第五节提取分离.ppt
第五节、提取分离,（一）提取 1.酸水提取法 2.醇类溶剂提取法 3.与水不相混溶的有机溶剂提取法,1.酸水提取法 （1）离子交换树脂法：酸水提取液通过离子交换树脂,（2）沉淀法 酸提碱沉法,盐析法：适用中等弱碱。,黄藤1%H2SO4水溶液,H2O,沉淀,碱化至pH=9；加NaCl达饱和,掌叶防已碱,雷氏铵盐沉淀法,季铵碱的水溶液,水溶液,沉淀(雷氏复盐),雷氏铵盐沉淀,沉 淀,滤 液,滤液 (B2SO4),硫酸钡沉淀,季铵碱的盐酸盐,加酸水调至弱酸性 加新配制的雷氏铵盐饱和/H2O,溶丙酮（乙醇）中 加Ag2SO4饱和水溶液,加入氯化钡（BaCl2）,2.醇类溶剂提取法,生 药,H+ / H2O,药 渣,醇 液,OH-/H2O,醇或酸性醇,挥醇；加酸水,碱性较弱的碱,亲水性Alk,CHCl3,沉 淀,Alk,OH-/H2O CHCl3,3.与水不相混溶的有机溶剂提取法,生 药,残 渣,CHCl3,CHCl3,H+/H2O,碱化（如NH4OH）（使Alk游离） 渗滤（或浸渍）（如CHCl3等）,H+/H2O,OH-/H2O,Alk沉淀,亲水性Alk,碱性较弱的Alk,（二）分离 溶解性重结晶法 碱性强弱pH梯度萃取 色谱法,（二）分离,生物碱的分离,系统分离,特定分离,多用于基础研究,侧重于生产实用,总 碱,单体Alk的分离,类别 指酸碱性强弱,部位 指极性不同,依据Alk的理化性质,(1)利用生物碱及其盐类的溶解度不同进行分离,(2)利用生物碱碱性强弱不同进行分离,PH梯度分离法 混合物溶于稀酸水，逐渐调碱性，分别用CHCl3萃取 PH由低到高，生物碱碱性由弱到强 混合物溶于CHCl3中，用缓冲液依次萃取 PH由高到低，生物碱碱性由强到弱,(3)利用生物碱的特殊功能团性质进行分离：,(5)色谱法 常用氧化铝作吸附剂 硅胶柱：展开剂中一般加少量二乙胺等碱性试剂； 大孔树脂 Sephdex-LH20 各种加压柱：低压柱、中压柱、制备性HPLC等；,提取分离实例长春碱与长春新碱,长春花全草,(干粉80目),苯渗漉液,药 渣,苯 液,H+/H2O,苯渗漉,pH=4,6%酒石酸水溶液萃取,过滤，氨水碱化至 pH=67 CHCl3提,除水杂,除脂杂,除碱性较强的成分,H2O,CHCl3,弱碱,Alk硫酸盐,回收氯仿，蒸干 溶于无水乙醇 H2SO4调pH=3.84.1 Alk沉淀,溶于H2O，氨水碱化至 pH=89 CHCl3萃取,除脂杂,除水杂,精 制,H2O,CHCl3,游离Alk,长春碱,醛基长春碱,回收氯仿,溶于苯:氯仿(1:2)液中 通过Al2O3吸附柱 用苯:氯仿(1:2)洗脱,色谱分离,（一）色谱法 1.薄层色谱法 2.纸色谱法 与对照品共薄层，与文献报道的数据进行对照。 测定理化常数（如：熔点），测定其衍生物的理化数据等来鉴定生物碱。,第六节 生物碱的结构鉴定与测定,（二）谱学法 紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振 UV反映分子中所含共轭系统情况； IR利用特征吸收峰，鉴定结构中主要官能团； NMR各种技术图谱测定结构； MS依据文献，结合主要生物碱类型的质谱特征进行解析。,一、光谱法在生物碱的结构鉴定与测定中的应用 (一)紫外光谱 当生色团（羰基、双键、苯基和硝基等）在生物碱的整体结构中 时，UV可以反映其骨架类型特征，对其骨架类型的判断和推定有重要作用。如：吡啶、喹啉、氧化阿朴菲等。,若生色团仅是连接在生物碱的母核上或侧链上时，其UV对判断其母核类型的作用十分有限。不同类型的生物碱具有相同或相似的UV谱，不能由UV谱推断生物碱的骨架类型。如托品类、苄基四氢异喹啉类、二氢吲哚类等。,(二)红外光谱,1.酮基的吸收 有跨环效应时，酮基吸收在1660-1690cm-1 2.Bohlmann吸收带 在反式喹诺里西丁环中，凡氮原子邻碳上的氢有二个以上与氮孤电子对呈反式双直立关系者，且氮孤电子不参与共轭时，则在2800-2700cm-1区域有2个以上明显的吸收峰,而顺式异构体则此峰极弱。,(1)二个以上与氮孤电子对呈反式双直立氢,(2) 氮孤电子不参与共轭,注意点：,(1)在氯仿溶液中测定时，多为二个峰；用KBr压片时，多为一簇峰； (2)含有喹诺里西丁环的生物碱结构类型： 喹诺里西丁类、吐根碱类、吲哚碱类中的柯南因-阿马利新类和育亨宾类、异甾碱中原介藜芦碱类和西藜芦碱类；,(三)质谱,1.难于裂解或由取代基或侧链的裂解产生特征离子 包括：a.由芳香体系组成分子的整体或主体结构的生物碱，如：喹啉类、4-奎酮类等。 b.具有环系多、分子结构紧密的生物碱。如吗啡碱、秋水仙碱、取代氨基甾体生物碱类。,4-奎酮类,丰土那明丙素,2.主要裂解受氮原子支配,金鸡宁,以N原子为中心的裂解（涉及骨架裂解）生成的含N部分多为基峰或强峰，该裂解方式对生物碱基本骨架的测定有重要意义 如金鸡宁类、甾体生物碱类等。,3.主要由RDA裂解产生特征离子,主要包括含四氢-卡波林结构的生物碱及无N-烷基取代的阿朴菲类等。,4.主要由苄基裂解产生特征离子,代表化合物：苄基四氢异喹啉类、双苄基四氢异喹啉等,(四)核磁共振谱,1、1H-NMR 通过分析、J值、裂分情况等多种参数，来确定H的化学环境、个数以及空间位置等。 生物碱品种繁多，但同类型的生物碱的1HNMR谱有规律可循；因此要深刻了解其结构的规律，方能进行1HNMR解析。,13C-NMR在生物碱结构测定中也十分重要，可以通过C的个数和类型等信息来确定化合物分子的骨架类型和立体构型。,小结 第一节 概述 掌握生物碱的定义和存在形式 第二节 生物碱生物合成的基本原理 了解生物合成的基本原理 第三节 生物碱的分类 掌握生物碱的主要结构类型,第四节 生物碱的理化性质 1.掌握生物碱的形态、颜色、旋光性及生物碱和生物碱盐的溶解性及其应用 2.掌握生物碱常用的沉淀反应和显色反应及其在鉴定当中的应用。 3.掌握生物碱的碱性，碱性强弱与生物碱分子结构的关系及其在提取分离中的应用。,第五节 生物碱的提取分离 掌握生物碱提取的一般原理和方法 第六节 生物碱结构鉴定与测定 了解生物碱的结构鉴定方法,The End,
