霉素的耐药菌株，用青霉素类抗菌药物治疗时，不能和氨基糖苷类联合用药。 （8）：产单核李斯特菌该菌是新生儿败血症的主要病原菌之一，常从产道感染，死亡率很高。 （9）脑膜炎奈瑟菌：引起脑膜炎的病原菌，一般先侵入鼻咽部，引起上呼吸道感染，进而侵入血流，造成菌血症和心内膜炎。 （10）：革兰阴性杆菌：主要有：1.沙门菌、大肠埃希菌、沙雷菌、克雷伯菌。其中沙门菌所致疾病主要有伤寒和副伤寒。大肠埃希菌和克雷伯菌是质粒介导的产超广谱B-内酰胺酶（ESBLs)的代表菌种，该菌株能分解B-内酰胺环而导致B-内酰胺类药物失效。2.非发酵革兰阴性杆菌常见有铜绿假单胞菌，、不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌等。铜绿是发生烧伤后败血症的最常见病原菌，也是院内感染的主要病原菌。不动杆菌是机会致病菌，其中最常见的是鲍曼不动杆菌，其耐药情况不容乐观。常成全部耐药既泛耐药鲍曼不动杆菌给临床治疗带来困难。,（11）真菌：真菌菌血症常发生于重症疾病的晚期，特别是应用广谱抗生素和皮质激素后，由于机体免疫功能低下，在原发病灶加重的同时，常发生继发感染及二重感染，任何部位，尤其是正中静脉插管或留置导管均可引起真菌感染，分离到的真菌以念珠菌为主，特别是白色念珠菌。当血培养中分离到曲霉菌，怒能轻易判断为污染菌，曲霉菌菌血症近年来有增加的趋势，常由于败血症引起系统性感染，死亡率可达95%以上。 （12）：厌氧菌：研究资料表明，厌氧菌引起的血液感染占菌血症的20%。厌氧菌引起的口腔感染、牙周感染、咽颊炎等是导致心内膜炎的原发病灶，最常见的有消化链球菌、拟杆菌、梭杆菌、丙酸杆菌等。,二、尿液标本的细菌培养,尿液的细菌培养一般为中段尿培养加菌落计数。它对于泌尿道感染的诊断有重要的价值。正常的尿液是无菌的，从膀胱穿刺取出的尿也应是无菌的，而外尿道有正常的菌群寄生，标本的采集必须无菌操作。中段尿的采集应先从清洁外阴及尿道口周围，自然排尿，让尿流不间断，截留中段尿，置于无菌大口容器或尿运送杯中，不少于1ml。 此法必须告诉患者。,1.结果报告 常规尿培养48h后未生长可报告“培养两天无菌生长”。 如有细菌生长报告鉴定结果和药敏试验，并报告菌落计数。 2.临床意义： 中段尿污染细菌不会太多，如果同份标本中检出3种以上的不同微生物，应认为被污染。一般认为尿标本中革兰阴性菌菌落计数大于105 cfu/ml、革兰阳性菌菌落计数小于104 cfu/ml才有意义。但菌落计数低于这个标准并不能排除尿路感染，主要见于一下情况：1.应用抗菌药物，尿中细菌繁殖收到抑制。2.病原菌发育要求条件高。3.尿频时，膀胱内细菌停留时间短而细菌数量少。4.大量输液或使用利尿剂使尿液稀释。5.尿液PH5.0或8.5，细菌发育受阻。6.采尿时外阴部的消毒剂混入尿中。,最常见的泌尿道感染部位是膀胱和尿道。无论男性或女性患者，泌尿道感染可能是无症状的、急性或慢性的。在各种泌尿道感染中，常见的病原菌如下： （1）：金黄色葡萄球菌：尿路感染的常见病原菌，其致病力强且近年来耐甲氧西林或耐苯唑西林的金葡菌比例增多，MRSA常呈多重耐药。 （2）凝固酶阴性葡萄球菌：其中腐生葡萄球菌为凝固酶阴性葡萄球菌，是尿路感染中最常见的葡萄球菌，尤其是年轻妇女的尿路感染。表皮葡萄球菌也是常见的尿路感染菌。 （3）肠球菌：常引起尿路感染、尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等。绝大多数为粪肠球菌。 （4）革兰阴性杆菌：包括大肠埃希菌、克雷伯菌、变形杆菌、肠杆菌、普罗威登菌、沙雷菌、不动杆菌、假单胞菌等。其中大肠埃希菌是尿路感染中最常见的病原菌。 （5）结核杆菌：尿培养分离到结核杆菌是诊断肾结核的依据之一，本病多见于2040岁，男性多于女性。 （6）淋病奈瑟菌：淋病的病原菌，是性传播疾病发病率最高的，约占性病的70%。 （7）真菌：尿培养中分离到的真菌主要是各种假丝酵母菌，大多数念珠菌尿的患者为无症状的。 （8）阴道加德纳菌：近年来发现阴道加德纳菌可以引起尿路感染、肾周围脓肿和膀胱炎。该菌主要通过性传播。,三、粪标本的细菌培养,正常人的肠道内栖居大量的不同种类的微生物，包括大量的厌氧菌和大肠埃希菌、肠杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌等，组成人类健康的体内微生物的生态环境。这些细菌一般不致病，一旦倡导发生病理改变或抗生素的大量使用，就可能导致菌群失调，引发疾病。 1.结果报告： 由于粪便中存在大量细菌，有多种细菌可以引起腹泻，而且不少细菌要求特殊的培养，在分离粪便中的致病菌时，如未提供不要的生长条件，培养阴性结果，不应该报告“无致病菌”或“未检出致病菌”。目前常规以SS培养基（平板）和中国蓝平板分离分辨中的致病菌，所以阴性报告为“无沙门菌生长和志贺菌生长”。如有致病菌生长报告鉴定结果和药敏试验。,粪便细菌培养检验报告单：,2.临床意义：粪便培养中常见的病原菌有：志贺菌属、沙门菌属、致病性大肠埃希菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、类志贺邻单胞菌、小肠结肠炎耶尔森菌、金黄色葡萄球菌、结核分枝杆菌、弯曲菌属、假单胞菌属。 （1）志贺菌属：包括A群（痢疾）、B群（福氏）、C群（鲍氏）、D群（宋内）。该菌主要引起细菌性痢疾，症状主要包括腹部痉挛、腹痛、腹泻、里急后重等。其中福氏和宋内引起感染的比例最高。 （2）沙门菌属：该菌盖然临床表现为3种类型：1.肠热症。2.败血症。3.食物中毒。 （3）致病性大肠埃希菌：引起肠道感染的大肠埃希菌主要有4种类型，即产肠毒素大肠埃希菌（ETEC)、致病大肠埃希菌（EPEC）、侵袭性大肠埃希菌（EIEC)和出血性大肠埃希菌（EHEC)。ETEC是发展中国家儿童急性腹泻和旅行者腹泻的常见致病菌。 （4）霍乱弧菌：根据具体O抗原不同科分为O1群和非O1群霍乱弧菌。 O1群霍乱弧菌在小肠内产生大量的肠毒素，作用于小肠黏膜，分泌大量肠液，表现为腹泻、脱水、酸中毒，如不及时抢救，患者可在数小时内死亡。非O1群霍乱弧菌科一起感染性腹泻，近年来也不断被人们所重视，如O139血清型可引起累世霍乱的急性脱水性腹泻。,（5）副溶血弧菌：该菌是海洋微生物，可污染食品引起食物中毒，主要引起人类急性胃肠炎表现为腹部绞痛、腹泻、粪便呈水样，类似霍乱，或粪便中带血及黏冻，常被误诊为痢疾。50%患者有呕吐，严重病例有失水症状，甚至大量失水而至循环衰竭。 （6）类志贺邻单胞菌：该菌引起肠道内感染，一般表现为腹泻，与进食生水和海产品有关，好发于温暖的季节。 （7）气单胞菌属：该菌为追中常居菌，可引起人类的肠道感染，表现为腹泻。 （8）小肠结肠耶尔森菌：该菌在4条件可生长并产生毒素，因此易引起食物中毒，多见于小儿，引起腹泻、腹痛、发热等症状。 （9）金黄色葡萄球菌：该菌易引起食物中毒，主要由于摄入含有葡萄球菌肠毒素的食物所致。金葡菌还可引起伪膜性肠炎。 （10）艰难芽胞梭菌：该菌是抗菌药物相关性腹泻的主要病原菌，感染后的临床症状可从轻度腹泻到致命性伪膜肠炎。 （11）结核分枝杆菌：该菌主要引起肠结核。 （12）弯曲菌属：主要包括空肠弯曲菌和结肠弯曲菌肠道病变程度不一，轻的变现为短暂、自限性肠炎。重的表现为伴有严重腹泻、腹痛、发热和肌痛的爆发性小肠结肠炎。 （13）假单胞菌属：主要为铜绿假单胞菌，是医院内感染的主要病原菌之一，还可引起婴儿严重的流行性腹泻。,四、痰液及支气管分泌物的细菌培养,正常人的下呼吸道是无菌的，分泌物经上呼吸道排出时常受该处的正常菌群的污染，如草绿色链球菌、奈瑟菌等。 痰标本应在医护人员指导下留取标本，告诉患者先用冷开水漱口清洗咽喉，咳出痰液，置于广口容器中，常规培养 2h送到实验室立即接种。,痰液细菌培养检验报告单,1.结果报告：痰培养未检出致病菌的报告“正常菌群生长”。如有致病菌生长报告鉴定结果和药敏试验，并且报告细菌军中应注明各自数量和比例情况。,2.临床意义：痰培养对于呼吸系统感染的诊断有重要意义，由于上呼吸道存在正常菌群，因此必须要区分是致病菌还是污染菌。 （1）肺炎链球菌：该菌主要引起大叶性肺炎和支气管肺炎，近年来耐青霉素的肺炎链球菌（PRP)及多重耐药菌增加。 （2）流感嗜血杆菌：该菌可引起人类呼吸道感染，也可随血液入侵组织内部，导致脑膜炎、关节脓肿。 （3）百日咳鲍特菌：是小儿百日咳的病原菌，可通过飞沫传染，致病物质为不耐热的外毒素和耐热的内毒素。 （4）A群链球菌：该菌有较强的侵袭力，能产生多种胞外酶和外毒素。 （5）结核分枝杆菌：引起肺结核的病原菌，主要 由呼吸道入侵导致感染和发病。该菌 抵抗力强，分解和患者是主要传染源。,结核分枝杆菌 的抗酸染色,（6）白喉棒状杆菌：是急性呼吸道传染病白喉的病原菌，该菌常见从呼吸道入侵，最初侵犯扁桃体、咽部、咽喉部，形成灰白色的伪膜。产生的外毒素可损害心肌和神经系统，出现白喉的各种临床症表现，死亡率高。 （7）卡他莫拉菌：上呼吸道的正常菌群，近年来证实本菌可引起中耳炎、肺炎、心内膜炎、和脑膜炎等。 （8）嗜肺军团菌：是军团菌病的病原菌，通过空气传播进入肺部，可表现为肺部感染、发热、头痛、肌肉痛等。 （9）脑膜炎奈瑟菌：主要引起人类流行性脑膜炎。 （10）肺炎克雷伯菌：人类呼吸道的常居菌，是较为常见的条件致病菌，可引起肺炎等。,（11）假单胞菌属：是院内感染的主要病原菌之一，当机体抵抗力下降时，如代谢疾病、血液病和恶性肿瘤。 （12）诺卡菌：主要有星诺卡菌和巴西诺卡菌。星形诺卡菌通过呼吸道引起人类的原发性、化脓性肺部感染。 （13）酵母样真菌：最常见为白色念珠菌，当机体抵抗力下降时，可称为致病菌侵入呼吸道引起感染，为常见的肺真菌病。 （14）丝状真菌：常见的曲霉菌和毛霉菌。人通过吸入空气中曲霉菌孢子而感染故以肺部曲霉菌多见。最常见的毛霉病是鼻脑毛霉病，有的患者可发生飞鹤播散性毛霉感染。此病一旦发生，病情急，进展快，死亡率很高。,五、脓液标本的细菌培养,组织或器官的化脓性感染，其病原菌的来源可分为两类： 一是内源性。感染源是炎症局部器官的正常菌群，由于损伤等因素造成正常菌群进入无菌状态的组织中，发生感染。 二是外源性。感染源是存在于人体外部自然界的微生物，由于外伤和直接接触，外界微生物通过人体表面进入人体，造成感染。,1.结果报告： 如培养4872h后对无菌部位的感染，从脓液或分泌物中分离到细菌一般均有临床意义，按分离鉴定的菌种报告细菌名称和药敏鉴定结果。,2.临床意义。 眼分泌物培养常见的病原菌有金黄色葡萄球菌、A群链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、淋病奈瑟菌、铜绿假单胞菌和真菌等。若有此类细菌生长，提示有眼部感染。 耳拭子培养常见的病原菌有金黄色葡萄球菌、A群链球菌、卡他莫拉菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和真菌等，这些细菌可引起耳部感染如中耳炎、外耳道感染等。 鼻咽拭子培养几乎没有无菌的，分离出的细菌不 一定就是与疾病有关的细菌，因此要重视报告中的细 菌数量。常见的病原菌有金黄色葡萄球菌、A群链球菌、肺炎链球菌、表皮葡萄球菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌和真菌等，可引起肺部感染、细菌性鼻炎、鼻腔脓肿等。,2.临床意义：所有的创伤均有细菌污染，时候发生感染，取决于创伤的大小、组织破坏情况、染菌数量与种类、处理过程、机体免疫力和抗生素的应用等多种因素。 （1）金黄色葡萄球菌：最常见人类化脓性感染的致病菌，可引起疖、痈、皮下软组织脓肿、外科切口感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎等。 （2）化脓性链球菌：可引起浅表部软组织脓肿、急性化脓性骨关节炎、骨髓炎、淋巴管炎、蜂窝织炎等。 （3）厌氧菌：最常见的是厌氧消化链球菌，可引起人体各部委组织器官的感染，又以混合感染为多见。 （4）铜绿假单胞菌：属条件致病菌，常引起手术感染、褥疮、脓肿、烧伤后感染、化脓性中耳炎等。 （5）诺卡菌：在感染组织中有“硫磺样颗粒”。 （6）肠杆菌科细菌：包括大肠埃希菌、克雷伯菌、变形杆菌、肠杆菌、普罗威登菌、沙雷菌等可引起人体各部位组织器官的感染。 （7）凝固酶阴性葡萄球菌：表皮葡萄球菌可引起人类各部位组织器官的感染。 （8）气单胞菌：可引起肠外感染，主要为伤口感染、心内膜炎、脑膜炎等。,谢谢大家！,